Своевременно проведённый анализ выявляет патологию на ранней стадии развития, что облегчает борьбу за здоровье пациента. Не каждый обыватель знает, что за анализ РПГА указан в бланках с результатами, и как его расшифровать.

Получить направление на анализ крови с аббревиатурой РПГА может любой человек, так как это распространённое исследование для людей, которым необходимо пройти медицинскую комиссию для трудоустройства либо перед операцией. Необходимо женщинам, планирующим встать на учёт по беременности.

РПГА-анализ крови: расшифровка

Лечащий врач назначает проведение анализов, в числе которых таинственная аббревиатура РПГА. Что такое РПГА в бланках анализов крови? Под этой аббревиатурой понимают особую реакцию, используемую в микробиологии и иммунологии и позволяющую выявить пассивную (непрямую) гемагглютинацию (второе обозначение анализа – РНГА). Показатель выявляет возбудителей заболеваний инфекционного и венерического характера.

Внимание! Ни один анализ нельзя расценивать как 100% подтверждение диагноза. Для уточнения подозрений понадобится проведение дополнительных исследований.

Подробнее о видах анализов на сифилис можно узнать из видео ниже:

Возбудитель, обнаружение которого позволяет диагностировать поражение организма сифилисом, называется «бледная трепонема». Под его воздействием в ходе проведения анализа отмечено склеивание и выпадение эритроцитов в осадок. Такую реакцию называют агглютинацией красных кровяных телец.

Результаты лабораторного анализа

Механизм определения заражения несложен. Оказавшись в здоровом организме, бледная трепонема вызывает ответную реакцию, которая выражается в выработке антител к возбудителю. Выявление присутствия антител, являющихся иммунным ответом, и будет основанием для установления диагноза. Обнаружить их наличие в организме пациента возможно на 15-30 день с момента инфицирования. По этой причине специалисты для большей достоверности результатов советуют анализировать их в динамике.

Бледная трепонема – возбудитель сифилиса

Свидетельствовать о наличии либо отсутствии бледной трепонемы в организме человека могут два типа антител:

1. Нетрепонемный (неспецифический).
2. Трепонемный (специфический).

РПГА-анализ относится к серологическим методам лабораторной диагностики. Впервые его применили в 1965 году, и до нынешнего времени остается широко используемым методом исследования благодаря высокой чувствительности и способности определить стадию патологии. Серологические реакции – основание для установления наличия венерических заболеваний в организме. Реакция пассивной гемагглютинации относится к специфичным тестам. Тестами данного типа являются анализы:

• ПЦР, или полимерная цепная реакция. Позволяет выявить тСПИД (синдром приобретённого иммунодефицита), ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), уреаплазму половых органов, хламидиоз и многое другое.
• РИФ и РИБТ-анализы. Применяются для выявления скрытого сифилиса, не проявляющегося яркой симптоматикой.
• ИФА, или иммуноферментный анализ, позволяющий на основе изменения ферментной активности меток на антителах выявить аутоиммунные, венерологические и инфекционные заболевания.
• Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод для подтверждения диагнозов у людей с неопределёнными или положительными результатами таких тестов как РПГА и ИФА.

К нетрепонемным видам анализов, применяемых для выявления сифилиса в комплексе с остальными тестами, относится анализ РМП.

Стадии протекания заболевания

Благодаря результатам анализа крови пациента на РПГА можно выявить наличие возбудителя патологии и установить стадию заболевания. Выделяют 4 формы поражения сифилисом:

• латентная;
• первичная стадия;
• вторичная стадия;
• третичная стадия.

Расшифровку полученных результатов проводит квалифицированный специалист, который сделает выводы на основании анализа. Для первичной стадии заболевания показателен результат, обозначаемый парой цифр 1:320 (титры реакции), достоверность исследования на данном этапе составляет 86%. Однако такие показатели могут говорить о наличии скрытого сифилиса. На следующих этапах развития патологии диагностическая точность исследования выше и достигает 100%.

В некоторых случаях возможно получение ложноположительного результата. Количество ложноположительных реакций не превышает 2,5% от общего числа лабораторных анализов, а обычно ниже. Положительный результат анализа РПГА у пациентов, не страдающих сифилисом, возможен при следующих обстоятельствах и отклонениях:

• Наличие антител к иным возбудителям, схожим с бледной трепонемой.
• Наблюдение ВИЧ-инфекций, гепатитов C или B.
• При значительных травмах и обширных переломах.
• При заболеваниях онкологического характера.
• Системные патологии соединительной ткани.
• Результат могут искажать некоторые заболевания (туберкулёз, брюшной тиф).

Важно! На РПГА 2 анализ крови, ИФА положительная расшифровка наблюдается на протяжении всей жизни у пациентов, переболевших сифилисом в прошлом. Данный результат анализа для бывших пациентов – норма.

РПГА-анализ и другие инфекционные заболевания

Анализ крови на РПГА, расшифровка которого важна для диагностирования сифилиса, даёт возможность выявления и других инфекций. Сдавать его понадобится людям с подозрением на сальмонеллез – острая кишечная инфекция, возбудителями которой служат сальмонеллы.

Возбудитель сальмонеллеза

При развитии заболевания у больного наблюдается интоксикация и поражение структур желудочно-кишечного тракта. В зависимости от клинической формы, в которой протекает патология, наблюдаются симптоматические проявления:

• рвотная реакция;
• нарушения стула (становится жидким, приобретает неприятный запах, возможно появление примесей крови или слизи);
• болезненные ощущения в области живота;
• повышение температуры и озноб;
• нарушение водно-солевого баланса в организме, что отрицательно влияет на самочувствие пациента, и т.д.

Анализ с коревым маркером – альтернатива для диагностирования кори, вызывающей поражения слизистой зрительных органов, дыхательных путей и полости рта. Патологии сопутствует тяжёлая интоксикация и сыпь на кожных покровах больного.

Высыпания на коже ребёнка при кори

Метод РПГА-исследования позволяет выявить антитела против возбудителя столбняка. Столбняк – острая инфекционная патология, возбудитель которой может попасть в организм при нарушении целостности кожных покровов и слизистых оболочек, использовании нестерильных материалов в медицинских учреждениях и т.д.

Клиническими признаками заболевания являются симптомы:

• Повышенный тонус мышц (ригидность).
• Ухудшение общего состояния, недомогание и повышенная раздражительность, ухудшение аппетита.
• Судороги лицевых мышечных тканей.
• Боль тянущего характера вокруг места поражения.
• Угнетение глотательной функции.

РПГА, ПЦР и ИФА-тесты используются на разных этапах коклюша при диагностировании. При этом заболевании на начальной стадии зачастую отсутствуют прямые симптомы, что отодвигает по времени возникновение подозрений на инфицирование.

Температурные показатели организма могут меняться, но способны оставаться и на нормальном уровне. Со временем появляется кашель, который позже приобретает приступообразный и спазматический характер.

Коклюш у детей

Подготовка к сдаче анализа и порядок проведения

Для проведения анализа у пациента будет взят образец крови из вены. Чтобы в полученных результатах не возникало сомнений, врач дает рекомендации:

• Сдавать анализ на голодный желудок, процедура проходит в утреннее время, что позволяет добиться 8 часов с момента последнего приёма пищи.
• Желательно не курить за несколько часов до забора материала для анализа.
• Употребление спиртных напитков исключить.
• При употреблении медицинских препаратов предупредить лечащего врача, который даёт направление на анализ.

Забор крови на исследование

Проведения РПГА-исследования не стоит бояться или стесняться. Ведь анализ назначается людям с явными признаками венерических заболеваний и при бытовой необходимости. Список показаний к обследованию обширен:

• Полное обследование – необходимое условие перед проведением хирургических операций.
• Перед госпитализацией на стационарное лечение.
• Обязательно для людей, желающих стать донорами.
• Входит в список обследований, необходимых для оформления санитарных книжек и трудоустройства.
• При наличии случаев прямого контакта с заражёнными людьми.
• В случае подозрений на такие заболевания, как корь, сальмонеллез, дифтерия, столбняк, коклюш и многие другие.
• При обнаружении характерной симптоматики сифилиса (увеличение лимфоузлов, высыпания язвенного типа и т.д.).

Анализ РПГА относится к широко используемым методам диагностики бактериологических патологий. При обращении к квалифицированному специалисту можно быть уверенным в своевременном определении заболевания и его успешном лечении. Будьте здоровы!

Очень часто пациенты выходят из кабинета с квадратными глазами, разглядывая кучу бланков на сдачу анализов в руках. Общий анализ крови и анализ мочи вопросов не вызывают, зато все остальные!

Например, кровь на РПГА. Что это за странные буквы? Для чего берут "лишнюю" кровь, когда уже все ясно?

Это только пациенту кажется, что все понятно, а врачу для того, чтобы поставить диагноз, нужен именно этот анализ.

Что это за хитрый анализ?

Если дали направление с этими странными буквами в бланке "на РПГА", что это будет обозначать? Это исследование не назначается при обычной диагностике.

Анализ очень специфический. Делается, чтобы определить стадию сифилиса. В том случае, когда общепринятый анализ на RW - реакцию Вассермана - оказался положительным, или доктор сомневается, что его показатель достоверный. Врачу требуются значения РПГА, чтобы назначить адекватную терапию.

В чем сущность РПГА?

Для тех, кто хочет узнать подробнее о том, РПГА - что это, мы даем ответ. Это специфический трепонемный тест. Если говорить медицинским языком, не совсем понятным простым обывателям, - реакция пассивной гемагглютинации.

В ее основу легло то, что агглютинация эритроцитов, на поверхности которых нашел приют возбудитель сифилиса, называемый или спирохетой, происходит с образованием трепонемных антител.

Агглютинация - процесс, при котором из состава взятой на анализ крови под воздействием специальных реактивов выпадает осадок из каких-либо бактерий, вирусов и прочих инородных включений.

Чем больше оседает эритроцитов с внедрившейся в них трепонемой, тем выше стадия заражения.

Что такое сифилис?

Даже столкнувшись с таким заболеванием, как сифилис, не все могут понять, насколько оно серьезно и чем чревато.

Это венерическая болезнь. Заразиться можно:

• через слюну;
• через влагалищный секрет;
• через сперму;
• бытовым путем при наличии повреждений на поверхности кожи;
• ребенку может передаться сифилис через молоко больной матери.

На первой стадии заражения болезнью появляются шанкры - плотные образования или язвы, затем они исчезают.

Вторичная стадия характеризуется сыпью и увеличением лимфатических узлов.

Третья и четвертая стадии этой неприятной болезни могут выразиться в поражении головного мозга, сердечно-сосудистой системы, костных разрушениях и прочих патологических изменениях в организме.

Если у беременной женщины сифилис, то дети рождаются с острыми патологиями, которые касаются практически всех жизненно важных систем.

Если врач назначил сдать кровь на РПГА, что это такое, можно уточнить для общего развития, но отмахиваться от такого серьезного анализа нельзя! Сифилис требует обязательного лечения.

Те, кто имеют это заболевание, представляют серьезную опасность для окружающих.

Экспересс-диагностику заболевания - реакцию Вассермана или RW - обязательно делают всем, кто устраивается на работу или попадает на лечение в стационар.

Как прочитать результаты анализа?

Анализ сдан, и на руки выдали бланк с непонятными цифрами. Например, РПГА - 1/320. Что это может обозначать?

Цифры пишутся на бланке в том случае, если в организме обнаружена Если ее нет, то там будет написано слово "отрицательно". Значит, заболевание отсутствует, даже если реакция Вассермана была положительной.

РПГА показывает заболевание не ранее чем через 4 недели после внедрения трепонемы в организм, то есть после окончания инкубационного периода.

Цифры значения - это титры.

Анализ РПГА положительный еще будет долгие годы после того, как сифилис излечен.

Это интересно

Тема специфическая, но и сифилис - инфекция непростая. Страх заразиться им может отравить жизнь. Положительный РПГА и RW так выбивают из колеи, что некоторых особо нервных пациентов это заставляет задумываться о самоубийстве.

Не нужно сразу впадать в панику! Например, реакция Вассермана может показать наличие сифилиса во время беременности, при ангине и некоторых других заболеваниях. Именно для уточнения того, есть ли болезнь, и берут дополнительные анализы, один из которых - РПГА - анализ крови, который точно показывает, есть ли трепонема в организме, и какая стадия у заболевания.

Но и это исследование может оказаться неточным при некоторых воспалительных заболеваниях внутренних органов. Ложноположительный РПГА - что это может означать, кроме сифилиса? Например, острое воспаление селезенки.

Поэтому получив на руки первичные результаты, не нужно паниковать. Есть вероятность, что после повторной сдачи крови результат окажется отрицательным.

Если несколько специфических анализов крови на сифилис показывают положительный результат, только тогда заражение считается 100%.

Поэтому и проводят комплексное обследование. Оно состоит из:

• реакции Вассермана;
• РПГА;
• ИФА - иммуноферментного анализа;
• РИБТ, который выявляет сифилис при отсутствии внешней симптоматики на поздних стадиях.

К сожалению, сифилис - такая болезнь, которой можно заражаться несколько раз. Иммунитет после перенесенного заболевания не появляется.

Диагностика сифилиса – крайне важная задача для врачей-инфекционистов, поскольку для определения масштабов распространенности заболевания полное обследование пациентов не проводится. Это требует больших финансовых и временных затрат, к тому же клинические методы часто неинформативны. На сегодняшний день медицина располагает современными способами диагностики. На данный момент в лабораторной практике широко распространены так называемые экспресс-тесты, основанные на определении в крови сифилитических антител. К ним относятся РМП (реакция микропреципитации) и РПГА (реакция пассивной гемаглютинации).

Реакции на разных стадиях заболевания

Treponema pallidum - возбудитель сифилиса

Сифилис – длительно протекающее венерическое заболевание, характеризующееся стадийностью течения и способностью поражать абсолютно все органы и ткани человека. Возбудителем является микроорганизм Treponema pallidum – бледная трепонема.

Источник инфицирования – больной человек.

Исходя из путей заражения сифилисом (половой, контактно-бытовой, гемотрансфузионный, трансплантационный и трансплацентарный), экспресс-тесты могут быть назначены:

• после случайного полового контакта с необследованным партнером;
• если лечащему врачу становится известно о факте заражения кого-либо из членов семьи, полового партнера обследуемого человека;
• если пациенту недавно проводились переливания цельной крови или пересадка органов;
• в случае обнаружения возбудителя заболевания у родившей матери.

В соответствии с принципами действия, на которых основаны реакции пассивной гемагглютинации и микропреципитации, на каждой стадии течения сифилисаэ ффективным будет определенный тест.

Стадия	Описание	Изображение
Первичная	Основной диагностический критерий – наличие твердого шанкра. Он является своеобразным индикатором, позволяющим определить входные ворота инфекции. В случае, когда он возникает в области гениталий, следует судить о половом пути проникновения возбудителя в организм человека. Если твердый шанкр появляется на красной кайме губ – значит, был контакт между здоровым человеком и зараженным. Образование представляет собой безболезненный при пальпации воспалительный очаг (эрозия или язва), располагающийся на плотном основании. Твердые шанкры содержат большое количество бледных трепонем. 3-5 недель спустя в сыворотке крови возникают антитела – соединения плазмы крови белковой природы, препятствующие размножению микроорганизмов. Именно на определении в сыворотки крови специфических антител к сифилису построена большая часть экспресс-методов диагностики. Определение заболевания на первичной стадии развития проводится при помощи реакции микропреципитации	Твердый шанкр на языке, свидетельствующий о проникновении возбудителя через поцелуй - бытовой путь передачи
Вторичная	Характеризуется появлением «ожерелья Венеры», бледно-пятнистой сыпи, возникающей вследствие генерализованного поражения кожных покровов и слизистых оболочек. Возможна локальная потеря волос, вплоть до облысения. На данной стадии болезни пациенты нередко предъявляют жалобы на легкое недомогание, повышение температуры тела до 37,7 °C, появление слабости, насморка, кашля или конъюнктивита. Довольно часто «ожерелья Венеры» нет, а вторичный сифилис практически никак себя не проявляет, способствуя переходу в следующую, хроническую стадию. Серологические реакции также положительны. Для определения заболевания на данном этапе применяется как РМП, так и РПГА	"Ожерелье Венеры"
Третичная	Является самой тяжелой стадией, склонной к рецидивам с длительным течением на протяжении многих лет. Для данного периода характерно развитие гумм – сифилитических гранулем, склонных к некрозу и грубому рубцеванию. Гуммы способны образовываться в любых тканях и органах, в том числе внутренних. Трепонемы обнаруживаются не всегда – серологические реакции положительны примерно в 70% случаев. Наиболее однозначный ответ о наличии антител дает реакция прямой гемагглютинации

Анализ крови на сифилис - реакция Вассермана

РПГА

Реакция пассивной гемаглютинации - один из наиболее специфических и чувствительных серологических методов диагностики сифилиса.

Оценка результата РПГА

Основные характеристики и особенности проведения РПГА указаны в таблице.

Характеристика	Описание
Материал исследования	Образец венозной крови
Механизм действия	Реакция непрямой гемагглютинации развивается в случае, если эритроциты – красные кровяные клетки, на поверхности которых располагаются антигены бледной трепонемы, склеиваются при контакте сыворотки крови зараженного сифилисом человека
Эффективность	Исследованиями доказано, что по специфичности и чувствительности реакции к возбудителю заболевания данный метод является одним из самых точных серологических анализов
	При добавлении к исследуемому биологическому материалу сыворотки с антителами к трепонеме наблюдается агглютинация (склеивание) эритроцитов, выпадающих в осадок в виде зонтика. Также на количество агглютинированных эритроцитов влияет концентрация сывороточных антител. Положительная реакция РПГА свидетельствует о присутствии Treponema pallidum в крови обследуемого
Показания для проведения исследования	Лечащий врач назначает сдачу анализа крови на РПГА в следующих случаях: клинические проявления сифилиса (твердый шанкр, «ожерелье Венеры», гуммы и т. д.); отсутствие клинических проявлений, но возможное инфицирование вследствие контакта с больным человеком; подготовка к донорской сдаче крови; возникновение необходимости прохождения обследования для оформления или продления медицинских книжек; дообследование пациентов с положительной реакцией скринингового теста; госпитализация пациента в стационар и предоперационное обследование
Чувствительность	на стадии первичного сифилиса порядка 80%; вторичного и третичного – 90-98%
Специфичность	Высокая специфичность (98-100%) дает возможность назначать анализ для подтверждения сифилиса в случае положительной реакции микропреципитации или других аналогичных обследований
Ложные результаты	Частота ложноположительных результатов относительно невелика и по данным различных исследователей составляет порядка 0,05-2,5%. Возникновение ложноположительных результатов у лиц, не инфицированных сифилисом, связано со следующими факторами: наличие системных заболеваний соединительной ткани; аналогичные бледной трепонеме возбудители в сыворотке пациента; соматические заболевания (инфаркт миокарда, гепатиты различной этиологии и пр.); ВИЧ-инфекция; обширные травмы и переломы; беременность; инъекционный прием наркотических средств; онкопатологии и др.
Отрицательный результат	Может быть получен в случае, если: человек здоров; анализ проведен некорректно; анализ проведен в течение первых 2-4 недель, когда антитела не определяются

Если человек хотя бы раз был болен сифилисом, реакция РПГА будет оставаться положительной в течение всей его жизни.

Для того, чтобы избежать ложноположительных результатов, нужно придерживаться следующих рекомендаций при подготовке к сдаче анализа:

• забор материала проводится строго натощак;
• в день сдачи крови разрешается пить негазированную минеральную воду в минимальном объеме;
• перед проведением анализа на несколько часов следует отказаться от курения и полностью исключить прием алкогольных напитков;
• в случае, если пациент принимает лекарственные препараты, ему надо уведомить об этом своего лечащего врача.

При получении положительного результата показано немедленное обследование членов семьи и половых партнеров инфицированных лиц с целью предотвращения дальнейшего распространения инфекции.

РМП

Реакция микропреципитации (РМП) различной интенсивности

С помощью анализа под названием реакция микропреципитации (РМП) специалист определяет антитела, образующиеся на стадии первичного сифилиса. Титр антител к инфекции выявляется в крови больного уже на 7-10 день после возникновения твердого шанкра.

Характеристики и особенности проведения РМП указаны в таблице.

Критерий	Описание
Материал для обследования	Сыворотка крови, соскоб с поверхностей язв и эрозий, жидкость из лимфоузлов
Чувствительность	Колеблется в диапазоне 80-95%, зависит также от стадии заболевания
Расшифровка и положительный результат	К исследуемому образцу крови добавляют антиген - фосфолипид кардиолипин, получаемый из бычьего сердца. Сифилис-неспецифические антитела образуют реакцию с липидом. Положительный результат свидетельствует о наличии Treponema Pallidum или сходных возбудителей в исследуемом материале. Интенсивность проведенной реакции (от 1 до 4) указывает на степень заражения
Эффективность	Преимущество метода РМП в том, что он позволяет диагностировать сифилис на начальном этапе инфицирования
Показания для назначения исследования	Анализ сдают в следующих случаях: поступление больного в стационар; предоперационное обследование; анализ крови будущих доноров, беременных; подозрение на сифилис; контроль проведенной медикаментозной терапии; ребенок рожден от матери, инфицированной сифилисом
Ложноположительный результат	Возникновение ложноположительных результатов возможно в следующих случаях: сахарный диабет; ВИЧ-инфекция и СПИД; вирусные гепатиты; другие инфекционные заболевания; иногда беременность
Отрицательный результат	Свидетельствует об отсутствии заболевания, либо возможен в первые несколько дней, когда титра антител еще нет

Так же, как и в случае РПГА, для исключения ложноположительных результатов, перед тем как сдать анализ, необходимо:

• перед забором крови рекомендуется пить строго негазированную, несладкую воду;
• накануне сдачи анализа исключить употребление жирной, острой и жареной пищи;
• ни в коем случае не употреблять алкоголь;
• избегать повышенных физических и эмоциональных нагрузок;
• при наличии лекарственного средства, которое пациент вынужден принимать в связи с какой-либо терапией, следует предупредить врача, направившего на данное обследование.

Реакция микропреципитации – один из первых анализов, назначаемых для диагностики заболевания. Для получения более точных данных назначается аналогичное исследование, например, РПГА.

В любом случае расшифровка анализов оценивается в сочетании с результатами основного клинического обследования.

При первичном сифилисе исследуется на бледную трепонему отделяемое твердого шанкра или пунктат лимфатических узлов. При вторичном сифилисе материал берется с поверхности эрозированных папул на коже, слизистых, с трещин и др. Перед взятием материала с целью очищения от различных загрязнений поверхность очагов (эрозии, язвы, трещины) необходимо тщательно протереть стерильным ватно-марлевым тампоном, который смачивается изотоническим раствором хлорида натрия или назначить примочки с этим же раствором. Очищенную поверхность осушивают сухим тампоном и платиновой петлей или лопаточкой слегка раздражают периферические участки, одновременно слегка сдавливая пальцами в резиновой перчатке основание элемента до появления тканевой жидкости (серума), из которой готовят препарат для исследования. Получение тканевой жидкости имеет важное значение для диагностики сифилиса, так как бледные трепонемы находятся в просветах лимфатических капилляров, в тканевых щелях вокруг лимфатических и кровеносных сосудов.

Пункция регионарных лимфатических узлов

Кожу над лимфатическими узлами обрабатывают 96% спиртом и 3-5% спиртовым раствором йода. Затем 1 и 2 пальцами левой кисти фиксируют лимфатический узел. Правой рукой берут стерильный шприц с несколькими каплями изотонического раствора хлорида натрия, который вкалывается параллельно продольной оси лимфатического узла. Игла проталкивается в разных направлениях до противоположной стенки капсулы узла и содержимое шприца медленно вводится. Пальцами левой кисти лимфатический узел слегка массируется. При медленном извлечении иглы одновременно выдвигают поршень шприца, аспирируя содержимое лимфатического узла. Материал наносится на предметное стекло (при малом количестве материала добавляется капля изотонического раствора хлорида натрия), покрывается покровным стеклом. Исследование нативного препарата проводится в темном поле зрения при помощи светооптического микроскопа с темнопольным конденсором (объектив 40, 7х, 10х или 15х). Бледные трепонемы могут обнаруживаться также в окрашенных препаратах. При окраске по Романовскому-Гимзе бледные трепонемы окрашиваются в розовый цвет, по Фонтану и Морозову в коричневый (черный), по методу Бурри неокрашенные трепонемы выявляются на темном фоне.

Серологическая диагностика

Важное значение в диагностике сифилиса, оценке эффективности лечения, установлении критерия излеченности, выявления скрытых, резистентных форм придается стандартным (классическим) и специфическим серологическим реакциям. К стандартным или классическим серологическим реакциям (КСР) относятся:

• Реакция Вассермана (РВ),
• осадочные реакции Кана и Закса-Витебского (цитохолевая),
• реакция на стекле (экспресс-метод),

к специфическим:

• реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ),
• реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция Вассермана (РВ)

- разработана А.Вассерманом (A.Wasserman) совместно с А.Нейссером (A.Neisser) и Ц.Бруком (C.Bruck) в 1906 году. Реакции Вассермана основана на феномене связывания комплемента (реакция Борде-Жангу) и позволяет определять противолипидные антитела (реагины). Согласно современным представлениям, в реакции Вассермана определяются антитела к липидам макроорганизма, а не бледной трепонемы и реакция выявляет аутоиммунный процесс, который вызывается денатурированием бледными трепонемами тканей макроорганизма с образованием липопротеидного комплекса (конъюгата), в котором липиды (гаптены) являются детерминантой.

Обычно РВ ставится с двумя или тремя антигенами. Наиболее часто применяется отличающийся высокой чувствительностью кардиолипиновый антиген (экстракт из сердца быка, обогащенный холестерином и лецитином) и трепонемный антиген (обработанная ультразвуком взвесь анатогенных культуральных бледных трепонем). Совместно с реагинами сыворотки крови больного эти антигены образуют иммунный комплекс, способный адсорбировать и связывать комплемент. Для визуального определения образованного комплекса (реагины + антиген + комплемент) в качестве индикатора применяется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент связан в 1 фазе реакции (реагины + антиген + комплемент), гемолиз не наступает - эритроциты выпадают в легко заметный осадок (РВ положительная). Если в 1 фазе комплемент не связан вследствие отсутствия в испытуемой сыворотке реагинов, он будет использован гемолитической системой и произойдет гемолиз (РВ отрицательная). Степень выраженности гемолиза при постановке РВ оценивается плюсами: полное отсутствие гемолиза ++++ или 4+ (РВ резкоположительная); едва начавшийся гемолиз +++ или 3+ (РВ положительная); значительный гемолиз ++ или 2+ (РВ слабоположительная); непонятная картина гемолиза ± (РВ сомнительная); полный гемолиз - (реакция Вассермана отрицательная).

Помимо качественной оценки РВ имеется количественная постановка с различными разведениями сыворотки (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). Титр реагинов определяется максимальным разведением, еще дающим резко положительный (4+) результат. Количественная постановка РВ имеет значение в диагностике некоторых клинических форм сифилитической инфекции, а также при проведении контроля за эффективностью лечения. В настоящее время реакция Вассермана ставится с двумя антигенами (кардиолипиновый и трепонемный озвученный штамм Рейтера). Как правило, РВ становится положительной на 5-6 неделе после заражения у 25-60% больных, на 7-8 неделе - у 75-96%, на 9-19 неделе - у 100%, хотя в последние годы иногда раньше или позже. При этом, титр реагинов постепенно нарастает и достигает максимальной величины (1:160-1:320 и выше) в случае появления генерализованных высыпаний (сифилис вторичный свежий). При позитивации РВ выставляется диагноз первичного серопозитивного сифилиса.
При вторичном свежем и вторичном рецидивном сифилисе РВ положительная у 100% больных, но у истощенных больных с ослабленным иммунитетом может наблюдаться отрицательный результат. Впоследствии титр реагинов постепенно понижается и при вторичном рецидивном сифилисе обычно не превышает 1:80-1:120.
При третичном сифилисе РВ положительная у 65-70% больных и обычно наблюдается низкий титр реагинов (1:20-1:40). При поздних формах сифилиса (сифилис внутренних органов, нервной системы) положительная РВ наблюдается в 50-80% случаев. Титр реагинов колеблется от 1:5 до 1:320.
При скрытом сифилисе положительная РВ отмечается у 100% больных. Титр реагинов от 1:80 до 1:640, а при позднем скрытом сифилисе от 1:10 до 1:20. Быстрое снижение титра реагинов (вплоть до полной негативации) во время лечения свидетельствует об эффективности лечения.

Недостатки реакции Вассермана - недостаточная чувствительность (в начальной стадии первичного сифилиса отрицательная). Она негативная также у 1/3 больных, если они в прошлом лечились антибиотиками, у пациентов третичным активным сифилисом с поражениями кожи и слизистых, костно-суставного аппарата, внутренних органов, центральной нервной системы, при позднем врожденном сифилисе.
Недостаточная специфичность - реакция Вассермана может быть положительная у лиц, которые ранее не болели и не болеют сифилисом. В частности ложноположительные (неспецифические) результаты РВ отмечаются у больных, которые страдают системной красной волчанкой, лепрой, малярией, злокачественными новообразованиями, поражениями печени, обширными инфарктами миокарда и другими заболеваниями, а иногда у совершенно здоровых людей.
Кратковременная ложноположительная реакция Вассермана выявляется у некоторых женщин перед родами или после них, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, после наркоза, приема алкоголя. Как правило, ложноположительная РВ выражена слабо, чаще с низким титром реагинов (1:5-1:20), положительная (3+) или слабо положительная (2+). При массовых серологических обследованиях частота ложноположительных результатов составляет 0,1-0,15%. Для преодоления недостаточной чувствительности, пользуются постановкой на холоде (реакция Колляра) и одновременно она ставится с другими серологическими реакциями.

Осадочные реакции Кана и Закса-Витебского

Реакция Вассермана применяется в комплексе с двумя осадочными реакциями (Кана и Закса-Витебского ), при постановке которых готовятся более концентрированные антигены. Экспресс метод (микрореакция на стекле) - относится к липидным реакциям и основан на реакции преципитации. Ставится со специфическим кардиолипиновым антигеном, 1 каплю которого смешивают с 2-3 каплями исследуемой сыворотки крови в лунках специальной стеклянной пластины.
Преимущество - быстрота получения ответа (через 30-40 мин). Результаты оцениваются по количеству выпавшего осадка и величины хлопьев. Выраженность определяют как КСР - 4+, 3+, 2+ и отрицательная. Следует отметить, что ложноположительные результаты наблюдаются чаще, чем при РВ. Как правило, экспресс-метод применяется при массовых обследованиях на сифилис, при обследовании в клинико-диагностических лабораториях, соматических отделениях и больницах. На основании результатов экспресс-метода диагноз сифилиса выставлять запрещается, исключается его применение у беременных, доноров, а также для контроля после лечения.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) - предложена в 1949 году Р.Нельсоном (R.W.Nelson) и М.Мейером (M.Mayer). Является наиболее специфичным диагностическим тестом на сифилис. Однако сложность и дороговизна постановки ограничивает ее применение. В сыворотке крови больных производится определение видеоспецифичных антител (иммобилизинов), которые приводят к неподвижности бледных трепонем в присутствии комплемента. Антигеном являются живые патогенные бледные трепонемы, выделяемые от зараженных сифилисом кроликов. С помощью микроскопа проводится посчет утративших подвижность (иммобилизованных) бледных трепонем и оцениваются результаты РИБТ: иммобилизация бледных трепонем от 51 до 100% - положительная; от 31 до 50% - слабо положительная; от 21 до 30% - сомнительная; от 0 до 20% - отрицательная.
РИБТ имеет значение при дифференциальной диагностике для отграничения ложноположительных серологических реакций от реакций, обусловленных сифилисом. Поздно становится положительной чем РВ, РИФ и поэтому для диагностики заразных форм сифилиса ее не применяют , хотя во вторичном периоде сифилиса она положительная у 85-100% больных.
В третичном периоде сифилиса с поражением внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы РИБТ положительная в 98-100% случаев (РВ часто отрицательная ).
Необходимо помнить, что РИБТ может оказаться ложноположительной в случае наличия в исследуемой сыворотке трепонемоцидных препаратов (пенициллин, тетрациклин, макролиты и др.), которые вызывают неспецифическую иммобилизацию бледных трепонем. С этой целью кровь на РИБТ исследуется не ранее 2 недель после окончания приема антибиотиков и других лекарственных средств.
РИБТ как и РИФ в процессе лечения медленно негативируются, поэтому она не применяется в качестве контроля в процессе лечения.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) - разработана в 1954 году A.Coons и впервые применена для диагностики сифилитической инфекции Deacon, Falcone, Harris в 1957 году. РИФ основана на непрямом методе определения флюоресцирующих антител. Антигеном для постановки являются фиксированные на предметных стеклах тканевые патогенные бледные трепонемы, на которые наносят исследуемую сыворотку. Если в исследуемой сыворотке имеются противотрепонемные антитела, относящиеся к IgM и IgG, они прочно связываются с антигеном - трепонемами, что выявляется в люминесцентном микроскопе с помощью антивидовой ("противочеловеческой") флюоресцирующей сыворотки.
Результаты РИФ учитываются по интенсивности свечения бледных трепонем в препарате (желто-зеленое свечение). При отсутствии противотрепонемных антител в сыворотке, бледные трепонемы не определяются. При наличии антител выявляется свечение бледных трепонем, степень которого выражается в плюсах: 0 и 1+ - отрицательная реакция; от 2+ до 4+ - положительная.
РИФ относится к групповым трепонемным реакциям и ставится в разведении исследуемой сыворотки в 10 и 200 раз (РИФ-10 и РИФ-200). РИФ-10 считается более чувствительной, однако часто выпадают неспецифические положительные результаты, чем при постановке РИФ-200 (отличается более высокой специфичностью). Как правило, РИФ становится положительной раньше, чем РВ - положительная при первичном серонегативном сифилисе у 80% больных, у 100% во вторичном периоде сифилиса, всегда положительная при скрытом сифилисе и в 95-100% случаев при поздних формах и врожденном сифилисе.
Специфичность РИФ повышается после предварительной обработки исследуемой сыворотки сорбентом-ультраозвученным трепонемным антигеном, который связывает групповые антитела (РИФ - абс).
Показания к постановке РИБТ и РИФ - диагностика скрытого сифилиса для подтверждения специфичности комплекса липидных реакций в случае предположения сифилитической инфекции на основании положительной РВ. Положительные РИБТ и РИФ являются доказательством латентного сифилиса. При ложноположительной РВ при различных болезнях (системная красная волчанка, злокачественные новообразования и др.) и если повторные результаты РИБТ и РИФ отрицательные, это свидетельствует о неспецифическом характере РВ. Подозрение на поздние сифилитические поражения внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы при наличии у больных отрицательной РВ. Подозрение на первичный серонегативный сифилис, когда у пациентов при многократных исследованиях отделяемого с поверхности эрозии (язвы), при пунктате из увеличенных регионарных лимфатических узлов бледная трепонема не обнаруживается - в этом случае ставится только РИФ - 10.
При обследовании лиц с отрицательной РВ , которые имели длительные половые и бытовые контакты с больными сифилисом, учитывая вероятную возможность лечения их в недавнем прошлом противосифилитическими препаратами, вызвавшими негативацию РВ. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA - enzymelinked immunosorbent assay) - метод разработан E.Engvall и соавт., S.Avrames (1971). Сущность состоит в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя с антителом исследуемой сыворотки крови и выявлении специфического комплекса антиген-антитело при помощи меченной ферментом антивидовой иммунной сыворотки крови. Это позволяет оценивать результаты ИФА визуально по степени изменения окраски субстрата под действием фермента, входящего в состав конъюгата. Недостоверные результаты ИФА могут возникать в результате недостаточного разведения инградиентов, нарушения температурного и временного режимов, несоответствии рН растворов, загрязнении лабораторной посуды, неправильной технике промывки носителя.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Предложена в качестве диагностического теста на сифилис T.Rathlev (1965,1967), T.Tomizawa (1966). Макромодификация реакции называется ТРНА, микромодификация - МНА-ТР, автоматизированный вариант - AMNA-TR, реакция с макрокапсулами из полимочевины вместо эритроцитов - МСА-ТР. Чувствительность и специфичность РПГА аналогичны РИБТ, РИФ, но РПГА имеет меньшую чувствительность при ранних формах сифилиса по сравнению с РИФ-абс и большую при поздних, при врожденном сифилисе. РПГА ставится в качественном и количественном вариантах.

Техника взятия крови для серологических реакций

Для исследования на РВ, РИФ, РИБТ кровь берут из локтевой вены натощак или не раньше 4 час после приема пищи стерильным шприцом или одной иглой (самотеком). В месте взятия кожу предварительно обрабатывают 70% спиртом. Шприц и игла должны быть промыты изотоническим раствором хлорида натрия. В чистую сухую холодную пробирку вливают 5-7 мл исследуемой крови. На пробирку клеится чистая бумага с фамилией, инициалами пациента, номером истории болезни или амбулаторной карты, датой взятия крови. После взятия крови пробирка помещается в холодильник с температурным режимом +4°+8°С до следующего дня. На следующий день сыворотка сливается для исследования. В случае не использования крови на следующий день, сыворотку необходимо слить со сгустка и хранить в холодильнике не более 1 недели. Для исследования на РИБТ пробирка должна быть специально подготовлена и стерильна. В случае нарушения правил забора крови на исследование, несоблюдение условий может произойти искажение результатов.
Не рекомендуется производить забор крови для исследования после приема пищи, алкоголя, различных медикаментозных препаратов, после введения различных вакцин, во время менструального цикла у женщин.
Для исследования на экспресс-метод кровь берегся из кончика пальца, как это делается при ее взятии на СОЭ, но берут кровь на 1 капилляр больше. Экспресс-метод можно также ставить с сывороткой крови, полученной при помощи венопункции. Если возникает необходимость исследования крови в отдаленных лабораториях, вместо крови можно пересылать сухую сыворотку (метод сухой капли). Для этого на следующий день после взятия крови, сыворотку отделяют от сгустка и набирают в стерильный шприц в количестве 1 мл. Затем сыворотку выливают в виде 2 отдельных кружков на полоску плотной писчей бумаги (вощаная бумага или целлофан) размером 6x8 см. На свободном крае бумаги пишется фамилия, инициалы обследуемого и дата забора крови. Бумагу с сывороткой защищают от прямых солнечных лучей и оставляют при комнатной температуре до следующего дня. Сыворотка засыхает в виде небольших кружочков блестящей желтоватой стекловидной пленки. После этого, полоски бумаги с высушенной сывороткой свертывают как аптечный порошок и отсылают в лабораторию, указывая диагноз и с какой целью исследуется.

Серологическая резистентность

У части (2% и более) больных сифилисом, несмотря на проведенную полноценную противосифилитическую терапию, наблюдается замедление (отсутствие) негативации серологических реакций после окончания лечения до 12 мес и более. Возникает так называемая серологическая резистентность, которая в последние годы стала часто наблюдаться. Различают формы серологической резистентности:

• Истинная (абсолютная, безусловная) - необходимо провести дополнительное противосифилитическое лечение, комбинируя с неспецифической терапией для повышения иммунных сил организма.
• Относительная - после полноценного лечения бледные трепонемы образуют цист- или L-формы, которые находятся в организме в маловирулентном состоянии и вследствие этого дополнительное лечение не изменяет показатели серологических реакций, особенно РИФ и РИБТ.

В то же время в цист-формах происходят незначительные обменные процессы, а оболочки цист-форм являются чужеродным белком (антигеном). Для своей защиты организм вырабатывает специфические антнтела, которые положительны или резко положительны при постановке серологических реакций, отсутствии проявлений заболевания. При L-формах обменные процессы более снижены и антигенные свойства отсутствуют или незначительно выражены. Специфические антитела не вырабатываются или они в небольшом количестве, серологические реакции слабо положительные или отрицательные. Чем больший период времени от момента заражения, тем большее количество бледных трепонем трансформируется в формы выживания (цисты, споры, L-формы, зерна), при которых противосифилитическая терапия не эффективна.

Псевдорезистентность - после проведенного лечения несмотря на положительные серологические реакции бледная трепонема в организме отсутствует. Антигена в организме нет, но продолжается выработка антител, которые фиксируются при постановке серологических реакций.
Серологическая резистентность может развиваться вследствие:

• неполноценного лечения без учета давности и стадии заболевания;
• недостаточной дозы и в частности из-за неучета массы тела пациентов;
• нарушения интервала между введением препаратов;
• сохранения в организме бледных трепонем несмотря на проведенное полноценное специфическое лечение, из-за их стойкости к пенициллину и другим химиопрепаратам в случае наличия скрытых, осумкованных очагов поражения во внутренних органах, нервной системе, лимфатических узлах, которые малодоступны для антибактериальных препаратов (нередко бледные трепонемы обнаруживаются в тканях рубца через много лет после окончания терапии, в лимфатических узлах иногда удается обнаружить бледные трепонемы через 3-5 лет после противосифилитической терапии);
• снижения защитных сил при различных заболеваниях и интоксикациях (эндокринопатии, алкоголизм, наркомания и др.);
• общего истощения (приемом пищи бедной витаминами, белками, жирами).

Кроме этого, нередко выявляется ложная позитивация серологических реакций, не связанная с наличие у больных сифилиса и вызванная:

• сопутствующими неспецифическими заболеваниями внутренних органов, нарушениями сердечнососудистой системы, ревматизмом, дисфункциями эндокринной и нервной систем, тяжелыми хроническими дерматозами, злокачественными новообразованиями;
• поражениями нервной системы (тяжелые травмы, сотрясение головного мозга, психические травмы);
• беременностью; хроническими интоксикациями алкоголем, никотином наркотиками; инфекционными болезнями (малярия, туберкулез, вирусный гепатит, дизентерия, сыпной, брюшной и возвратный тифы).

Указанные факторы могут оказывать влияние на иммунологическую реактивность организма как в период активного развития сифилитических проявлений, так и во время их регресса.

Одним из наиболее важных анализов крови для организма является анализ на РПГА. С помощью него можно определить наличие в организме возбудителей такого заболевания как сифилис. Данный анализ признан одним из наиболее достоверных способов определения поражения организма сифилисом. Познакомимся с ним более подробно.

Под аббревиатурой РПГА подразумевается особая реакция, выявляющая в организме пассивную гемагглютинацию. С помощью такой реакции можно обнаружить процесс агглютинации . При чем в ходе данного процесса выявляется наличие на поверхностных слоях многих из них антигенов бледной трепонемы. Данный организм является возбудителем сифилиса.

Попадая в организм здорового человека, бледная трепонема провоцирует развитие иммунного ответа. В ходе этого в организме наблюдается выработка не специфического или нетрепонемного и специфического или трепонемного видов антител.

Наличие в сданном образце крови антител бледной трепонемы и является основательным подтверждением сифилиса в лабораторных условиях.

Все проводимые в лаборатории серологические исследования подразделяются на две группы:

1. Специфический тип исследования (трепонемный);
2. Неспецифический тип исследования (нетрепонемный).

Подразделение исследований на данные группы основывается на виде антител, которые обнаруживаются в на РПГА. Определение реакции пассивной гемагглютинации или РПГА, является специфическим типом проведения исследований в отношении возбудителя сифилиса.

Реакция протекает в присутствии антител антитрепонемной природы. Впервые данную реакцию начал практиковать с 1965 года один из ученых и сразу получил широкое признание среди коллег и пациентов. Сегодня с помощью данного метода с успехом диагностируют такое заболевание человеческого организма как сифилис. А сама методика его определения относится к категории специфических (трепонемных) тестов.

С помощью этого высокочувствительного способа диагностирования с легкостью определяется наличие в организме любой стадии сифилиса:

1. Первичной
2. Латентной
3. Вторичной
4. Третичной

Больше информации о сифилисе можно узнать из видео.

При сдаче крови на РПГА с точностью до мельчайших долей подтверждаются данные от реакций микропреципитации. РПГА позволяет выявить ложноположительные случаи развития заболевания, полученные в ходе проведения .

В некоторых случаях, метод РПГА может спровоцировать ложноположительный результат у больного.

Это бывает если у человека развиты аутоиммунные заболевания. При поражении организма человека определенной группой вирусных болезней, в ходе развития которых, у больного увеличивается число неспецифических антител, данные РПГА также могут быть ложными. Причиной этому является использование данным методом сенсибилизированных эритроцитов.

Когда необходима сдача крови на РПГА?

Анализ РПГА назначается больному в случае возникновения подозрений на развитие в его организме любых стадий сифилиса. Кроме этого данный анализ необходим перед отдельным категориям женщин. Именно на ранних сроках выявление данного заболевания позволит назначить соответствующее лечение и планировать беременность, с целью рождения здорового малыша.

Сдача крови на определение в организме сифилиса назначается и при подготовке пациента к назначенной операции. Именно в этом случае возможен удачный исход оперативного вмешательства в организм. Также подтверждение наличия в организме возбудителей сифилиса позволит врачам планировать ход предстоящей операции таким образом, чтобы ожидаемый лечебный эффект был максимальным.

Определение в крови агентов сифилиса методом РПГА важно и для проверки доноров перед сдачей ими крови.

Благодаря РПГА в данном случае удается предотвратить сотни случаев заражения реципиентов кровью больных сифилисом. В тоже время, известно много случаев, когда люди приходят в пункты сдачи крови в качестве доноров, а сдав ее на РПГА узнают, что больны сифилисом.

на определение в его организме возбудителей сифилиса, проходит некоторое количество времени и становятся известны его результаты. Обычно, РПГА дает положительный показатель по прошествии четырех недель, следующих за первичным инфицированием.

Во многих случаях, первичная стадия развития болезни характеризуется пониженными показателями, ее данные таковы: меньше 1:320. Вторичная стадия сифилиса сопровождается увеличением показаний от титрования: чуть больше 1:320. Скрытый сифилис дает вновь заниженные показатели титров.

Пройдя назначенный курс лечения установленной стадии сифилиса, анализ крови на РПГА у данного больного по-прежнему показывает положительный результат.

И это является не единичным случаем, а массовым и подтверждается на протяжении всей жизни у данной категории людей.

Подготовка и сама процедура анализа

Перед сдачей крови на наличие в ней возбудителей такого заболевания как сифилис, .

Ведь именно искажение данных такого важного анализа может стать причиной назначения больному неправильного лечения, а это, как известно, может стать причиной развития в организме других патологий.

Подготовку к проведению данного анализа довольно проста:

1. Для начала следует отказать от любого приема пищи перед сдачей крови на РПГА. Другими словами на анализ следует приходить натощак.
2. Употреблять значительное количество жидкостей перед сдачей крови на РПГА также не желательно. Компоненты принимаемых больным напитков также могут отразиться на результатах данного анализа.
3. Сдавать данный анализ лучше всего в первой половине дня, так как вам будет довольно сложно обходиться без пищи и воды в течение всех суток.
4. Перед проведением анализа на РПГА пациенту рекомендуют воздержать от курения в течение тридцати минут. Содержащиеся в табачном дыме вещества, способны искажать достоверность результатов данного анализа.

   Сама процедура взятия образца крови довольно простая, и практически безболезненна. После процедуры, специалист лаборатории обязательно назначает время, когда можно будет прийти за готовыми результатами.