Скорее всего, многим приходилось слышать про анализы под названием HLA-типирование. Этот анализ может быть назначен разными специалистами людям разного возраста. Например, такое исследование мог назначить врач ребенку с подозрением на целиакию, а такое подозрение может вызвать любой ребенок (а иногда и взрослый) с проблемами пищеварения. Людям, страдающим аутоиммунными заболеваниями, тоже могут назначить типирование. А еще среди знающих об этом исследовании оказываются супружеские пары, столкнувшиеся с какой-то репродуктивной проблемой.

То есть едва ли не каждый может получить рекомендацию сделать HLA-типирование. Потенциальная целевая аудитория для анализа огромна и исследование можно отнести к категории «модных». Но должно ли так быть? Нужен ли этот анализ всем, кого на него направляют? И что делать с результатом?

Немного теории

Главный комплекс гистосовместимости (MHC – major histocompatibility complex) человека назван HLA (human leucocyte antigens). Открыт этот комплекс антигенов был при изучении свойств лейкоцитов, именно этим объясняется происхождение термина HLA – антигены лейкоцитов человека. Открытие сделал Ж. Доссе в 1952 году, и уже очень скоро стало понятно, что HLA определяет не только иммунологические свойства лейкоцитов, но и других клеток.

Антигены HLA-комплекса представлены тремя классами, в основном исследованию подлежат первый (I класс: HLA-A, HLA-B, HLA-C) и второй (II класс: DR, DP, DQ). Класс III относится к некоторым компонентам системы комплемента – это разновидность неспецифической иммунной защиты организма, находится в основном в плазме крови, а не на поверхности клеток. Антигены HLA-комплекса – это белки со сложной структурой, состоящие из нескольких «альфа» и «бета» доменов (то есть, отдельных частей), а каждый домен кодируется своим вариантом гена (то есть, аллелем).

Для любого белка человека существует больше двух вариантов (аллелей) одного и того же гена. Это свойство называется полиморфизм, который, собственно, обеспечивает индивидуальность каждого из нас. И вот что интересно: ни одна другая генетическая система человека не обладает таким уровнем полиморфности, то есть, разнообразия аллелей, как HLA-система. Так, I класс антигенов кодируется тремя генами (HLA-A, HLA-B, HLA-C), для которых известно от 27 для гена С до 71 для гена В аллельных форм. Для антигенов класса II вариаций еще больше, поскольку больше самих генов (DRα, DRβ, DPα, DPβ, DQα, DQβ) и практически для каждого существуют десятки аллельных вариаций.

Вспомним, что каждый человек получает один аллель от мамы, а второй от папы, что еще больше увеличивает вариативность сочетания аллелей. При попытке подсчитать общее возможное число комбинаций последовательностей HLA-комплекса получается число более триллиона! И это если учитывать только известные на сегодня аллели, хотя продолжают описывать новые. То есть, практически невозможно повстречать людей, которые были бы идентичны по генам HLA-комплекса, за исключением генетически идентичных монозиготных близнецов.

Такое генетическое разнообразие главного комплекса гистосовместимости – плохая новость для трансплантологов и людей, нуждающихся в трансплантации органов. Антигены HLA-комплекса призваны оберегать от чужеродных белков. Безусловно, для успеха переноса органа от одного человека другому HLA-типирование жизненно необходимо. Установили, что более важны для этой процедуры антигены I класса, поскольку именно они находятся на поверхности практически всех клеток. Чем больше совпадений между аллелями донора и реципиента, тем выше вероятность успешной трансплантации.

Открытие HLA-комплекса дало сильный толчок для успешного развития трансплантологии. И, как это часто бывает после удачных открытий, дало соблазнительную надежду на то, что найден ключик если не к решению всех проблем со здоровьем человечества, то к многим из них. Ведь комплекс антигенов большой и отвечает за все иммунологические реакции, а иммунологические реакции задействованы практически во всем.

Начался расцвет иммунологии, гипотезы, теории и исследования продуцировались в огромном количестве. Казалось, что вся медицина должна быть сведена к иммунологии. Скажу сразу, после многолетних исследований большинство этих грандиозных идей не оправдались, и от них пришлось отказаться. Но это там, где медицина основана на доказательствах, а иммунологи занимаются очень узким спектром вопросов. Подавляющее большинство людей не нуждаются во внимании иммунологов и иммунологических исследованиях. Но на наших просторах все еще процветают грандиозные гипотезы и доказанные факты игнорируются.

HLA и бесплодие

Особенно популярно HLA-типирование в контексте «иммунологического бесплодия». Это и не удивительно, вопрос репродуктивной функции, реализации себя как родителя – очень важный и всегда глубоко эмоциональный. А значит, можно легко сыграть (и заработать) на этом. Есть данные, что от 10 до 36% беременностей прерываются спонтанно на ранних сроках у здоровых женщин в возрасте до 35 лет и после 42 соответственно. Если же беременность после ЭКО, то вероятность неудач еще выше. То есть, если прервалась одна или даже две подряд беременности, вне зависимости от их происхождения, – это не повод искать проблему. Тем более, это не повод говорить о «несовместимости» супругов.

Каково же происхождение этой теории? Исследования на экспериментальных животных в 60-х годах показали, что при спаривании сперматозоиды чаще соединяются с яйцеклеткой при выраженных различиях аллелей генов тканевой совместимости (HLA). В 70-х было обнаружено наличие антигенов HLA на поверхности сперматозоидов человека. Возникло предположение, что часть прервавшихся беременностей у человека связана с близкой гистосовместимостью супругов и были предложены терапевтические методы иммуномодуляции. Наиболее популярным подходом было переливание отмытых лимфоцитов мужа или донора до предполагаемой беременности или же, как вариант пассивной иммунизации, – внутривенное введение иммунноглобулинов (IVIG) в течение беременности.

На протяжении нескольких десятилетий европейские и американские врачи не просто следовали этим теориям, но обобщали свои результаты согласно правилам клинических исследований. Крупнейший мета-анализ 90-х годов (Ober C, et al. 1999) расставил все точки над i: это исследование включало 183 пациентки, было рандомизированным, проспективным, двойным слепым и многоцентровым (все условия достоверности!). Результат оказался потрясающим – в группе контроля, т.е. там где женщинам вводилось плацебо, эффективность “лечения” составила 48%, а в группе, получавших иммунотерапию - всего 36%. То есть, теория однозначно не подтвердилась.

На сегодня ведущие мировые рекомендации, основанные на доказательствах, гласят: «HLA - типирование, выявление цитотоксических антител против антигенов мужа и иммунотерапия не могут быть рекомендованы для обследования супружеских пар с невынашиванием беременности» .

Это и понятно, учитывая то количество аллельных форм HLA-комплекса, о котором нам известно теперь. Реальное количество прервавшихся беременностей по иммунологической причине очень и очень мало. И даже если такой случай и был (хотя достоверно доказать его просто не возможно), это не является правилом для каждой беременности у данной пары. Поскольку вариантов комбинаций аллелей чрезвычайно много! И у следующего ребенка такая комбинация может быть даже очень благоприятной.

Так что, грустно наблюдать, как процветают не оправдавшиеся теории. И особенно если учесть, на основании каких анализов делают грандиозные выводы про HLA-совпадения. Практически невозможно провести полное HLA-генотипирование супругов, поскольку объем исследования был бы колоссален. Результаты, которые выдают в лабораториях, является очень приблизительным и очень усеченным вариантом типирования. Оценка совпадений генотипов супругов по таким результатам равноценна гаданию на кофейной гуще. И ладно бы ограничится громкой теорией про причину невынашивания, но главная опасность лишних анализов – лишнее псевдотерапевтическое вмешательство.

К началу 2000-х были детально проанализированы все иммунологические теории невынашивания и разные методы их коррекции. Вот окончательный вывод, основанный на многочисленных статистически достоверных исследованиях:

«Ни иммунизация лейкоцитами мужа, ни внутривенное введение иммуноглобулинов не увеличивает частоту родов у женщин с необъяснимыми повторными выкидышами. Такое лечение является дорогостоящими и имеет потенциально опасные побочные эффекты. Недопустимо подвергать женщин дополнительному чувству утраты, связанному с ложными ожиданиями от неэффективного лечения. Кроме того, лабораторные тесты, которые направлены на выявление показаний к иммунотерапии не имеют прогностического значения для исходов беременности и не должны применяться» .

Давайте же прислушаемся к выводам, полученным тяжелым опытом других. Не будем наступать на те же грабли.

HLA и аллегрия

Еще одна ранняя гипотеза состояла в предположении, что любая иммунологическая реакция организма контролируется исключительно генетически. Но после многолетних исследований и успешного проекта по секвенированию генома человека приходится признать, что генетический контроль - лишь полдела.

Хотя следует учитывать связь между развитием аутоиммунных заболеваний и отдельными аллелями HLA-комплекса. Достоверно известно про ассоциацию целиакии с аллелями генов DQ2 и DQ8. А антиген В27 ассоциируется с такими заболеваниями как ювенильнй ревматоидный артрит, синдромом Рейтера и др. Научные исследования этого направления продолжаются, важно собрать как можно больше данных для статистической достоверности и, возможно, будут сделаны еще какие-то ценные открытия.

Но это научные цели. Что же до диагностической ценности таких исследований, следует понимать, что ассоциация HLA-аллеля указывает на определенную связь между ним и заболеванием, но это не тот случай, когда аллель прямо определяет данное заболевание.

Так, аллели DQ2 и DQ8, ассоциированные с целиакией, встречаются у 10% людей, а сама целиакия только 1,5% населения. Или, например, 90% людей, страдающих анкилозирующим спондилитом, имеют антиген В27, однако у 10% людей с этим заболеванием нет антигена В27, а у 5% имеющих данный антиген заболевание никогда не разовьется.

То есть, генетический анализ не способен дать окончательный ответ в случае диагностики аутоиммунных заболеваний. Да, такое исследование может быть одним из маленьких аргументов, который поможет врачу, но только вместе с множеством других анализов, не генетических.

Поэтому, если вас просят принят участие в проекте исследования, включающем в себя HLA-типирование, на которое вам надо потратить лишь свое время, но не деньги – соглашайтесь, внесите посильный вклад в науку. Если же вас направят на такой анализ за ваш счет, поинтересуйтесь у врача (может быть, даже не у одного) – а настолько ли важен результат для установления окончательного диагноза и для выбора тактики лечения.

Гистосовместимость - взаимозаменяемость однотипных тканей различных людей.

Главный комплекс гистосовместимости (англ. MHC) - система генетического сходства, которую разработали с целью улучшения принятия человеческим организмом пересаженных элементов. Данная система также действительна для позвоночных животных.

Поскольку за реакции отторжения отвечает иммунная система, то непосредственными элементами MHC являются ее клетки - лейкоциты. Для обозначения Главного комплекса гистосовместимости людей используется понятие Человеческий лейкоцитарный антиген. Для краткого обозначения этого понятия используется английская аббревиатура HLA, расшифровка которой идентична российскому переводу. HLA кодируется генами 6-й хромосомы.

Антиген - химическое соединение преимущественно белковой природы. Его функцией является образование антител и подобные реакции иммунной системы.

Анализ на гистосовместимость

HLA типирование - анализ, который врачи назначают паре, испытывающей затруднения с вынашиванием ребенка, когда причина такого явления неясна. Иммунологическая идентичность родителей ощутимо затрудняет рождение ребенка.

HLA типирование назначают также в случае бесплодия, родственной связи супругов, безрезультатных попыток ЭКО.

Степень гистосовместимости пары узнают с помощью анализов на антигены HLA I, II класса.

Выделенные лейкоциты исследуют, применяя метод цепной полимеразной реакции.

Цена HLA типирования 1 пары генов достигает 1-2 тыс. руб.

Значения HLA для вынашивания ребенка

Различные антигены матери и отца являются условием, необходимым для полноценного вынашивания ребенка. Благодаря их соединению у зародыша вырабатываются специализированные антигены, которые воспринимаются иммунными клетками матери как «чужие». Реакцией женского организма на такие клетки ребенка является включение особых механизмов, направленных на защиту плода. В частности, вырабатываются антитела к специализированным NK-клеткам-киллерам. В противном случае последние начинают подавлять развитие зародыша и беременность прерывается.

Если мужчина и женщина имеют одинаковые антигены, у ребенка сформируются антигены, идентичные материнским. Женский организм классифицирует такие клетки зародыша как свои, поэтому механизмы для защиты плода не запускаются. Иммунитет идентифицирует плод как нечто наподобие опухоли. Следственно, это нечто подлежит уничтожению путем приостановления процесса деления клеток. В повседневной жизни это позволяет предотвратить многие заболевания, но при беременности данный процесс приводит к некрозу тканей зародыша и провоцирует выкидыш.

Аллели

У каждого гена могут быть десятки вариантов. Сочетания этих вариантов (аллелей) составляют разнообразные комбинации генов. Поэтому более точным будет утверждение, что риск выкидыша определяет именно число аллелей. Если у супругов схожими оказываются 2-3 аллели HLA-генов, риск повторяющихся выкидышей составляет 35 %. При 4 и больше совпадающих аллелях невынашиваемость достигает почти 100 %. Попытки ЭКО в таких случаях будут безуспешными.

Некоторые варианты антигенов вызывают отклонения в процессе сперматогенеза, что приводит к ухудшению качества половых клеток и сказывается на развитии плода. В таком случае проведение HLA-типирования рекомендуют только отцу.

Помимо вынашиваемости плода, комплекс гистосовместимости влияет на процесс оплодотворения, имплантацию зародыша.

Классы генов

Среди антигенов HLA выделяют 2 класса. Первый образуют антигены областей 6 хромосомы A, B, C, второй —D, DP, DQ, DR. Антигены I класса присутствуют на всех клетках, а II— только на тех, которые являются участниками иммунологических реакций (B-лимфоцитов, активированных T-лимфоцитов, моноцитов, дендритных клеток, макрофагов). Если генотип пары образуют HLA-антигены II класса, это дает основание говорить об иммунных формах невынашивания беременности.

HLA-B27

HLA-B27 - антиген, выявление которого является наиболее частой причиной проведения типирования.

HLA-B27 представляет собой молекулу I класса гистосовместимости.

Ученые предполагают, что HLA-B27 способна провоцировать аутоиммунную реакцию с помощью микробных пептидов, вызывающих артрит. Таким образом, действие молекулы HLA-В27 может направляться против тканей содержащего ее организма. В Европе HLA-B27 имеют 8 % здорового населения. Антиген HLA-B27 очень часто вызывает воспаление определенных костных сочленений и суставов. Также данный антиген может провоцировать вторичные артриты (последствия мочеполовых, кишечных инфекций).

Кроме того, HLA-B27 влияет на возникновение таких патологий:

• болезни Бехтерева;
• синдрома Рейтера;
• артрита при псориазе;
• артрита, обусловленного патологиями кишечника.

Маловероятно, но не исключено, что синдром Рейтера и болезнь Бехтерева обнаружат и у пациента, не имеющего антигена HLA-B27. Если же анализы показали наличие HLA-B27, то в целях профилактики воспаления суставов следует старательно бороться с бактериальными возбудителями кишечных болезней, предупреждать половые инфекции.

Расшифровка анализов

К расшифровке результатов анализов следует привлечь врача-иммунолога. При исследовании имеют значение выявленные аллели, которые обозначаю цифрами. В таблицу записывают и буквенно-цифровые кодировки белков DR и DQ: это названия общих для всех генов DRB1, DQA1, DQB1, к которым как раз и добавляют цифровые шифры аллелей. Проводя HLA типирование по DRB1, результаты учитывают с точностью до 2, по двум оставшимся генам - до 4 цифр. Первые 2 цифры кодируют номер группы вариантов генов, последующие 2 - вариант гена этой группы. Варианты могут быть разделены дробью - это означает, что присутствует один из перечисленных вариантов, но точнее определить не удалось.

Во второй столбик заносят варианты кодируемых геном белков, обнаруженных на поверхности клеток. Иногда вариант белка записывают в скобочках - это означает, что данное название старое, впоследствии оно было скорректировано в ходе молекулярно-генетических исследований.

Лечение

Супругов со схожими HLA-антигенами направляют на лечение. В одних случаях женщине назначают иммунизацию, для осуществления которой используют концентрированную культуру лимфоцитов партнера. Это приводит к многократному возрастанию антигенной нагрузки. В других случаях проводят лечение препаратами иммуноглобулинов человека. При этом достигаются иммуномодулирующий, иммуностимулирующий эффекты.

Если генетическая несовместимость подтвердится, не стоит терять надежду. Такой паре следует обратиться к хорошему специалисту, который бы занимался ведением беременности от зачатия до родов. Важно выполнять все указания врача.

Очень часто вследствие проведенного лечения у пары рождается долгожданный здоровый малыш. Современная медицина располагает необходимыми препаратами, методиками, которые позволяют преодолеть проблему. Дети у таких супругов рождаются полноценными. Единственным последствием генетической несовместимости может быть ослабление иммунной системы, о чем врачи предупреждают будущих родителей.

Роль системы тканевой совместимости человека

Система биологической (тканевой) совместимости человека (HLA) II класса выполняет в организме ряд важных защитных функций:

Иммунный ответ на внедрение инфекции;
-удаление из организма опухолевых клеток;
-развитие приобретенного иммунитета.

Термин «HLA» (Human Leukocyte Antigen) используется в связи с тем, что все антигены (белки) этой системы расположены на поверхности лейкоцитов. За работу HLA отвечают три гена, локализованные на коротком плече 6-й хромосомы: DRB1, DQA1, DQB1. Каждый ген представлен двумя вариантами (аллелями), унаследованными от родителей: один – от папы, другой – от мамы. В генах закодированы определенные признаки. Если аллели разные (гетерозигота), то проявляется «сильный» (доминантный) признак, если одинаковые (гомозигота) - «слабый» (рецессивный). Имеется чрезвычайное разнообразие (около 3000) аллелей генов HLA.

Предрасположенность к аутоиммунным заболеваниям

Как мы уже сказали, система гистосовместимости HLA отвечает за иммунный ответ. Обратной стороной ее работы могут стать аутоиммунные процессы – синтез защитных антител на собственные клетки и их разрушение.

В настоящее время установлена причастность определенных вариантов HLA-генов класса II к развитию таких аутоиммунных заболеваний, как сахарный диабет (СД) 1 типа, ревматоидный артрит, болезнь Крона, язвенный колит, системная красная волчанка, аутоиммунный гепатит, атопический дерматит, аутоиммунный тиреоидит и пр.

Одними из первых проявлений аутоиммунных расстройств могут стать бесплодие и невынашивание беременности из-за поражения собственными антителами различных антигенов репродуктивной и эндокринной систем: яйцеклеток, сперматозоидов, половых гормонов и пр.

Биологическая совместимость и имплантация зародыша

Система гистосовместимости, даже при отсутствии аутоиммунных заболеваний, влияет на зачатие, имплантацию (внедрение эмбриона) и течение беременности. Зародыш, образующийся после слияния мужской и женской половых клеток, имеет на своей поверхности специальные белки – антигены. Для нормальной имплантации очень важна их «чужеродность». Появление «белков-незнакомцев» эмбриона запускает в организме матери особые иммунные реакции, направленные на сохранение беременности: блокируются специальные NK-клетки-киллеры (убийцы), которые могут спровоцировать выкидыш.

Необходимая «чужеродность» антигенов может возникнуть у эмбриона лишь в том случае, если HLA-гены матери и отца отличаются друг от друга. Совпадение некоторых аллелей HLA-генов (полное совпадение бывает у близких родственников) ведет к появлению HLA-гомозиготного плода, что является неблагоприятным фактором для нормального течения беременности.

HLA-гены и невынашивание беременности

В последнее время установлено: чем больше у супружеской пары совпадений по аллелям HLA-генов, тем выше вероятность прерывания беременности. Треть супружеских пар с привычным невынашиванием имеют 2-3 совпадения. При наличии 4-х и более идентичных аллелей повторные выкидыши и неудачные попытки ЭКО случаются у большинства пар.

Большое число совпадающих антигенов HLA II класса приводит к отсутствию достаточного иммунного ответа у матери. Эмбрион не распознается как плод, а воспринимается как скопление собственных измененных клеток, против которых иммунная система начинает работать на уничтожение.

Это вызывает некроз в плодовых оболочках и раннее прерывание беременности. Таким образом, несовпадение супругов по HLA-антигенам и отличие антигенов зародыша от материнских HLA-белков являются необходимыми для сохранения беременности факторами.

Важное значение для вынашивания имеет не только число совпадений, но и набор аллей у каждого из супругов. Так, в парах с тремя и более выкидышами выявлено увеличение числа некоторых аллелей: у женщин – DQB1 0301, 0501, 0602; у мужчин – DRB1 10, 12; DQA1 0102, DQA1 0301, 0102; DQB1 0501, 0602. Также при повторных выкидышах снижается частота встречаемости аллелей DRB1 03 и DQB1 0303 как у женщин, так и у мужчин, что говорит об их защитном эффекте на течение беременности.

Кроме того, установлено, что определенные аллели могут нарушать процесс сперматогенеза у мужчин и влиять на качество половых клеток, что впоследствии сказывается на полноценности эмбриона.

Обследование на HLA-совместимость

Исследование HLA-совместимости не входит в алгоритм первичного обследования бесплодных пар. Его рекомендуют проводить лишь у супругов с привычным невынашиванием беременности, а также после 2-х и более неудачных попыток ЭКО.

Биологическая несовместимость партнеров по генам HLA класса II может быть констатирована, если у обследуемых выявлено большое число совпадений (четыре и более – из шести возможных) по генам DRB1, DQA1, DQB1.

При подозрении на гистонесовместимость партнеров, помимо генотипирования, выполняются следующие иммунологические методы обследования будущей мамы:

Анализ состава лимфоцитов в крови;
-оценка интерферонового статуса;
-определение блокирующих свойств женской сыворотки (БФ);
-концентрация антиотцовских антилейкоцитарных антител (АОАТ);
-уровень аутоантител (антифосфолипидных антител, волчаночного антикоагулянта);
-содержание антител к хорионическому гонадотропину;
-определение чувствительности к иммуномодуляторам.

У женщин с бесплодием и привычным невынашиванием может быть повышен уровень NK-клеток (киллеров), сывороточного интерферона, а также снижены: интерфероновая реакции лейкоцитов и содержание БФ и АОАТ.

Однако стоит заметить, что процессы иммунной регуляции репродуктивного здоровья являются сложными и недостаточно изученными, а роль HLA-антигенов до сих пор признается не всеми специалистами.

Кроме того, помимо системы HLA, имеются и другие факторы, влияющие на течение беременности: тромбофилии, нарушение фолатного обмена, гипергомоцистеинемия, хромосомные аномалий плода и пр. Анализы на их выявление также необходимо включать в алгоритм обследования при невынашивании беременности.

«Прививка» лимфоцитами мужа

На сегодняшний день данные мировой литературы весьма противоречивы по вопросу возможной коррекции иммунных нарушений репродуктивного здоровья. Тем не менее, в настоящее время при выявлении иммунологической несовместимости партнеров по генам HLA у супругов с привычным невынашиванием беременности и неудачными попытками ЭКО в качестве основного метода терапии используется активная иммунизация женщины («прививка») лимфоцитами мужа – лимфоцитоиммунотерапия (ЛИТ).

Механизм ее действия состоит в активации иммунного ответа у матери, направленного на поддержание имплантации эмбриона, в ответ на подкожное введение лейкоцитов отца будущего ребенка.

Противопоказаниями для проведения ЛИТ являются: гепатиты В и С, перенесенные партнером; вирусные заболевания в остром периоде. В этих случаях при необходимости используют лимфоциты обследованного донора.

Для нормализации показателей интерферонового статуса на первом этапе назначают индукторы интерферона (галавит, иммуномакс, имунофан) в зависимости от выявленной чувствительности к препарату.

Затем выполняется ЛИТ. Для этого женщине внутрикожно вводят предварительно полученные лейкоциты мужа в дозе 50-100 млн с последующим (через 3 недели) контролем показателей функционального состояния иммунной системы. В дальнейшем возможно увеличение дозы лимфоцитов (100 или 150 млн. клеток) в зависимости от количества совпадений по HLA антигенам и показателей иммунного статуса.

Процедуру проводят на 5-9 день менструального цикла 1 раз в месяц за 2-3 месяца до планируемого зачатия или программы ЭКО под контролем функционального состояния иммунной системы (анализа состава лимфоцитов крови, показателей БФ и АОАТ).

После ЛИТ у женщины повышаются значения БФ и АОАТ в 1,5 и 3 раза, соответственно. Как результат, у супружеских пар с совпадениями по HLA увеличивается частота наступления беременности в 2 раза. Наиболее выраженный эффект данной терапии наблюдается у супругов, имеющих 4 и более совпадений по системе HLA: они беременеют в 3-4 раза чаще, чем «непривитые» пары. После зачатия ЛИТ продолжают весь первый триместр, начиная с 4-5 недели, далее каждые 3-4 недели под контролем уровня БФ.

«Прививка» лимфоцитами мужа позволяет женщинам с иммунологическим невынашиванием зачать и выносить здорового малыша!

Всегда с вами,

HLA-типирование супругов

HLA-типирование супругов

HLA типирование супругов – один из методов определения причин бесплодия, который основан на изучении иммунологических особенностей организмов мужчины и женщины. Суть методики заключается в определении «совместимости» партнеров.

Особенности HLA-совместимости

HLA антигены – это особые маркеры, которые присутствуют абсолютно во всех клетках живого организма. Они представлены уникальным набором различных последовательностей белковых молекул, которые у разных людей отличаются.

Данные структуры существуют в организме для идентификации «своих» и «чужих» клеток. В норме при проникновении чужеродных микроорганизмов (вирусы, бактерии) или пересадке донорских органов тут же запускаются иммунные реакции, которые проявляются уничтожением соответствующих клеток.

Если в случае с вирусами и патогенными микробами – это хорошо, то при трансплантации пациенты должны употреблять иммунодепрессанты для нормального функционирования нового органа или части тела. По такой же схеме работает противораковая защита организма. Мутирующие клетки тут же распознаются и уничтожаются.

В случае беременности (нормальном её протекании) плод является наполовину «чужим» для материнского организма, поскольку 50% генетического материала он получил от отца. Ребёнок не отторгается из-за механизма синтезирования блокирующих антител, которые предотвращают его гибель. Однако при слишком сильной схожести наборов антигенов у супругов, данный процесс нарушается.

Если анализ HLA типирование фиксирует наличие слишком частых сходств в соответствующих последовательностях мужчины и женщины, это может быть главным фактором невозможности выносить плод. Причина в том, что материнский организм вырабатывает недостаточное количество блокирующих антител. Соответственно ребёнок рассматривается им не в роли «защищенного чужака», а в виде измененных собственных тканей, которые нужно уничтожить.

Как проводится анализ HLA?

HLA совместимость изучается в ряде ситуаций. Показаниями для проведения исследования являются:

• Бесплодие неясного генеза.
• Привычное невынашивание беременности.

Некоторые врачи в подобных ситуациях предлагают своим пациентам пройти HLA типирование. Расшифровка конечных результатов позволит выявить «совместимость» супругов. Тем не менее, данный метод является не единственным способом установления причины патологии. Кроме того, он имеет ряд серьезных недостатков.

Сам процесс исследования полиморфизма HLA-антигенов может проводиться двумя способами:

1. Классический (серологический). В данном случае на основе микролимфоцитотоксического теста проводится анализ наличия специфических антител, позволяющих установить сходство или различие в соответствующих наборах белковых молекул супругов.
2. Молекулярно-генетический. В данном случае используется полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет более точно оценить наличие уже конкретных генов, кодирующих появление HLA-антигенов.

Лучшим и более востребованным остается именно молекулярно-генетическое HLA типирование. Результаты такого исследования более точны. Ложноположительные и ложноотрицательные результаты встречаются значительно реже.

HLA и ЭКО

При наличии ранее неудачных попыток ЭКО или привычном невынашивании, врачи иногда рекомендуют сдать HLA анализ на совместимость супругов. Это позволит установить присутствие конкретной проблемы и выбрать правильную методику подготовки к соответствующей процедуре. В основном принимается решение о начале иммуномодулирующей терапии, которая позволяет избежать отторжения плода организмом матери.

Анализ на HLA типирование сдать можно в ряде репродуктивных клиник, которые занимаются преодолением бесплодия. На основе изучения 5-9 генов проводится анализ совместимости соответствующих комплексов у супругов. Такие центры предлагают своим пациентам пройти HLA типирование. Расшифровка результатов чаще всего занимает всего несколько дней.

Минусы исследования

HLA типирование супругов, цена которого иногда может быть достаточно высокой (в зависимости от конкретной клиники), имеет несколько очень важных свойств, делающих его не слишком информативным исследованием. Главными из них являются:

• Изучение только 5-9 генов в процессе типирования. Если учесть, что за формирование комплекса HLA отвечает более 100 генов, очевидно, что такая диагностика не является достоверной.
• Стоимость такой услуги как HLA типирование. Цена на каждый отдельный набор генов отличается. Для полного обследования иногда нужно заплатить около 20 тысяч рублей.
• Относительно небольшое число клиник, где можно пройти HLA типирование. Москва и другие крупные города предлагают соответствующую услугу своим пациентам, но в большинстве городов она остается недоступной.

Врачи «ВитроКлиник» считают нецелесообразным прохождение теста на HLA типирование. Стоимость его значительно выше реальной информативности. В большинстве случаев все равно приходится назначать дополнительные методы обследования супругов, так как HLA типирование не позволяет однозначно определить причину бесплодия.

Многочисленные неудачи при попытках зачать ребенка могут обуславливаться иммунными нарушениями у супругов. Одно из самых распространенных таких нарушений – идентичность HLA-антигенов женщины и мужчины. Поэтому парам, которым длительное время не удается зачать ребенка, рекомендуют проверить HLA-совместимость. Анализ крови HLA на совместимость супругов позволяет определить степень «несовместимости». HLA-типирование дает возможность уточнить причины бесплодия и определить дальнейшую тактику лечения пары.

Анализ HLA типирование

На поверхности всех клеток организма имеются особые рецепторы – белковые антигены главного комплекса гистосовместимости. Уникальность структуры этих рецепторов у каждого человека обеспечивает надежность работы иммунной системы, функционирующей по принципу «свой-чужой». На поверхности лейкоцитов находится больше всего HLA-антигенов. При изменении структуры рецепторов (обнаружения чужеродного тела или опухолевого перерождения клетки) антиген связывается иммунными клетками и посредством НLА – комплекса инициируется запуск иммунного ответа.

Плод получает от каждого из родителей по одному гену, наследуя, таким образом, от них по 50% генетической информации. То, что для организма матери ребенок – чужеродное тело, запускает определенные иммунологические реакции, которые способствуют сохранению беременности. Различия белковых структур антигенов НLА плода и матери – важный фактор для полноценного развития беременности. Организм матери в норме с самых ранних сроков вырабатывает к антигенам ребенка антитела. Когда антигены НLА родителей похожи, что случается при близкородственном браке, в следствии каких-либо эндокринных или иммунологических нарушений у матери, нарушается антигенная стимуляция, и течение беременности осложняется тяжелыми гестозами или может самопроизвольно прерваться. Каждый третий случай бесплодия и привычного невынашивания беременности обусловлен генетическими особенностями пары.

Чтобы определить степень схожести антигенов НLА паре проводят анализ HLA-типирования. Для анализа делают забор венозной крови, из которой выделяют лейкоциты, затем, используя метод полимеразной цепной реакции, проводят HLA-типирование.

Когда необходимо сдавать анализ на совместимость

Желательно, чтобы будущие родители ещё до предполагаемого зачатия прошли клиническое обследование. Назначение необходимых анализов и выдача направления на обследование производится терапевтом и гинекологом. Когда все анализы отличные, а беременность не наступает, то причина может быть не в состоянии здоровья партнеров по отдельности, а скрываться в иммунологической совместимости пары.

Схожесть партнеров по показателям тканевой совместимости служит причиной недостаточной активности иммунной системы женщины, в результате в организме не запускаются реакции, которые необходимы для зачатия и сохранения беременности.

Нередко организм женщины воспринимает сперматозоиды мужчины, как вредоносные агенты, и начинает интенсивную выработку белков-антител, которые их обезвреживают, подавляя способность к оплодотворению. Невозможность встречи сперматозоидов с яйцеклеткой делает и наступление беременности невозможным.

Таким образом, случаи, когда необходимо сдавать анализ на совместимость, нередки. Для исключения возможности возникновения подобных проблем у пары, обоим нужно сдать анализ крови на совместимость, HLA-типирование.

Иммунизация

Когда после консультации с врачом, парой принимается решение продолжать попытки зачатия общего ребенка, то может быть рекомендовано проведение процедуры активной или пассивной иммунизации.

Активная иммунизация матери проводится концентрированной культурой лимфоцитов партера или донора, и позволяет преодолеть проблему сходства партнеров по HLA-антигенам. Процедура должна «научить» женский организм распознавать клетки партнера. Обычно процедуру проводят в три этапа при помощи препарата, который изготавливают из крови партнера или донора. На сегодняшний день мнения специалистов генетиков и иммунологов о эффективности иммунотерапии лимфоцитами разделались пополам. Одной стороной этот метод считается средством спасения, а другой вовсе отрицается её всяческий смысл.

Некоторые данные свидетельствуют о 60% случаев эффективности тщательно подобранного и вовремя назначенного метода активной иммунизации. Процедуру иммунизации лимфоцитами, к сожалению, сейчас можно пройти только в некоторых крупных городах.

Пассивная иммунизация является более доступной, для нее нет необходимости в длительном периоде подготовки, но данные об её эффективности противоречивы. Этот метод состоит в иммунизации матери при помощи препаратов иммуноглобулинов. Препарат назначается исключительно врачом, как правило, внутривенно, в три этапа.

Важность этих анализов состоит в том, что они предоставляют паре возможность осознанного выбора при оценке всех рисков в пользу продолжения попыток зачатия или в пользу услуг банка яйцеклеток и спермы. Поэтому перед принятием такого серьезного решения, необходимо владеть соответствующей информацией и заручиться мнением нескольких специалистов иммунологов и генетиков.