Скорее всего, многим приходилось слышать про анализы под названием HLA-типирование. Этот анализ может быть назначен разными специалистами людям разного возраста. Например, такое исследование мог назначить врач ребенку с подозрением на целиакию, а такое подозрение может вызвать любой ребенок (а иногда и взрослый) с проблемами пищеварения. Людям, страдающим аутоиммунными заболеваниями, тоже могут назначить типирование. А еще среди знающих об этом исследовании оказываются супружеские пары, столкнувшиеся с какой-то репродуктивной проблемой.

То есть едва ли не каждый может получить рекомендацию сделать HLA-типирование. Потенциальная целевая аудитория для анализа огромна и исследование можно отнести к категории «модных». Но должно ли так быть? Нужен ли этот анализ всем, кого на него направляют? И что делать с результатом?

Немного теории

Главный комплекс гистосовместимости (MHC – major histocompatibility complex) человека назван HLA (human leucocyte antigens). Открыт этот комплекс антигенов был при изучении свойств лейкоцитов, именно этим объясняется происхождение термина HLA – антигены лейкоцитов человека. Открытие сделал Ж. Доссе в 1952 году, и уже очень скоро стало понятно, что HLA определяет не только иммунологические свойства лейкоцитов, но и других клеток.

Антигены HLA-комплекса представлены тремя классами, в основном исследованию подлежат первый (I класс: HLA-A, HLA-B, HLA-C) и второй (II класс: DR, DP, DQ). Класс III относится к некоторым компонентам системы комплемента – это разновидность неспецифической иммунной защиты организма, находится в основном в плазме крови, а не на поверхности клеток. Антигены HLA-комплекса – это белки со сложной структурой, состоящие из нескольких «альфа» и «бета» доменов (то есть, отдельных частей), а каждый домен кодируется своим вариантом гена (то есть, аллелем).

Для любого белка человека существует больше двух вариантов (аллелей) одного и того же гена. Это свойство называется полиморфизм, который, собственно, обеспечивает индивидуальность каждого из нас. И вот что интересно: ни одна другая генетическая система человека не обладает таким уровнем полиморфности, то есть, разнообразия аллелей, как HLA-система. Так, I класс антигенов кодируется тремя генами (HLA-A, HLA-B, HLA-C), для которых известно от 27 для гена С до 71 для гена В аллельных форм. Для антигенов класса II вариаций еще больше, поскольку больше самих генов (DRα, DRβ, DPα, DPβ, DQα, DQβ) и практически для каждого существуют десятки аллельных вариаций.

Вспомним, что каждый человек получает один аллель от мамы, а второй от папы, что еще больше увеличивает вариативность сочетания аллелей. При попытке подсчитать общее возможное число комбинаций последовательностей HLA-комплекса получается число более триллиона! И это если учитывать только известные на сегодня аллели, хотя продолжают описывать новые. То есть, практически невозможно повстречать людей, которые были бы идентичны по генам HLA-комплекса, за исключением генетически идентичных монозиготных близнецов.

Такое генетическое разнообразие главного комплекса гистосовместимости – плохая новость для трансплантологов и людей, нуждающихся в трансплантации органов. Антигены HLA-комплекса призваны оберегать от чужеродных белков. Безусловно, для успеха переноса органа от одного человека другому HLA-типирование жизненно необходимо. Установили, что более важны для этой процедуры антигены I класса, поскольку именно они находятся на поверхности практически всех клеток. Чем больше совпадений между аллелями донора и реципиента, тем выше вероятность успешной трансплантации.

Открытие HLA-комплекса дало сильный толчок для успешного развития трансплантологии. И, как это часто бывает после удачных открытий, дало соблазнительную надежду на то, что найден ключик если не к решению всех проблем со здоровьем человечества, то к многим из них. Ведь комплекс антигенов большой и отвечает за все иммунологические реакции, а иммунологические реакции задействованы практически во всем.

Начался расцвет иммунологии, гипотезы, теории и исследования продуцировались в огромном количестве. Казалось, что вся медицина должна быть сведена к иммунологии. Скажу сразу, после многолетних исследований большинство этих грандиозных идей не оправдались, и от них пришлось отказаться. Но это там, где медицина основана на доказательствах, а иммунологи занимаются очень узким спектром вопросов. Подавляющее большинство людей не нуждаются во внимании иммунологов и иммунологических исследованиях. Но на наших просторах все еще процветают грандиозные гипотезы и доказанные факты игнорируются.

HLA и бесплодие

Особенно популярно HLA-типирование в контексте «иммунологического бесплодия». Это и не удивительно, вопрос репродуктивной функции, реализации себя как родителя – очень важный и всегда глубоко эмоциональный. А значит, можно легко сыграть (и заработать) на этом. Есть данные, что от 10 до 36% беременностей прерываются спонтанно на ранних сроках у здоровых женщин в возрасте до 35 лет и после 42 соответственно. Если же беременность после ЭКО, то вероятность неудач еще выше. То есть, если прервалась одна или даже две подряд беременности, вне зависимости от их происхождения, – это не повод искать проблему. Тем более, это не повод говорить о «несовместимости» супругов.

Каково же происхождение этой теории? Исследования на экспериментальных животных в 60-х годах показали, что при спаривании сперматозоиды чаще соединяются с яйцеклеткой при выраженных различиях аллелей генов тканевой совместимости (HLA). В 70-х было обнаружено наличие антигенов HLA на поверхности сперматозоидов человека. Возникло предположение, что часть прервавшихся беременностей у человека связана с близкой гистосовместимостью супругов и были предложены терапевтические методы иммуномодуляции. Наиболее популярным подходом было переливание отмытых лимфоцитов мужа или донора до предполагаемой беременности или же, как вариант пассивной иммунизации, – внутривенное введение иммунноглобулинов (IVIG) в течение беременности.

На протяжении нескольких десятилетий европейские и американские врачи не просто следовали этим теориям, но обобщали свои результаты согласно правилам клинических исследований. Крупнейший мета-анализ 90-х годов (Ober C, et al. 1999) расставил все точки над i: это исследование включало 183 пациентки, было рандомизированным, проспективным, двойным слепым и многоцентровым (все условия достоверности!). Результат оказался потрясающим – в группе контроля, т.е. там где женщинам вводилось плацебо, эффективность “лечения” составила 48%, а в группе, получавших иммунотерапию - всего 36%. То есть, теория однозначно не подтвердилась.

На сегодня ведущие мировые рекомендации, основанные на доказательствах, гласят: «HLA - типирование, выявление цитотоксических антител против антигенов мужа и иммунотерапия не могут быть рекомендованы для обследования супружеских пар с невынашиванием беременности» .

Это и понятно, учитывая то количество аллельных форм HLA-комплекса, о котором нам известно теперь. Реальное количество прервавшихся беременностей по иммунологической причине очень и очень мало. И даже если такой случай и был (хотя достоверно доказать его просто не возможно), это не является правилом для каждой беременности у данной пары. Поскольку вариантов комбинаций аллелей чрезвычайно много! И у следующего ребенка такая комбинация может быть даже очень благоприятной.

Так что, грустно наблюдать, как процветают не оправдавшиеся теории. И особенно если учесть, на основании каких анализов делают грандиозные выводы про HLA-совпадения. Практически невозможно провести полное HLA-генотипирование супругов, поскольку объем исследования был бы колоссален. Результаты, которые выдают в лабораториях, является очень приблизительным и очень усеченным вариантом типирования. Оценка совпадений генотипов супругов по таким результатам равноценна гаданию на кофейной гуще. И ладно бы ограничится громкой теорией про причину невынашивания, но главная опасность лишних анализов – лишнее псевдотерапевтическое вмешательство.

К началу 2000-х были детально проанализированы все иммунологические теории невынашивания и разные методы их коррекции. Вот окончательный вывод, основанный на многочисленных статистически достоверных исследованиях:

«Ни иммунизация лейкоцитами мужа, ни внутривенное введение иммуноглобулинов не увеличивает частоту родов у женщин с необъяснимыми повторными выкидышами. Такое лечение является дорогостоящими и имеет потенциально опасные побочные эффекты. Недопустимо подвергать женщин дополнительному чувству утраты, связанному с ложными ожиданиями от неэффективного лечения. Кроме того, лабораторные тесты, которые направлены на выявление показаний к иммунотерапии не имеют прогностического значения для исходов беременности и не должны применяться» .

Давайте же прислушаемся к выводам, полученным тяжелым опытом других. Не будем наступать на те же грабли.

HLA и аллегрия

Еще одна ранняя гипотеза состояла в предположении, что любая иммунологическая реакция организма контролируется исключительно генетически. Но после многолетних исследований и успешного проекта по секвенированию генома человека приходится признать, что генетический контроль - лишь полдела.

Хотя следует учитывать связь между развитием аутоиммунных заболеваний и отдельными аллелями HLA-комплекса. Достоверно известно про ассоциацию целиакии с аллелями генов DQ2 и DQ8. А антиген В27 ассоциируется с такими заболеваниями как ювенильнй ревматоидный артрит, синдромом Рейтера и др. Научные исследования этого направления продолжаются, важно собрать как можно больше данных для статистической достоверности и, возможно, будут сделаны еще какие-то ценные открытия.

Но это научные цели. Что же до диагностической ценности таких исследований, следует понимать, что ассоциация HLA-аллеля указывает на определенную связь между ним и заболеванием, но это не тот случай, когда аллель прямо определяет данное заболевание.

Так, аллели DQ2 и DQ8, ассоциированные с целиакией, встречаются у 10% людей, а сама целиакия только 1,5% населения. Или, например, 90% людей, страдающих анкилозирующим спондилитом, имеют антиген В27, однако у 10% людей с этим заболеванием нет антигена В27, а у 5% имеющих данный антиген заболевание никогда не разовьется.

То есть, генетический анализ не способен дать окончательный ответ в случае диагностики аутоиммунных заболеваний. Да, такое исследование может быть одним из маленьких аргументов, который поможет врачу, но только вместе с множеством других анализов, не генетических.

Поэтому, если вас просят принят участие в проекте исследования, включающем в себя HLA-типирование, на которое вам надо потратить лишь свое время, но не деньги – соглашайтесь, внесите посильный вклад в науку. Если же вас направят на такой анализ за ваш счет, поинтересуйтесь у врача (может быть, даже не у одного) – а настолько ли важен результат для установления окончательного диагноза и для выбора тактики лечения.

Метод определения Real-time-PCR.

Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА)

Доступен выезд на дом

Не выдается заключение врача-генетика

Локусы DRB1, DQA1, DQB1.

Типирование генов HLA II класса является обязательным исследованием для подбора донора при трансплантации органов. Кроме того, некоторые аллельные варианты генов HLA II класса ассоциированы с повышенным риском ряда заболеваний (сахарный диабет I типа, ревматоидные заболевания, аутоиммунный тиреоидит, восприимчи-вость к инфекционным заболеваниям и др.). Типирование генов HLA II класса применяется для диагностики некоторых форм бесплодия и невынашивания беременности.

Анализируемые аллели генов DRB1, DQB1 и DQA1 системы HLA II класса представлены в таблице:

VIP-Профили

Риск развития многофакторных заболеваний Нарушения обмена веществ Репродуктивное здоровье Репродуктивное здоровье женщины К генам HLA (human leucocyte antigens, антигены лимфоцитов человека) II класса относятся 24 гена, отличающиеся выраженным полиморфизмом. Гены HLA II класса экспрессируются в B-лимфоцитах, активированных T-лимфоцитах, моноцитах, макрофагах и дендритных клетках. Кодируемые генами HLA II класса белковые продукты, обладающие мощными антигенными свойствами, относятся к главному комплексу гистосовместимости (английская аббревиатура: МНС - major histocompability complex), играют важную роль в регуляции распознавания чужеродных агентов и являются необходимым участником многих иммунологических реакций. Из всех генов HLA II класса наибольшее значение в клинической практике имеют 3 гена: DRB1 (более 400 аллельных вариантов), DQA1 (25 аллельных вариантов), DQB1 (57 аллельных вариантов). Исследование генетических маркёров позволяет выделить группы различного риска развития диабета, что определяет различную тактику по ранней доклинической диагностике заболевания. Кроме того, исследование генетических маркеров существенно повышает прогностическую ценность иммунологических и гормональных исследований. Сахарный диабет I типа является заболеванием с наследственной предрасположенностью, которая определяется неблагоприятной комбинацией нормальных генов, большинство из которых контролируют различные звенья аутоиммунных процессов. В семьях больных риск развития сахарного диабета составляет: у детей от больных отцов - 4 - 5%; у детей от больных матерей - 2 - 3%; у родных братьев-сестёр - около 4%. Риск развития сахарного диабета зависит от количества больных членов семьи: при наличии 2 человек с сахарным диабетом (2 ребенка или родитель-ребенок) риск для здорового ребенка - от 10 до 12%, а при наличии диабета 1 типа у обоих родителей - более 30%. Риск развития диабета для родственников зависит также от возраста манифестации заболевания у других членов семьи: чем в более раннем возрасте начинается диабет, тем выше риск его развития у здоровых. Так, при манифестации диабета в возрасте от 0 до 20 лет риск его развития для братьев-сестер составляет 6,5%, а при манифестации в возрасте 20-40 лет - всего 1,2%. Сахарный диабет 1 и 2 типа являются генетически и нозологически самостоятельными заболеваниями, поэтому наличие диабета 2 типа у родственников не влияет на риск развития диабета 1 типа у членов семьи. Гены предрасположенности к СД 1 типа располагаются на различных хромосомах. В настоящее время известно более 15 таких генетических систем. Из них наиболее изученными, и, как предполагается, наиболее значимыми, являются гены 2 класса HLA-области, расположенной на коротком плече 6 хромосомы. Риск развития СД у братьев и сестёр может быть также оценен по степени их HLA-идентичности с больным диабетом: в том случае, если они полностью идентичны, риск наиболее высок и составляет около 18%, у наполовину идентичных братьев и сестер риск составляет 3%, а у полностью различных - менее 1%. Исследование генетических маркёров позволяет выделить группы различного риска развития диабета, что определяет различную тактику по ранней доклинической диагностике заболевания. Кроме того, исследование генетических маркеров существенно повышает прогностическую ценность иммунологических и гормональных исследований.

Литература

1. Д.А. Чистяков, И.И. Дедов «Локус генетической предрасположенности к диабету 1 типа (Сообщение 1) «Сахарный диабет» №3, 1999г.
2. Болдырева М.Н.»HLA (класс II) и естественный отбор. «Функциональный» генотип, гипотеза преимущества «функцио-нальной» гетерозиготности». Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук, 2007
3. Особенности дебюта и прогноз сосудистых осложнений у больных медленно прогрессирующим диабетом взрослых (Latent Autoimmune Diabetes in Adults - LADA). Пособие для врачей / Под редакцией директора ЭНЦ РАМН, академика РАМН профессора И. И. Дедова.- Москва.- 2003.- 38 с.
4. База OMIM *608547 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=608547.

Система HLA представляет собой индивидуальный набор различного типа белковых молекул, находящихся на поверхности клеток. Набор антигенов (HLA-статус) уникален для каждого человека.

К первому классу МНС относятся молекулы типов HLA-A, -B и -C. Антигены первого класса системы HLA находятся на поверхности ЛЮБЫХ клеток. Для гена HLA-А известны около 60 вариантов, для HLA-B - 136, а для гена HLA-С - 38 разновидностей.

Расположение генов HLA в 6 хромосоме .
Источник рисунка: http://ru.wikipedia.org/wiki/Человеческий_лейкоцитарный_антиген

Представителями МНС второго класса являются HLA-DQ, -DP и -DR. Антигены второго класса системы HLA находятся на поверхности только некоторых клеток ИМУННОЙ системы (в основном это лимфоциты и макрофаги ). Для транплантации ключевое значение имеет полная совместимость по HLA-DR (по другим HLA-антигенам отсутствие совместимости менее значимо).

HLA-типирование

Из школьной биологии надо помнить, что каждый белок в организме кодируется каким-либо геном в хромосомах, поэтому каждому белку-антигену системы HLA соответствует свой ген в геноме (наборе всех генов организма ).

HLA-типирование - это выявление разновидностей HLA у обследуемого. У нас есть 2 способа определения (типирования) интересующих нас антигенов HLA:

1) с помощью стандартных антител по их реакции «антиген-антитело » (серологический метод, от лат. serum - сыворотка ). С помощью серологического метода мы ищем белок-антиген HLA . HLA-антигены I класса для удобства определяют на поверхности Т-лимфоцитов, II класса - на поверхности В-лимфоцитов (лимфоцитотоксический тест ).

Схематическое изображение антигенов, антител и их реакции .
Источник рисунка: http://evolbiol.ru/lamarck3.htm

Серологический метод имеет много недостатков :

• нужна кровь обследуемого человека для выделения лимфоцитов,
• некоторые гены неактивны и не имеют соответствующих белков,
• возможны перекрестные реакции с похожими антигенами,
• искомые HLA-антигены могут быть в слишком низкой концентрации в организме или же слабо реагировать с антителами.

2) с помощью молекулярно-генетического метода - ПЦР (полимеразной цепной реакции ). Мы ищем участок ДНК, который кодирует нужный нам антиген HLA. Для этого метода годится любая клетка организма, имеющая ядро. Зачастую достаточно взять соскоб со слизистой оболочки рта.

Наиболее точным является именно второй метод - ПЦР (оказалось, что некоторые гены системы HLA можно выявить только молекулярно-генетическим методом). HLA-типирование одной пары генов стоит 1-2 тыс. рос. рублей . При это сравнивают имеющийся вариант гена у пациента с контрольным вариантом этого гена в лаборатории. Ответ может быть положительным (совпадение найдено, гены идентичны) или отрицательным (гены разные). Для точного выяснения номера аллельного варианта обследуемого гена может понадобиться перебрать все возможные варианты (если помните, то для HLA-B их 136). Однако на практике никто не проверяет все аллельные варианты интересующего гена, достаточно подтвердить наличие или отсутствие только одного или нескольких наиболее значимых .

Итак, молекулярная система HLA (Human Leucocyte Antigens ) кодируется в ДНК короткого плеча 6-й хромосомы. Там находится информация о белках, расположенных на клеточных мембранах и предназначенных для распознавания своих и чужеродных (микробных, вирусных и др.) антигенов и для координации клеток иммуннитета. Таким образом, чем больше сходства между двумя людьми по системе HLA, тем больше вероятность долгосрочного успеха при пересадке органа или ткани (идеальный случай - пересадка от однояйцевого близнеца). Однако изначальный биологический смысл системы MHC (HLA) состоит не в иммунологическом отторжении пересаженных органов, а заключается в обеспечении передачи белковых антигенов для распознавания различными разновидностями Т-лимфоцитов , ответственных за поддержание всех видов иммунитета. Определение HLA-варианта называется типированием .

В каких случаях проводят HLA-типирование?

Это обследование не является рутинным (массовым) и выполняется для диагностики только в сложных случаях :

• оценка риска развития ряда заболеваний с известной генетической предрасположенностью,
• выяснение причин бесплодия , невынашивания беременности (привычных выкидышей), иммунологической несовместимости.

HLA-B27

Типирование на HLA-B27 является, пожалуй, самым известным из всех. Этот антиген относится к MHC-I (молекулам главного комплекса гистосовместимости 1-го класса ), то есть находится на поверхности всех клеток.

Согласно одной из теорий, молекула HLA–B27 хранит на себе и передает T-лифоцитам микробные пептиды (белковые микрочастицы), вызывающие артрит (воспаление суставов), что приводит к аутоиммунному ответу.

Молекула В27 способна участвовать в аутоиммунном процессе, направленном против собственных тканей организма, богатых коллагеном или протеогликанами (соединение белков с углеводами). Аутоиммунный процесс запускается бактериальной инфекцией . Наиболее частые бактериальные возбудители таковы:

• клебсиелла пневмонии,
• бактерии кишечной группы: сальмонелла, иерсиния, шигелла,
• хламидия (Chlamidia trachomatis).

У здоровых европейцев антиген HLA-B27 встречается всего в 8% случаев . Однако его наличие резко увеличивает (до 20-30%) шансы заболеть ассиметричным олигоартритом (воспаление нескольких суставов ) и (или) получить поражение крестцово-подвздошного сочленения (воспаление соединения между крестцом и тазовыми костями ).

Установлено, что HLA-B27 встречается:

• у больных анкилозирующим спондилоартритом (болезнью Бехтерева) в 90-95% случаев (это воспаление межпозвонковых суставов с последующим сращением позвонков),
• при реактивных (вторичных) артритах в 36-100% (аутоиммунно-аллергическое воспаление суставов после некоторых мочеполовых и кишечных инфекций),
• при болезни (синдроме) Рейтера в 70-85% (является разновидностью реактивного артрита и проявляется триадой, состоящей из артрита + воспаления мочевыводящего канала + воспаления слизистой оболочки глаз),
• при псориатическом артрите в 54% (артрит при ),
• при энтеропатических артритах в 50% (артриты, связанные с поражением кишечника).

Если антиген HLA-B27 не обнаружен, болезнь Бехтерева и синдром Рейтера маловероятны , но в сложных случаях полностью исключить их все равно нельзя.

Если же у вас присутствует HLA-B27, советую вовремя лечить бактериальные кишечные инфекции и избегать (особенно хламидиоза), иначе с высокой вероятностью придется стать пациентом ревматолога и .

HLA-типирование для оценки риска сахарного диабета

Определенные разновидности HLA-антигенов чаще остальных встречаются у больных сахарным диабетом, а другие HLA-антигены - реже. Ученые пришли к выводу, что некоторые аллели (варианты одного гена) могут обладать провоцирующим или защитным действием при сахарном диабете. Например, наличие B8 или B15 в генотипе по отдельности увеличивает риск диабета в 2-3 раза, а совместно - в 10 раз. Присутствие определенных разновидностей генов может увеличивать риск заболевания сахарным диабетом 1 типа с 0,4% до 6-8%.

Счастливые носители B7 болеют диабетом в 14,5 раз реже тех людей, у которых B7 отсутствует. «Защитные» аллели в генотипе также способствуют более мягкому течению болезни в случае, если диабет все-таки разовьется (например, DQB*0602 у 6% больных СД 1 типа).

Правила наименования генов в системе HLA :
HLA-ген*{аллельная группа}:{специфический HLA-белок}:{показывает похожие замены в ДНК в кодирующем регионе}:{показывает отличия в некодирующем регионе}{буква N отражает изменения в экспрессии гена}.

Экспрессия гена - это процесс использования генетической информации, при котором информация из ДНК превращается в РНК или белок.

HLA-типирование позволяет установить риск развития сахарного диабета 1 типа. Наиболее информативны антигены HLA II класса: DR3/DR4 и DQ . У 50% больных СД I типа обнаружены HLA-антигены DR4, DQB*0302 и/или DR3, DQB*0201 . При этом риск развития болезни возрастает многократно.

HLA-антигены и невынашивание беременности

В комментариях здесь спросили:

У нас с мужем полное совпадение (6 из 6) по HLA второго типа. Есть ли способы бороться с невынашиванием беременности в таких случаях? К кому нужно обращаться, иммунологу?

Одним из иммунологических факторов невынашивания беременности является совпадение по 3 и более общим антигенам HLA II класса . Напомню, антигены HLA II класса находятся преимущественно на клетках иммунной системы (лейкоциты, моноциты, макрофаги, эпителиальные клетки ). Ребенок получает половину генов от отца и половину от матери. Для иммунной системы любые белки, кодируемые генами, являются антигенами и потенциально способны вызывать иммунный ответ. В начале беременности (первый триместр) чужеродные для организма матери отцовские антигены плода вызывают у матери выработку защитных (блокирующих) антител . Эти защитные антитела связываются с отцовскими HLA-антигенами плода, защищая их от клеток иммунной системы матери (натуральных киллеров) и способствуя нормальному протеканию беременности.

Если же у родителей совпадает 4 и более антигена HLA II класса, то образование защитных антител резко снижается или не происходит. В этом случае развивающийся плод остается беззащитным от материнской иммунной системы, которая без защитных антител расценивает клетки эмбриона как скопление опухолевых клеток и старается их уничтожить (это естественный процесс, потому что в любом организме ежесуточно образуются опухолевые клетки, которые ликвидируются иммунной системой). В итоге наступает отторжение эмбриона и выкидыш. Таким образом, для для нормального протекания беременности нужно, чтобы супруги отличались HLA-антигенами II класса. Также существует статистика, какие аллели (варианты) HLA-генов женщин и мужчин приводят к выкидышам чаще или реже.

Как лечить?

1. Перед планируемой беременностью требуется вылечить инфекционно-воспалительные процессы у супругов, потому что наличие инфекции и воспаления активирует иммунную систему.
2. В первой фазе менструального цикла (на 5-8 день) за 2-3 месяца до планируемого зачатия или программы ЭКО проводят лимфоцитоиммунотерапию (ЛИТ) лимфоцитами мужа (подкожно вводят лейкоциты отца будущего ребенка). Если муж болен гепатитом или другими вирусными инфекциями, используют донорские лимфоциты. Лимфоцитоиммунотерапия наиболее эффективна при наличии 4 и более совпадений по системе HLA и повышает шанс успешной беременности в 3-4 раза.
3. Во второй фазе цикла (с 16 по 25 день) проводят лечение гормоном дидрогестероном .
4. На ранних этапах беременности используют методы активной и пассивной иммунизации: лимфоцитоиммунотерапию каждые 3-4 недели до 12-14 недель беременности и внутривенное капельное введением средних доз иммуноглобулина (15 г в первом триместре). Это мероприятия способствуют успешному протеканию I триместра и снижают риск формирования плацентарной недостаточности.

Таким образом, лечение иммунологического невынашивания беременности должно проходить только в специализированном учреждении (центр невынашивания беременности, отделение патологии беременных и др.) под контролем штатного гинеколога, иммунолога, эндокринолога (гинеколога-эндокринолога). Обращаю внимание, что рядовые гинекологи и иммунологи из других медучреждений могут не иметь достаточной квалификации в этой области.

Ответ подготовлен на основе материала сайта http://bono-esse.ru/blizzard/Aku/AFS/abort_hla.html

P.S. (дополнение от 11 августа 2015)
Понятие женского иммунологического бесплодия сейчас подвергается сомнению, оно остается предметом научных споров и не рекомендуется к использованию в клинической практике. Подробнее см. комментарии ниже.

HLA-типирование 2 класса

Для чего это нужно:

HLA-типирование супругов проводят при диагностике бесплодия, перед планированием беременности и подготовкой к ЭКО, при невынашивании беременности и эпизодах неудачных попыток ЭКО, а также супругам, находящимся в родственной связи.

HLA-типирование – анализ генотипирования аллелей I и/или II классов для определения наличия схожести HLA-антигенов.

HLA-антигены (human leucocyte antigens) тканевой совместимости (cиноним: MHC - major histocompatibility complex - главный комплекс гистосовместимости) – белки, расположенные на поверхности большинства клеток и выполняющие роль своеобразных "антенн", позволяющих организму распознавать собственные и чужие клетки (бактерии, вирусы, раковые клетки и т.д.) и при необходимости запускать иммунный ответ, обеспечивающий выработку специфических антител и удаление чужеродного агента из организма.

Синтез белков HLA-системы определяется генами главного комплекса гистосовместимости, которые расположены на коротком плече 6-й хромосомы. Выделяют два основных класса генов главного комплекса гистосовместимости:

I класс включает гены локусов А, В, С –

II класс - D-область (сублокусы DR, DP, DQ) -

HLA-антигены 1 класса представлены на поверхности практически всех клеток организма, в то время, как HLA-антигены 2 класса выражены преимущественно на клетках иммунной системы, макрофагах, эпителиальных клетках.

HLA-типирование проводят в следующих случаях:

1.диагностика бесплодия у супругов, возникающая из-за сходства HLA-антигенов.

При наследовании HLA-антигенов тканевой совместимости ребенок получает по одному гену каждого локуса от обоих родителей, т.е. половина антигенов тканевой совместимости наследуется от матери и половина от отца. Таким образом, ребенок является наполовину чужеродным для организма матери. Эта "чужеродность" является нормальным физиологическим явлением, запускающим иммунологические реакции, направленные на сохранение беременности. Формируется клон иммунных клеток, вырабатывающий специальные "защитные" (блокирующие) антитела. Несовместимость супругов по HLA антигенам и отличие зародыша от материнского организма является важным моментом, необходимым для сохранения и вынашивания беременности. При нормальном развитии беременности "блокирующие" антитела к отцовским HLA-антигенам появляются с самых ранних сроков беременности. Причем, самыми ранними являются антитела к антигенам 2 класса гистосовместимости.

Сходство супругов по антигенам тканевой совместимости приводит к "похожести" зародыша на организм матери, что становится причиной недостаточной антигенной стимуляции иммунной системы женщины, и необходимые для сохранения беременности реакции не запускаются. В результате зародыш воспринимается как чужеродные клетки. В таком случае происходит самопроизвольное прерывание беременности.

2.идентификация личности и определение отцовства.

Каждый человек обладает индивидуальным набором HLA-антигенов, который представляет собой так называемый биометрический паспорт клетки, точно обозначающий принадлежность к конкретному организму.

3.подбор доноров для трансплантации органов и тканей.

HLA-несовместимость является главной причиной клинических и иммунологических проблем после трансплантации и основным лимитирующим фактором выбора донора для трансплантации. Благоприятный прогноз пересадки органа выше при наибольшем сходстве донора и реципиента по антигенам тканевой совместимости.

4.определение предрасположенности к различным заболеваниям.

При определении различных антигенов HLA можно рассчитать относительный риск возникновения целого ряда заболеваний, таких как целиакия (некоторые аллели локусов HLA-DQB1 и HLA-DQA1), синдром Рейтера, ревматоидный артрит, ишемическая болезнь сердца, гипертоническая болезнь, сахарный диабет I типа и другие.

В статье рассмотрим, что представляет собой HLA-типирование супругов.

Часто муж и жена не могут найти причину того, почему у них не получается зачать или выносить ребенка. Первичные лабораторные исследования зачастую не дают ответов на подобный вопрос, и для выявления основных факторов, провоцирующих подобную проблему, специалисты в дополнительном порядке назначают HLA-типирование супругов. Иммунологическая идентичность пары становится существенным препятствием на пути к деторождению.

Актуальность генетического анализа

Генетические исследования - наиболее современная методика выявления патологий и наследственных отклонений у человека. Вся информация о его особенностях, склонности к развитию некоторых заболеваний зашифрована в ДНК. В настоящее момент существуют десятки генетических тестирований, позволяющих выявить причину нарушений здоровья и спрогнозировать их возникновение в будущем. В области пренатальной диагностики анализ на HLA-типирование применяется для раннего определения наследственных заболеваний будущего ребенка и совместимости родителей.

Свойства и типы HLA

HLA в переводе означает "лейкоцитарный человеческий антиген", который отвечает за реакции гистологической совместимости. У каждого человека имеется свой уникальный набор HLA-генов и HLA-молекул. Потомство получает половину HLA-генов от родителей.

Что такое HLA-типирование 2 класса? Наиболее распространенными являются «неклассические» и «классические» гены HLA. Интерес представляют первые HLA 2-го класса, основной функцией которых является антигенное распознавание и межклеточное взаимодействие, обеспечение устойчивости организма к инфекциям. Однако у них есть некоторые минусы – такие гены зачастую становятся причиной возникновения аутоиммунных патологий и проблем в период беременности.

Роль HLA-типирования при беременности

Для полноценного процесса вынашивания антигены матери и отца должны различаться. Эмбрион, сформированный вследствие соединения родительских клеток, обладает особыми антигенами, чужеродными для материнского иммунитета. Организм женщины при этом реагирует на новые клетки включением специальных механизмов, которые защищают плод: вырабатываются антитела-протекторы, которые подавляют специализированные NK – киллерные клетки. Если этот процесс по каким-либо причинам нарушается, последние начинают уничтожать эмбрион, что приводит к самопроизвольному прерыванию беременности. В случаях когда родительские антигены совпадают, ребенок будет являться носителем антигенов, аналогичных материнским. В этой ситуации женский организм считает эмбриональные клетки своими, а значит, в организме не запускаются защитные процессы для сохранности плода. Иммунитет женщины воспринимает плод как опухолевое заболевание и начинает процессы его уничтожения или приостанавливает деление клеток. В повседневной жизни это свойство антигенов спасает человека от развития многих заболеваний, однако в этом случае становится фактором возникновения некроза тканей зародыша и провоцирует выкидыш.

Комплекс гистосовместимости влияет на сами процессы оплодотворения, имплантацию зародыша в матке и вынашиваемость плода. Наблюдается прямая зависимость: чем больше HLA-генов оказалось у супругов схожими, тем больше риск наступления выкидыша. Около 30 % пар с повторяющимися выкидышами имеют по нескольку совпадений. Если обнаружено четыре и более сходных генов, то безуспешные попытки ЭКО и невынашиваемость будут отмечаться практически во всех случаях.

Для полноценного процесса беременности крайне важно не только количественное совпадение у супругов, но и сами аллели HLA-генов у них. Так, в семьях с тремя выкидышами при расшифровке HLA-типирования выявлено повышение числа некоторых антигенов: у женщин – DQB1 0501, 0301, 0602; у мужчин – DRB1 12,10; DQA1 0102, DQA1 0102, 0301; DQB1 0602, 0501.

Показания к проведению

HLA-типирование 2 класса не является стандартной манипуляцией при беременности. Данный тест назначается только в случаях постоянного невынашивания плода и при часто повторяющихся неудачных попытках экстракорпорального оплодотворения.

Его осуществление иногда рекомендовано только отцам, поскольку некоторые вариации антигенов приводят к развитию отклонений во время сперматогенеза и негативно сказываются на качестве и свойствах половых клеток, что оказывает значительное влияние на развитие плода.

Как осуществляется HLA-типирование?

Методика проведения

Полимеразная цепная реакция является высокоточной методикой молекулярно-генетического диагностирования не только бесплодия, но и многих других патологий.

Для проведения данного генетического исследования супруги должны сдать венозную кровь. Из собранного материала выделяются лейкоциты. Анализ проводится методом ПЦР. Специалист-генетик на основе полученной информации будет устанавливать уровень иммунологической совместимости семейной пары.

Расшифровка HLA-типирования

Что означают результаты данного исследования?

Абсолютная иммунологическая несовместимость определяется, если у супругов получен высокий уровень совпадений (пять из шести возможных) среди генов DQA1, DRB1, DQB1. При неполной несовместимости результат исследования не может считаться основной причиной самопроизвольных выкидышей. Абсолютное несовпадение супругов - положительный результат, который идеален для беспроблемного течения беременности.

Расшифровку HLA-типирования 2 класса должен проводить только высококвалифицированный специалист.

Иммунотерапия при совпадении антигенов

Методики сохранения беременности при иммунной идентичности родителей были разработаны несколько десятков лет назад. Один из способов - вшивание беременной женщине тканей отца. Иммунитет начинал после этого атаковать не плод, а инородную ткань. В качестве дополнения проводилась очистка крови и подавление иммунной системы матери.

Перед беременностью необходимо вылечить воспалительные процессы, потому что присутствие инфекции активизирует иммунную систему.

В первой фазе цикла проводится лимфоцитоиммунотерапия лимфоцитами мужа (подкожно вводятся лейкоциты отца). Если супруг болен гепатитом или иными вирусными патологиями, используются донорские лимфоциты. Лимфоцитоиммунотерапия эффективна при наличии 4 и больше совпадений и повышает шанс беременности в 3 раза. Во второй фазе цикла проводится лечение дидрогестероном.

Иммунизация беременной женщины

Иммунизация – наиболее распространенная методика борьбы с HLA-идентичностью. Но на сегодняшний день возможны иные варианты поддержания беременности. После получения результатов исследования врач может рекомендовать применение иммунизации, которая бывает пассивной и активной.

При активной будущей матери вводят концентрированные лимфоциты мужа. Таким образом, ее организм учится узнавать клетки супруга. Некоторые научные исследования приводят данные о 55 процентах положительных результатов после проведенной процедуры.

Пассивную иммунизацию проводят при помощи специальных препаратов - иммуноглобулинов («Интраглобин», «Октагам», «Иммуновенин» и др.). Начинается такая процедура до зачатия, продолжается около трех месяцев. После этого прописываются курсы, поддерживающие беременность. Подобная методика применяется при осуществлении экстракорпорального оплодотворения.

Генетический анализ на антигенную совместимость пары поможет выяснить, является ли невынашивание или бесплодие следствием генетической несовместимости людей. В случае подтверждения этого не следует терять надежду на деторождение: современная медицина, благодаря многочисленным научным испытаниями и разработкам ученых-генетиков, способна решить такую проблему и помочь супругам выносить и родить здорового малыша. При этом родителям необходимо учесть, что им предстоит очень долгий процесс прохождения обследований и в случае наступления беременности постоянное наблюдение у специалиста.