При неудачных попытках родить ребёнка супруги задаются вопросом - в чём причина? Первичные анализы и исследования часто не могут ответить на него. Для выявления проблемы врачи дополнительно назначают HLA-типирование пары. Иммунологическая идентичность родителей становится серьёзным препятствием на пути к рождению ребёнка.

Актуальность генетических анализов

Генетические анализы - наиболее современный метод выявления заболеваний и отклонений у человека

Вся информация о человеке, его особенностях развития, склонностях к заболеваниям зашифрована в молекуле ДНК. В настоящее время существуют сотни генетических тестов, позволяющих быстро выявить причину отклонений в здоровье и даже спрогнозировать их появление в будущем. В пренатальной диагностике такие анализы используются для раннего выявления наследственных заболеваний плода и «совместимости» супругов.

Типы и свойства HLA

HLA (Human Leucocyte Antigens), что в переводе с английского означает человеческий лейкоцитарный антиген, отвечает за реакцию гистологической совместимости. У нас всех есть свой набор HLA-молекул и HLA-генов. Дети получают половину HLA-генов от мамы и папы.

Самыми распространёнными являются «классические» и «неклассические» гены HLA. В данной статье для нас представляют интерес первые, а точнее, HLA II класса, основная функция которых сводится к антигенному распознаванию и межклеточному взаимодействию, обеспечению устойчивости человека к инфекциям. Но у них есть и минусы - они могут стать причиной аутоиммунных заболеваний и проблем во время беременности.

Роль HLA в протекании беременности

Для полноценного вынашивания ребёнка антигены отца и матери должны различаться. Зародыш, сформированный в результате соединения родительских половых клеток, обладает специализированными антигенами, «чужими» для иммунитета матери. Организм женщины реагирует на новые клетки ребёнка включением особых механизмов, защищающих плод: синтезируются антитела-протекторы, подавляющие специализированные NK-клетки-киллеры. Если этого не происходит, последние начинают убивать зародыш, что приводит к прерыванию беременности.

Если антигены отца и матери совпадают, то ребёнок будет носителем антигенов идентичных материнским. В таком случае женский организм считает клетки зародыша своими, а значит, не запускает защитные механизмы для сохранности плода. Иммунитет воспринимает плод как некое опухолевое заболевание и пытается его уничтожить или приостановить деление клеток. В обычной жизни это спасает нас от многих заболеваний, но в этом случае становится причиной некроза в тканях зародыша и приводит к выкидышу.

Комплекс гистосовместимости оказывает влияние на сам процесс оплодотворения, прикрепление зародыша и вынашиваемость плода. Существует прямая зависимость: чем больше аллелей HLA-генов оказалось схожим у супругов, тем больше риск выкидыша. Около 35% пар с повторяющимися случаями выкидыша имеют по 2–3 совпадения. Если обнаружено четыре и больше сходных аллелей, то невынашиваемость и безуспешные попытки ЭКО будут почти во всех случаях.

Для полноценного вынашивания плода очень важно не только количественное совпадение у родителей, но и сами аллели HLA-генов у каждого из супругов. Так, в парах с тремя и более выкидышами при расшифровке результатов NLA-типирования выявлено увеличение числа некоторых аллелей: у женщин – DQB1 0301, 0501, 0602; у мужчин – DRB1 10, 12; DQA1 0102, DQA1 0301, 0102; DQB1 0501, 0602. При повторяющихся выкидышах уменьшается частота аллелей DRB1 03 и DQB1 0303 как у женщин, так и у мужчин, что говорит об их защитном эффекте на течение беременности.

Показания к HLA-типированию

HLA-типирование не является стандартной процедурой при беременности. Этот тест назначают только в случаях с постоянным невынашиванием плода и при повторяющихся неудачах экстракорпорального оплодотворения.

Метод проведения

Полимеразная цепная реакция - высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики

Для проведения генетического анализа супруги должны сдать кровь из вены. Из собранного материала будут выделены лейкоциты. Анализ проводят методом цепной полимеразной реакции (ПЦР). Врач-генетик на основе полученных результатов будет устанавливать степень иммунологической совместимости родителей.

Расшифровка результатов

В данном варианте у супругов 3 совпадения по вариантам HLA-антигенов

Полная иммунологическая несовместимость устанавливается, если у пары получен высокий процент совпадений (пять и более из шести возможных в трёх локусах , имеющих по 2 варианта в каждом из локусов ) среди генов DRB1 , DQA1 , DQB1 . При частичной несовместимости результат не может быть назван главной причиной выкидышей. Полное несовпадение партнёров - положительный результат, идеальный для беспроблемного протекания беременности .

Иммунотерапия при совпадении анализов в паре

Методы сохранения беременности при иммунологической идентичности родителей были придуманы несколько десятилетий назад. Один из способов - вшивание ткани отца беременной женщине. Иммунитет начинал атаковать не плод, а инородные ткани. В дополнение проводилась чистка крови и подавление иммунитета матери.

Иммунизация - самый распространённый метод борьбы с HLA-идентичностью супругов

Сейчас возможны другие варианты поддержания беременности и защиты плода. После получения результатов лечащий врач может порекомендовать использовать иммунизацию. Существует два вида иммунизации - активная и пассивная.

  1. При активной женщине вводятся концентрированные лимфоциты супруга. Таким образом, организм будущей матери постепенно учится узнавать клетки мужа. Некоторые исследования приводят данные о 60% положительных результатов при вовремя проведённой процедуре.
  2. Пассивная иммунизация проводится специальными препаратами иммуноглобулинов (Октагам, Интраглобин, Иммуновенин и др.) Начинается процедура до зачатия, длится два - три месяца. Затем прописываются поддерживающие беременность курсы. Этот метод используется при экстракорпоральном оплодотворении.

Типирование HLA-генов супругов (видео)

Генетический анализ на HLA-антигенную совместимость супругов поможет выяснить, является ли бесплодие или невынашивание следствием генетической несовместимости пары. В случае подтверждения диагноза не теряйте надежду: современная медицина зачастую способна решить эту проблему и помочь в появлении на свет здорового малыша. Иммунизация матери является распространённым методом борьбы с генетической идентичностью родителей по HLA-антигенам.

Гистосовместимость - взаимозаменяемость однотипных тканей различных людей.

Главный комплекс гистосовместимости (англ. MHC) - система генетического сходства, которую разработали с целью улучшения принятия человеческим организмом пересаженных элементов. Данная система также действительна для позвоночных животных.

Поскольку за реакции отторжения отвечает иммунная система, то непосредственными элементами MHC являются ее клетки - лейкоциты. Для обозначения Главного комплекса гистосовместимости людей используется понятие Человеческий лейкоцитарный антиген. Для краткого обозначения этого понятия используется английская аббревиатура HLA, расшифровка которой идентична российскому переводу. HLA кодируется генами 6-й хромосомы.

Антиген - химическое соединение преимущественно белковой природы. Его функцией является образование антител и подобные реакции иммунной системы.

Анализ на гистосовместимость

HLA типирование - анализ, который врачи назначают паре, испытывающей затруднения с вынашиванием ребенка, когда причина такого явления неясна. Иммунологическая идентичность родителей ощутимо затрудняет рождение ребенка.

HLA типирование назначают также в случае бесплодия, родственной связи супругов, безрезультатных попыток ЭКО.

Степень гистосовместимости пары узнают с помощью анализов на антигены HLA I, II класса.

Выделенные лейкоциты исследуют, применяя метод цепной полимеразной реакции.

Цена HLA типирования 1 пары генов достигает 1-2 тыс. руб.

Значения HLA для вынашивания ребенка

Различные антигены матери и отца являются условием, необходимым для полноценного вынашивания ребенка. Благодаря их соединению у зародыша вырабатываются специализированные антигены, которые воспринимаются иммунными клетками матери как «чужие». Реакцией женского организма на такие клетки ребенка является включение особых механизмов, направленных на защиту плода. В частности, вырабатываются антитела к специализированным NK-клеткам-киллерам. В противном случае последние начинают подавлять развитие зародыша и беременность прерывается.

Если мужчина и женщина имеют одинаковые антигены, у ребенка сформируются антигены, идентичные материнским. Женский организм классифицирует такие клетки зародыша как свои, поэтому механизмы для защиты плода не запускаются. Иммунитет идентифицирует плод как нечто наподобие опухоли. Следственно, это нечто подлежит уничтожению путем приостановления процесса деления клеток. В повседневной жизни это позволяет предотвратить многие заболевания, но при беременности данный процесс приводит к некрозу тканей зародыша и провоцирует выкидыш.

Аллели

У каждого гена могут быть десятки вариантов. Сочетания этих вариантов (аллелей) составляют разнообразные комбинации генов. Поэтому более точным будет утверждение, что риск выкидыша определяет именно число аллелей. Если у супругов схожими оказываются 2-3 аллели HLA-генов, риск повторяющихся выкидышей составляет 35 %. При 4 и больше совпадающих аллелях невынашиваемость достигает почти 100 %. Попытки ЭКО в таких случаях будут безуспешными.

Некоторые варианты антигенов вызывают отклонения в процессе сперматогенеза, что приводит к ухудшению качества половых клеток и сказывается на развитии плода. В таком случае проведение HLA-типирования рекомендуют только отцу.

Помимо вынашиваемости плода, комплекс гистосовместимости влияет на процесс оплодотворения, имплантацию зародыша.

Классы генов

Среди антигенов HLA выделяют 2 класса. Первый образуют антигены областей 6 хромосомы A, B, C, второй —D, DP, DQ, DR. Антигены I класса присутствуют на всех клетках, а II— только на тех, которые являются участниками иммунологических реакций (B-лимфоцитов, активированных T-лимфоцитов, моноцитов, дендритных клеток, макрофагов). Если генотип пары образуют HLA-антигены II класса, это дает основание говорить об иммунных формах невынашивания беременности.

HLA-B27

HLA-B27 - антиген, выявление которого является наиболее частой причиной проведения типирования.

HLA-B27 представляет собой молекулу I класса гистосовместимости.

Ученые предполагают, что HLA-B27 способна провоцировать аутоиммунную реакцию с помощью микробных пептидов, вызывающих артрит. Таким образом, действие молекулы HLA-В27 может направляться против тканей содержащего ее организма. В Европе HLA-B27 имеют 8 % здорового населения. Антиген HLA-B27 очень часто вызывает воспаление определенных костных сочленений и суставов. Также данный антиген может провоцировать вторичные артриты (последствия мочеполовых, кишечных инфекций).

Кроме того, HLA-B27 влияет на возникновение таких патологий:

  • болезни Бехтерева;
  • синдрома Рейтера;
  • артрита при псориазе;
  • артрита, обусловленного патологиями кишечника.

Маловероятно, но не исключено, что синдром Рейтера и болезнь Бехтерева обнаружат и у пациента, не имеющего антигена HLA-B27. Если же анализы показали наличие HLA-B27, то в целях профилактики воспаления суставов следует старательно бороться с бактериальными возбудителями кишечных болезней, предупреждать половые инфекции.

Расшифровка анализов

К расшифровке результатов анализов следует привлечь врача-иммунолога. При исследовании имеют значение выявленные аллели, которые обозначаю цифрами. В таблицу записывают и буквенно-цифровые кодировки белков DR и DQ: это названия общих для всех генов DRB1, DQA1, DQB1, к которым как раз и добавляют цифровые шифры аллелей. Проводя HLA типирование по DRB1, результаты учитывают с точностью до 2, по двум оставшимся генам - до 4 цифр. Первые 2 цифры кодируют номер группы вариантов генов, последующие 2 - вариант гена этой группы. Варианты могут быть разделены дробью - это означает, что присутствует один из перечисленных вариантов, но точнее определить не удалось.

Во второй столбик заносят варианты кодируемых геном белков, обнаруженных на поверхности клеток. Иногда вариант белка записывают в скобочках - это означает, что данное название старое, впоследствии оно было скорректировано в ходе молекулярно-генетических исследований.

Лечение

Супругов со схожими HLA-антигенами направляют на лечение. В одних случаях женщине назначают иммунизацию, для осуществления которой используют концентрированную культуру лимфоцитов партнера. Это приводит к многократному возрастанию антигенной нагрузки. В других случаях проводят лечение препаратами иммуноглобулинов человека. При этом достигаются иммуномодулирующий, иммуностимулирующий эффекты.

Если генетическая несовместимость подтвердится, не стоит терять надежду. Такой паре следует обратиться к хорошему специалисту, который бы занимался ведением беременности от зачатия до родов. Важно выполнять все указания врача.

Очень часто вследствие проведенного лечения у пары рождается долгожданный здоровый малыш. Современная медицина располагает необходимыми препаратами, методиками, которые позволяют преодолеть проблему. Дети у таких супругов рождаются полноценными. Единственным последствием генетической несовместимости может быть ослабление иммунной системы, о чем врачи предупреждают будущих родителей.

HLA - human leucocyte antigens - антигены тканевой совместимости. (cиноним: MHC - major histocompatibility complex - главный комплекс гистосовместимости).

На поверхности практически всех клеток организма представлены молекулы (белки), которые носят название антигенов главного комплекса гистосовместимости (HLA - антигены). Название HLA - антигены было дано в связи с тем, что эти молекулы наиболее полно представлены именно на поверхности лейкоцитов (клетки крови). Каждый человек обладает индивидуальным набором HLA - антигенов.

Молекулы HLA выполняют роль своеобразных "антенн" на поверхности клеток, позволяющих организму распознавать собственные и чужие клетки (бактерии, вирусы, раковые клетки и т.д.) и при необходимости запускать иммунный ответ, обеспечивающий выработку специфических антител и удаление чужеродного агента из организма.

Синтез белков HLA - системы определяется генами главного комплекса гистосовместимости, которые расположены на коротком плече 6-й хромосомы. Выделяют два основных класса генов главного комплекса гистосовместимости:

  • I класс включает гены локусов А, В, С;
  • II класс - D-область (сублокусы DR, DP, DQ).

HLA антигены I класса представлены на поверхности практически всех клеток организма, в то время, как белки тканевой совместимости II класса выражены преимущественно на клетках иммунной системы, макрофагах, эпителиальных клетках.

Антигены тканевой совместимости участвуют в распознавании чужеродной ткани и формировании иммунного ответа. HLA - фенотип обязательно учитывается при подборе донора для процедуры трансплантации. Благоприятный прогноз пересадки органа выше при наибольшем сходстве донора и реципиента по антигенам тканевой совместимости.

Доказана взаимосвязь между HLA-антигенами и предрасположенностью к ряду заболеваний. Так, практически у 85% больных анкилозирующим спондилитом и синдромом Рейтера выявлен HLA В27 антиген. Более, чем у 95% больных инсулинозависимым сахарным диабетом определяются HLA DR3, DR4 антигены.

При наследовании антигенов тканевой совместимости ребенок получает по одному гену каждого локуса от обоих родителей, т.е. половина антигенов тканевой совместимости наследуется от матери и половина от отца. Таким образом, ребенок является наполовину чужеродным для организма матери. Эта "чужеродность" является нормальным физиологическим явлением, запускающим иммунологические реакции, направленные на сохранение беременности. Формируется клон иммунных клеток, вырабатывающий специальные "защитные" (блокирующие) антитела.

Несовместимость супругов по HLA-антигенам и отличие зародыша от материнского организма является важным моментом, необходимым для сохранения и вынашивания беременности. При нормальном развитии беременности "блокирующие" антитела к отцовским антигенам появляются с самых ранних сроков беременности. Причем, самыми ранними являются антитела к антигенам II класса гистосовместимости.

Сходство супругов по антигенам тканевой совместимости приводит к "похожести" зародыша на организм матери, что становится причиной недостаточной антигенной стимуляции иммунной системы женщины, и необходимые для сохранения беременности реакции не запускаются. Беременность воспринимается, как чужеродные клетки. В таком случае происходит самопроизвольное прерывание беременности.

Для определения антигенов тканевой совместимости у супругов проводится HLA-типирование. Для проведения анализа берется кровь из вены, и из полученного образца выделяют лейкоциты (клетки крови, на поверхности которых наиболее широко представлены антигены тканевой совместимости). HLA-фенотип определяется методом цепной полимеразной реакции.

Проблема бесплодия, невынашивания беременности с каждым годом актуальнее и находится под пристальным наблюдением врачей. Частые выкидыши – это следствие сбоев в репродуктивной системе. Современные технологии экстракорпорального оплодотворения помогают решить вопрос бесплодия, причиной которого стали не только эндокринные патологии, иммунологические проблемы, но и генетический фактор. Для определения причин врачи назначают HLA типирование супругов (цена анализа доступна).

Информационные данные человека, а также склонность к определенным болезням сохраняются в микрочастице ДНК. В настоящее время существует множество генетических тестов, с помощью которых можно точно установить причину сдвигов в здоровье и предсказать появление некоторых заболеваний. В пренатальной диагностике исследования используются для обнаружения хромосомных изменений плода, а также генетической совместимости супругов.

HLA (Human Leucocyte Antigens) – человеческий лейкоцитарный антиген, который отвечает за генетическую совместимость. Клетки человеческого организма имеют на поверхности специфические белки - HLA антигены. За состав определенного HLA антигена отвечает конкретный ген 6 хромосомы. Исключительная комбинация HLA антигенов зависит от уникального сочетания HLA генов. Эмбриону от родителей достаются HLA гены, которые формируются в собственный набор. Этот комплекс такой же персональный, как и рисунок на пальцах. Благодаря HLA молекулам организм распознает чужеродные клетки: раковые, бактерии, вирусы. Если существует болезнетворная угроза, вырабатываются антитела, которые препятствуют развитию болезни.

Типы и свойства HLA

Наиболее распространенными являются «классические» HLA антигены. Они бывают HLA антигенами 1 класса (HLA типирование 1 класса) и HLA антигенами 2 класса (HLA типирование 2 класса).

Отличительной особенностью HLA генов является их разнообразие: примерно 13 500 разновидностей генов. Данные разновидности объединены в группы – аллели. Но таких групп в каждом гене значительно меньше, чем количество разновидностей, например у гена DRB 1 их 13 (HLA типирование DRB 1).

Диагностика HLA комплекса – это типирование генов HLA. С помощью теста определяют, какие варианты генов имеются у определенного человека. При типировании генов HLA исследуются антигены I и II класса. К первому классу относятся антигены, которые расположены поверх клеток. Типирование HLA II класса позволяет выявить антигены, расположенные на Т-лимфоцитах, моноцитах и на клетках, которые отвечают за иммунную реакцию. При определении факторов самопроизвольных абортов, как правило, проводят типирование генов HLA II класса.

Применение HLA типирования

  • Выявление совместимости тканей при трансплантации органов
  • Диагностика и вероятность развития аутоиммунных заболеваний
  • Выяснение причин репродуктивных аномалий

Для диагностических целей используют HLA типирование генов DRB 1, DGA 1 на уровне низкого разрешения. Типирование HLA DRB 1 проводится методами ПЦР.

HLA типирование и беременность

Для благополучной беременности необходимо, чтобы антигены родителей отличались. Сформированный зародыш обладает специфическими антигенами, «чужими» для материнского иммунитета. Организм беременной реагирует на клетки малыша запуском характерных механизмов, защищающих плод. Если сходство HLA генов супругов превышает норму, то формируется эмбрион, схожий с материнскими клетками. Иммунная система беременной женщины распознает зародыш как чужеродного агента и уничтожает его. Такая реакция организма прогнозирует выкидыш. Кроме того, HLA сходство является причиной врожденных изменений в развитии плода, слабого иммунитета у ребенка и токсикоза второй половины беременности.

Данную проблему позволяют решить современные методики экстракорпорального оплодотворения. При процедуре многие врачи не уделяют внимания генетическим аспектам, поэтому в некоторых случаях ЭКО неэффективно. Для полноценной беременности учитывают аллели HLA генов родителей. В парах, где есть случаи двух и более выкидышей, результаты HLA типирования (расшифровка проводится генетиком) свидетельствуют об увеличении количества некоторых аллелей.

Для диагностики иммунных форм невынашивания плода показательно HLA типирование II класса. Для анализа «HLA типирование» пара сдает кровь из вены. Из биологического материала выделяют белые клетки крови – лейкоциты, поскольку именно на них хорошо предоставлены HLA антигены. Исследование проводится способом полимеразной цепной реакции. Обычно расшифровка HLA типирования говорит о том, сколько идентичных генов у супругов. Когда проводится типирование HLA II класса, то по окончании теста в бланке анализа указываются выявленные совпадения. HLA типирование 2 класса (расшифровка анализов требует участия специалиста) – это генетический тест, и трактует его врач генетик. В большинстве случаев совпадение супругов по двум или более HLA антигенам становится основным фактором прерывания беременности. Важность анализа «HLA типирование» (сдать тест не составляет проблем) в том, что исследование дает возможность супружеской паре сделать осознанный шаг в пользу дальнейших проб оплодотворения, тщательно оценив риск осложнений. На сегодняшний день медицина успешно лечит некоторые генетические отклонения, поэтому если есть совпадения, то это не трагично: существует масса терапевтических мер, позволяющих сохранить плод.

Рекомендуют анализ HLA типирования тем супружеским парам, которые длительное время не могут зачать малыша или если у женщины прошлые беременности заканчивались выкидышем. Если результаты показывают отклонения от нормативов, то назначают медикаментозное лечение для сохранения плода.

Иммунитет обеспечивают антитела

Инфекционный процесс начинается при внедрении в организм патогенной микрофлоры. После проникновения болезнетворных бактерий организм начинает «защищаться», т. е. вырабатывать антитела, которые активно противостоят инфекции. Антитела – специфические белки (глобулины), сформированные при участии антигена. Содержатся антитела в сыворотке. Исследование по выявлению антител проводится на основе иммунологических реакций. Результаты анализа показывают наличие внутриклеточных форм глобулинов и антигенов, а также антител, находящихся на поверхности клетки.

После победы над инфекционными возбудителями в организме остаются антитела, которые обеспечивают выраженный иммунитет. Если идентичные возбудители повторно попадают в организм, то под влиянием антител они погибают. У человека, который переболел определенным инфекционным заболеванием, формируется собственная защита – иммунитет.

Активная иммунизация – методика, при которой в организм женщины вводят насыщенный раствор лимфоцитов мужа. В результате данной манипуляции иммунная система женщины способна отличить клетки супруга от своих клеток и угроза выкидыша значительно снижается. По данным медицинской статистики, вовремя назначенное лечение эффективно в 70% случаев применения методики. Однако активная иммунизация предполагает длительную подготовку и сохранение возможности у ребенка наследственных недугов.

Пассивная иммунизация – это введение иммуноглобулинов, полученных от человека. Пассивная иммунизация дает непродолжительный эффект, но мгновенный. Используют при этом человеческий иммуноглобулин или специальные сыворотки. Получают белок из плазмы крови взрослого человека. Перед использованием плазму тщательно тестируют на инфекции. Препараты вводят в виде инъекций, внутримышечно. Увеличение антител отмечается на вторые сутки.

Если HLA типирование супругов говорит о нецелесообразности терапевтических мероприятий, то можно обратиться к донору. Пара имеет возможность подобрать донора спермы или яйцеклетки и осуществить искусственное оплодотворение. Процедура осуществляется в специализированных клиниках, которые занимаются вопросами бесплодия.

Типирование HLA B27

Типирование HLA В27 - наиболее популярный тест. Это антиген к молекулам основного комплекса генетической идентичности. Доказано, что молекула HLA В27 передает Т-лимфоцитам белковые микрочастицы, вызывающие воспаление суставов. Артрит – аутоиммунное заболевание. Молекула В27 может принимать участие в процессе, направленном против собственных клеток, содержащих коллаген. Аутоиммунная реакция наступает при проникновении в организм бактериальной инфекции. Возбудителями патологии являются:

  • Клебсиелла (воспаление легких)
  • Бактерии кишечной группы
  • Хламидии

Наличие антигена HLA В27 увеличивает возможность воспаления нескольких суставов или патологическое поражение крестцово-подвздошного сплетения. Есть данные, что HLA В27 встречается:

  • у пациентов с болезнью Бехтерева
  • при реактивных артритах (аутоиммунное воспаление суставов аллергической природы после перенесенных инфекционных заболеваний мочеполовой сферы или кишечника)
  • синдром Рейтера
  • артрит при псориазе
  • артриты, связанные с патологиями кишечника

Если антиген HLA В27 отсутствует, то данные заболевания маловероятны. При наличии молекулы В27 врачи рекомендуют своевременно лечить бактериальные инфекции, избегать хламидиоза.

В медицине HLA типирование актуально в контексте «иммунологического бесплодия». Это не удивительно, ведь вопрос репродукции и реализации себя в роли родителя – очень важный. Поэтому сегодня ведущие мировые рекомендации, основанные на неопровержимых фактах, гласят: «HLA типирование, выявление цитотоксических антител против антигенов супруга рекомендуются для обследования пар с невынашиванием плода».

HLA типирование – цена исследования

Данный генетический тест проводят при изучении предрасположенности к определенным заболеваниям:

  • ревматоидный артрит
  • красная волчанка
  • сахарный диабет
  • повышенная активность щитовидной железы
  • рассеянный склероз
  • аутоиммунный гепатит
  • бесплодие

Исследование проводят в специализированных лабораториях, в условиях абсолютной стерильности. Цена диагностики:

  • Наследственная восприимчивость к сахарному диабету 1 типа по локусам генов системы HLA II класса – 5 945 руб.
  • Интерлейкин 28 бета – IL28В, генотипирование – 1 200 руб.
  • Генетический тест HLA типирование В27 – 1 900 руб.
  • Типирование генов группы HLA II класса – 5 100 руб.

Специальной подготовки для исследования не требуется. При проблемах с зачатием сдавать кровь необходимо обеим супругам. Интерпретацией результатов занимается квалифицированный специалист. Полученную информацию запрещено использовать для самостоятельной постановки диагноза и самолечения.

Начните свой путь к счастью - прямо сейчас!

Система HLA представляет собой индивидуальный набор различного типа белковых молекул, находящихся на поверхности клеток. Набор антигенов (HLA-статус) уникален для каждого человека.

К первому классу МНС относятся молекулы типов HLA-A, -B и -C. Антигены первого класса системы HLA находятся на поверхности ЛЮБЫХ клеток. Для гена HLA-А известны около 60 вариантов, для HLA-B - 136, а для гена HLA-С - 38 разновидностей.

Расположение генов HLA в 6 хромосоме .
Источник рисунка: http://ru.wikipedia.org/wiki/Человеческий_лейкоцитарный_антиген

Представителями МНС второго класса являются HLA-DQ, -DP и -DR. Антигены второго класса системы HLA находятся на поверхности только некоторых клеток ИМУННОЙ системы (в основном это лимфоциты и макрофаги ). Для транплантации ключевое значение имеет полная совместимость по HLA-DR (по другим HLA-антигенам отсутствие совместимости менее значимо).

HLA-типирование

Из школьной биологии надо помнить, что каждый белок в организме кодируется каким-либо геном в хромосомах, поэтому каждому белку-антигену системы HLA соответствует свой ген в геноме (наборе всех генов организма ).

HLA-типирование - это выявление разновидностей HLA у обследуемого. У нас есть 2 способа определения (типирования) интересующих нас антигенов HLA:

1) с помощью стандартных антител по их реакции «антиген-антитело » (серологический метод, от лат. serum - сыворотка ). С помощью серологического метода мы ищем белок-антиген HLA . HLA-антигены I класса для удобства определяют на поверхности Т-лимфоцитов, II класса - на поверхности В-лимфоцитов (лимфоцитотоксический тест ).

Схематическое изображение антигенов, антител и их реакции .
Источник рисунка: http://evolbiol.ru/lamarck3.htm

Серологический метод имеет много недостатков :

  • нужна кровь обследуемого человека для выделения лимфоцитов,
  • некоторые гены неактивны и не имеют соответствующих белков,
  • возможны перекрестные реакции с похожими антигенами,
  • искомые HLA-антигены могут быть в слишком низкой концентрации в организме или же слабо реагировать с антителами.

2) с помощью молекулярно-генетического метода - ПЦР (полимеразной цепной реакции ). Мы ищем участок ДНК, который кодирует нужный нам антиген HLA. Для этого метода годится любая клетка организма, имеющая ядро. Зачастую достаточно взять соскоб со слизистой оболочки рта.

Наиболее точным является именно второй метод - ПЦР (оказалось, что некоторые гены системы HLA можно выявить только молекулярно-генетическим методом). HLA-типирование одной пары генов стоит 1-2 тыс. рос. рублей . При это сравнивают имеющийся вариант гена у пациента с контрольным вариантом этого гена в лаборатории. Ответ может быть положительным (совпадение найдено, гены идентичны) или отрицательным (гены разные). Для точного выяснения номера аллельного варианта обследуемого гена может понадобиться перебрать все возможные варианты (если помните, то для HLA-B их 136). Однако на практике никто не проверяет все аллельные варианты интересующего гена, достаточно подтвердить наличие или отсутствие только одного или нескольких наиболее значимых .

Итак, молекулярная система HLA (Human Leucocyte Antigens ) кодируется в ДНК короткого плеча 6-й хромосомы. Там находится информация о белках, расположенных на клеточных мембранах и предназначенных для распознавания своих и чужеродных (микробных, вирусных и др.) антигенов и для координации клеток иммуннитета. Таким образом, чем больше сходства между двумя людьми по системе HLA, тем больше вероятность долгосрочного успеха при пересадке органа или ткани (идеальный случай - пересадка от однояйцевого близнеца). Однако изначальный биологический смысл системы MHC (HLA) состоит не в иммунологическом отторжении пересаженных органов, а заключается в обеспечении передачи белковых антигенов для распознавания различными разновидностями Т-лимфоцитов , ответственных за поддержание всех видов иммунитета. Определение HLA-варианта называется типированием .

В каких случаях проводят HLA-типирование?

Это обследование не является рутинным (массовым) и выполняется для диагностики только в сложных случаях :

  • оценка риска развития ряда заболеваний с известной генетической предрасположенностью,
  • выяснение причин бесплодия , невынашивания беременности (привычных выкидышей), иммунологической несовместимости.

HLA-B27

Типирование на HLA-B27 является, пожалуй, самым известным из всех. Этот антиген относится к MHC-I (молекулам главного комплекса гистосовместимости 1-го класса ), то есть находится на поверхности всех клеток.

Согласно одной из теорий, молекула HLA–B27 хранит на себе и передает T-лифоцитам микробные пептиды (белковые микрочастицы), вызывающие артрит (воспаление суставов), что приводит к аутоиммунному ответу.

Молекула В27 способна участвовать в аутоиммунном процессе, направленном против собственных тканей организма, богатых коллагеном или протеогликанами (соединение белков с углеводами). Аутоиммунный процесс запускается бактериальной инфекцией . Наиболее частые бактериальные возбудители таковы:

  • клебсиелла пневмонии,
  • бактерии кишечной группы: сальмонелла, иерсиния, шигелла,
  • хламидия (Chlamidia trachomatis).

У здоровых европейцев антиген HLA-B27 встречается всего в 8% случаев . Однако его наличие резко увеличивает (до 20-30%) шансы заболеть ассиметричным олигоартритом (воспаление нескольких суставов ) и (или) получить поражение крестцово-подвздошного сочленения (воспаление соединения между крестцом и тазовыми костями ).

Установлено, что HLA-B27 встречается:

  • у больных анкилозирующим спондилоартритом (болезнью Бехтерева) в 90-95% случаев (это воспаление межпозвонковых суставов с последующим сращением позвонков),
  • при реактивных (вторичных) артритах в 36-100% (аутоиммунно-аллергическое воспаление суставов после некоторых мочеполовых и кишечных инфекций),
  • при болезни (синдроме) Рейтера в 70-85% (является разновидностью реактивного артрита и проявляется триадой, состоящей из артрита + воспаления мочевыводящего канала + воспаления слизистой оболочки глаз),
  • при псориатическом артрите в 54% (артрит при ),
  • при энтеропатических артритах в 50% (артриты, связанные с поражением кишечника).

Если антиген HLA-B27 не обнаружен, болезнь Бехтерева и синдром Рейтера маловероятны , но в сложных случаях полностью исключить их все равно нельзя.

Если же у вас присутствует HLA-B27, советую вовремя лечить бактериальные кишечные инфекции и избегать (особенно хламидиоза), иначе с высокой вероятностью придется стать пациентом ревматолога и .

HLA-типирование для оценки риска сахарного диабета

Определенные разновидности HLA-антигенов чаще остальных встречаются у больных сахарным диабетом, а другие HLA-антигены - реже. Ученые пришли к выводу, что некоторые аллели (варианты одного гена) могут обладать провоцирующим или защитным действием при сахарном диабете. Например, наличие B8 или B15 в генотипе по отдельности увеличивает риск диабета в 2-3 раза, а совместно - в 10 раз. Присутствие определенных разновидностей генов может увеличивать риск заболевания сахарным диабетом 1 типа с 0,4% до 6-8%.

Счастливые носители B7 болеют диабетом в 14,5 раз реже тех людей, у которых B7 отсутствует. «Защитные» аллели в генотипе также способствуют более мягкому течению болезни в случае, если диабет все-таки разовьется (например, DQB*0602 у 6% больных СД 1 типа).

Правила наименования генов в системе HLA :
HLA-ген*{аллельная группа}:{специфический HLA-белок}:{показывает похожие замены в ДНК в кодирующем регионе}:{показывает отличия в некодирующем регионе}{буква N отражает изменения в экспрессии гена}.

Экспрессия гена - это процесс использования генетической информации, при котором информация из ДНК превращается в РНК или белок.

HLA-типирование позволяет установить риск развития сахарного диабета 1 типа. Наиболее информативны антигены HLA II класса: DR3/DR4 и DQ . У 50% больных СД I типа обнаружены HLA-антигены DR4, DQB*0302 и/или DR3, DQB*0201 . При этом риск развития болезни возрастает многократно.

HLA-антигены и невынашивание беременности

В комментариях здесь спросили:

У нас с мужем полное совпадение (6 из 6) по HLA второго типа. Есть ли способы бороться с невынашиванием беременности в таких случаях? К кому нужно обращаться, иммунологу?

Одним из иммунологических факторов невынашивания беременности является совпадение по 3 и более общим антигенам HLA II класса . Напомню, антигены HLA II класса находятся преимущественно на клетках иммунной системы (лейкоциты, моноциты, макрофаги, эпителиальные клетки ). Ребенок получает половину генов от отца и половину от матери. Для иммунной системы любые белки, кодируемые генами, являются антигенами и потенциально способны вызывать иммунный ответ. В начале беременности (первый триместр) чужеродные для организма матери отцовские антигены плода вызывают у матери выработку защитных (блокирующих) антител . Эти защитные антитела связываются с отцовскими HLA-антигенами плода, защищая их от клеток иммунной системы матери (натуральных киллеров) и способствуя нормальному протеканию беременности.

Если же у родителей совпадает 4 и более антигена HLA II класса, то образование защитных антител резко снижается или не происходит. В этом случае развивающийся плод остается беззащитным от материнской иммунной системы, которая без защитных антител расценивает клетки эмбриона как скопление опухолевых клеток и старается их уничтожить (это естественный процесс, потому что в любом организме ежесуточно образуются опухолевые клетки, которые ликвидируются иммунной системой). В итоге наступает отторжение эмбриона и выкидыш. Таким образом, для для нормального протекания беременности нужно, чтобы супруги отличались HLA-антигенами II класса. Также существует статистика, какие аллели (варианты) HLA-генов женщин и мужчин приводят к выкидышам чаще или реже.

Как лечить?

  1. Перед планируемой беременностью требуется вылечить инфекционно-воспалительные процессы у супругов, потому что наличие инфекции и воспаления активирует иммунную систему.
  2. В первой фазе менструального цикла (на 5-8 день) за 2-3 месяца до планируемого зачатия или программы ЭКО проводят лимфоцитоиммунотерапию (ЛИТ) лимфоцитами мужа (подкожно вводят лейкоциты отца будущего ребенка). Если муж болен гепатитом или другими вирусными инфекциями, используют донорские лимфоциты. Лимфоцитоиммунотерапия наиболее эффективна при наличии 4 и более совпадений по системе HLA и повышает шанс успешной беременности в 3-4 раза.
  3. Во второй фазе цикла (с 16 по 25 день) проводят лечение гормоном дидрогестероном .
  4. На ранних этапах беременности используют методы активной и пассивной иммунизации: лимфоцитоиммунотерапию каждые 3-4 недели до 12-14 недель беременности и внутривенное капельное введением средних доз иммуноглобулина (15 г в первом триместре). Это мероприятия способствуют успешному протеканию I триместра и снижают риск формирования плацентарной недостаточности.

Таким образом, лечение иммунологического невынашивания беременности должно проходить только в специализированном учреждении (центр невынашивания беременности, отделение патологии беременных и др.) под контролем штатного гинеколога, иммунолога, эндокринолога (гинеколога-эндокринолога). Обращаю внимание, что рядовые гинекологи и иммунологи из других медучреждений могут не иметь достаточной квалификации в этой области.

Ответ подготовлен на основе материала сайта http://bono-esse.ru/blizzard/Aku/AFS/abort_hla.html

P.S. (дополнение от 11 августа 2015)
Понятие женского иммунологического бесплодия сейчас подвергается сомнению, оно остается предметом научных споров и не рекомендуется к использованию в клинической практике. Подробнее см. комментарии ниже.