Уреаплазма (Ureaplasma species )

количественное определение ДНК

(информация для специалистов)

Обнаружение Ureaplasma species с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени является молекулярно-генетическим исследованием, позволяющим количественно оценить ДНК уреаплазм в изучаемом материале.

Уреаплазмы относятся к условно-патогенным для человека микроорганизмам. При этом к роду Ureaplasma species относятся 2 вида: Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum . Отличить их возможно только при молекулярно-генетическом исследовании. При этом роль Ureaplasma parvum в развитии воспалительных заболеваний в настоящее время не установлена. А Ureaplasma urealyticum способна вызывать воспалительные заболевания урогенитального тракта при определенных условиях. Чаще всего это происходит при снижении иммунитета в случае переохлаждения, стрессе, других заболеваниях, ВИЧ-инфекции и беременности.

Уреаплазмы присутствуют на слизистых оболочках и в выделениях мочеполовых органов у 40-80% практически здоровых людей. Поэтому многие исследователи относят их к нормальной микрофлоре. Однако за счет продуктов собственного метаболизма они могут нарушать защитные барьеры слизистых. Тем самым провоцируется развитие дисбиоза влагалища, создаются условия для размножения других патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Поэтому уреаплазмы часто сочетаются с другой инфекцией мочеполовой системы.

Передача возбудителя осуществляется от больного преимущественно половым путем. Кроме того, возможна передача Ureaplasma species от зараженной матери к ребенку при беременности и родах.

Обнаружение Ureaplasma urealyticum у беременных грозит опасностью поздних выкидышей, хориоамнионитами, задержкой внутриутробного развития плода и низкой массой тела при рождении.

У мужчин Ureaplasma species вызывают негонококковый уретрит, цистит, простатит, орхит и эпидидимит. А у женщин – вагинит, цервицит, эндометрит и аднексит, что может приводить к появлению спаек, внематочной беременности и бесплодию.

Инкубационный период в случае заболевания составляет от 2 до 5 недель. При этом клиническая картина поражения уреаплазмами неспецифична и ничем не отличается от инфекционного поражения урогенитального тракта другой природы (хламидии, трихомонады).

Для количественного определения Ureaplasma species в настоящее время используют полимеразную цепную реакцию в реальном времени.

Суть метода:

Суть метода заключается в удвоении обнаруживаемых ДНК с помощью специальных ферментов ДНК-полимераз. В результате после проведения множества циклов по удвоению число искомых ДНК становится достаточным для обнаружения их с помощью флуоресцентных красителей.

Показания для проведения исследования:

Диагностика инфекций, передающихся половым путем в случае наличия жалоб у пациента (жжение и боль при мочеиспускании и половом акте, покраснение наружного отверстия уретры у мужчин, слизистые выделения из половых органов).

При планировании беременности (обоим супругам).

При первичном и вторичном бесплодии у мужчин и у женщин для выяснения причин.

При внематочной беременности и невынашивании беременности.

При обнаружении Ureaplasma species ранее для контроля адекватности проводимой терапии (через 1 месяц после окончания курса лечения).

При профилактическом обследовании мочеполовой системы у здоровых людей.

Подготовка пациента к исследованию:

Взятие материала для исследования у женщин рекомендовано проводить до менструации или через 2 дня после ее окончания. Важно отметить, что концентрация условно-патогенных микроорганизмов в отделяемом урогенитального тракта у женщин варьирует в зависимости от фазы менструального цикла. Причем разница может составлять сотни-тысячи раз. Принимая это во внимание, рекомендуют брать материал в определенные дни цикла, когда концентрация микроорганизмов максимальна: на 4-7 день или 21-28 день.

Референсные значения:

В норме ДНК Ureaplasma species в образце не обнаруживается. Результат отрицательный.

Интерпретация результатов:

При увеличении концентрации микроорганизма в структурах урогенитального тракта развиваются воспалительные процессы.

У женщин может возникнуть:

• уретрит;
• вагинит;
• вульвовагинит;
• бартолинит;
• кольпит;
• эндометрит;

Эти заболевания сопровождаются болевыми ощущениями и дискомфортом при сексе и мочеиспускании. Появляются выделения.

У мужчин превышение нормы уреаплазма парвум может вызывать уретрит, простатит, орхит. Хотя это случается редко, такие случаи задокументированы.

При увеличении нормы уреаплазмы парвум возможность заниматься сексом отсутствует. Причин тому несколько.

Во-первых, это неприятно, потому что воспаленные половые органы болят. Во-вторых, при увеличении нормы уреаплазма парвум заражение партнера весьма вероятно. При появлении признаков воспалительного процесса необходимо обследовать обоих супругов. Если по данным ПЦР количественного норма уреаплазмы парвум повышена, в половые контакты лучше не вступать. Или, в крайнем случае, следует использовать презерватив. Обычно он защищает от заражения.

Если наблюдается уреаплазма парвум норма у супруга и превышение нормы у другого, лечиться должны оба партнера.

Уреаплазма парвум норма – существует ли она?

Принятые нормы существуют. Однако многие врачи с ними не согласны, потому что норма уреаплазма парвум изменчива в человеческом организме при внешних воздействиях. Это означает, что сегодня анализ показывает отрицательный результат, и человек согласно им здоров. Но завтра всё может измениться, и популяция микроорганизмов увеличивается.

Считается, что показаниями к лечению уреаплазмоза является:

• увеличение концентрации выше 10 4 копий в пробе (ПЦР) или КОЕ (бак посев);
• угроза прерывания беременности;
• бесплодие;
• признаки воспалительного процесса урогенитального тракта.

Но можно ли ориентироваться на норму уреаплазмы парвум, если она постоянно меняется от внешних воздействий? Многие венерологи полагают, что лучше лечение начать даже в том случае, если симптомов нет.

Не стоит дожидаться, пока у женщины возникнет бесплодие или угроза прерывания беременности. Лучше до этого не доводить и пролечиться вовремя.

Уреаплазма парвум при беременности

Наибольшую опасность представляет уреаплазма парвум у женщин при беременности. Часто женщины спрашивают, может ли вызывать выкидыш норма уреаплазмы парвум? Скорее всего, при небольшой концентрации микроорганизма беременность пройдет нормально. Но проблема в том, что в первом триместре возникает физиологический иммунодефицит. Он необходим, чтобы генетически чужеродный плод не был отторгнут до формирования гематоплацентарного барьера. Поэтому ослабляется защита против инфекций. В результате норма уреаплазмы парвум при беременности возрастает.

Количество бактерий увеличивается, что может вызывать:

• невынашивание беременности (самопроизвольный аборт);
• формирование пороков развития;
• осложнения при беременности;
• ранние роды;
• инфицирование плода во время родов.

Поэтому важно сдать анализ на уреаплазму парвум при планировании беременности. Если микроорганизм выявлен, следует пройти курс терапии до зачатия. При необходимости может проводиться лечение уреаплазмы парвум при беременности. Оно назначается, если угроза для плода превышает риски, связанные с назначением препаратов. Средством выбора является джозамицин.

Лечить уреаплазму парвум при беременности

этим антибиотиком следует в течение 10 дней. По решению врача курс терапии может быть продлён до 14 дней, что зависит от результатов анализов и инструментальных исследований. Назначают джозамицин по 500 мг, 3 раза в день.

После курса терапии требуется контроль излеченности. Вначале проводится оценка клинических симптомов. Если они сохраняются, эти может свидетельствовать о неэффективности проведенного лечения. В таком случае может потребоваться повторный курс со сменой антибактериального препарата.

Лабораторный контроль излеченности проводится через месяц после завершения антибиотикотерапии. Норма уреаплазмы парвум после лечения говорит о том, что оно прошло успешно. При необходимости обследования на уреаплазмоз обращайтесь в нашу клинику. У нас работают высококвалифицированные врачи, которые установят диагноз и назначат адекватное лечение.

При подозрении на уреаплазму обращайтесь к грамотным венерологам.

Уреаплазма встречается практически у каждого человека, хотя относится к инфекциям, передающимся половыми путями. Это обусловлено тем, что микроорганизм принадлежит к группе условно патогенных, то есть вызывает заболевание только в определенных обстоятельствах, а все остальное время практически не влияет на жизнь человеческого организма.

Сегодня ученым известно 2 основных типа уреаплазмы и 14 серотипов – они все практически не имеют ДНК или клеточной структуры. Микроорганизмы этого класса могут заразить не только половым путем, но поражают плод, попав в утробу матери. Они проникают в половые пути младенца и остаются там на всю жизнь. Микробы ничем себя не выдают до того момента, пока не созреют условия для развития уреаплазмоза. Поэтому врачи всего мира ищут способы определения точного количества этих микроорганизмов в теле больного или здорового пациента.

Общая информация

Часть врачей считают число 10*4 микробных тел на г или мл пограничной цифрой. Чтобы проверить, есть ли у человека такое количество микробов, надо исследовать минимально возможный образец материала соответствующей ткани.

Обычно проблем не бывает, если надо исследовать кровь или мочу, но взятие проб из влагалища или уретры является сложной задачей, и если у больного нет патологических выделений, то практически невозможно взять анализ. Поэтому врачи используют альтернативные методики получения образцов:

1. Делается соскоб со слизистых поверхностей на шейке матки, уретры, влагалища. Затем образцы переносят в транспортный контейнер. Исследование производят специальными тестовыми программами: они выпускаются фармацевтическими фирмами серийно.
2. При другом способе во влагалище или уретру временно вводят нейтральную жидкость, например, физиологический раствор или дистиллированную воду. Затем все это сбрасывается и собирается в специальные приборы с соответствующей градуировкой.
3. Норма у женщин уреаплазмы определяется еще одним способом – обследуемой пациентке во влагалище на длительный период вводят тампон, который затем исследуется.

Но надо учитывать, что на разных этапах менструального цикла количество отслоившегося эпителия из вагины будет различно, хотя образцы будут брать у одной и той же женщины с одинаковой глубины. Поэтому врачам надо учитывать много факторов, чтобы поставить диагноз, ориентируясь на количественное значение уреаплазм, полученное во время обследования. Например, у беременных часто определяется высокое значение этих микроорганизмов, хотя подобный анализ до зачатия практически дает отрицательный результат на уреаплазмы.

Количественное определение

Часто люди интересуются, почему за основу взята цифра 10*4, а не, допустим, 10*3 или 10*2. На это есть ответ. В 1956 году исследователь Касс Эдвард обследовал больных полиневритом. Он ввел понятие значимого уровня, который должен был дать ответ, лечить или нет больных с отсутствием значимых симптомов, если у них предполагается наличие болезнетворных микроорганизмов. Для этого он разделил их на 2 подгруппы: люди, которым обязательно потребуется курс лечения, и пациенты, кому такая терапия не нужна. Тогда он количественно вывел пограничное значение в 10*5.

Но затем многие исследователи уточнили эту цифру, так как выяснилось, что уреаплазмозом болеют женщины, у которых это число было на 30-40% меньше указанного Кассом значения.

Немецкие врачи в 1982-83 годах обследовали больных мужчин с разными типами мочеполовых инфекций. У многих во взятых образцах количество уреаплазм было больше 10*4 КОЕ/мл. Окончательно это число утвердили в статусе пограничного значения после исследований 1988 года., когда Липман обнаружил связь между частотой преждевременных родов у женщин с количеством уреаплазм, в 2 раза большим числа 10*4. Затем исследования Хоровица показали, что у многих женщин в ранний послеродовой период может развиться эндометрит, если число микроорганизмов равно или превышает 10*5.

Поэтому, если при обследовании пациента выявлено количество микроорганизмов, больше указанного значения, то пациенту предлагают курс лечения от уреаплазм, который осуществляется при помощи различных антибиотиков.

Уреаплазмы зачастую являются представителями нормальной микрофлоры органов мочеполовой системы, но, зависимо от количества этих микроорганизмов и иммунного статуса организма, они могут провоцировать урогенитальные заболевания. Наличие уреаплазм в анализах служит сигналом для более детальной диагностики и при необходимости назначения лечения.

Анализ на уреаплазмоз проводят, используя несколько методов, которые подбирает лечащий врач индивидуально для каждого пациента.

Метод бактериологического посева

Бактериологический посев является одним из наиболее точных анализов для выявления уреаплазм. Метод применяется для:

• установления причины воспалительных процессов, поражающих органы мочевой или половой системы;
• количественного определения уреаплазм в биоматериале;
• выбора наиболее эффективных антибиотиков для лечения;
• установления родовой принадлежности бактерий, вызвавших инфекцию (микоплазмы, гонококки, хламидии);
• обследования в профилактических целях.

Метод основывается на помещении материала в селективную (специфическую) питательную среду для выращивания уреаплазм. Материалом для бактериологического посева служит мазок со слизистой оболочки мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища, секрет простаты, эякулят, моча.

Выращивание бактерий происходит в течение 2–3 суток, после чего определяют количество патогенных бактерий. Применение бактериологического метода также необходимо для получения антибиотикограммы, которая позволяет точно установить чувствительность и выбрать наиболее эффективный препарат для лечения. Постановка антибиотикограммы занимает около недели. На основе титра уреаплазм и антибиотикограммы лечащий врач разрабатывает последующую стратегию лечения. На результат бак посева может повлиять недавний курс антибиотикотерапии.

Норма бак посева на уреаплазму – отсутствие роста на селективных питательных средах. При отсутствии инфекционного процесса, вызванного уреаплазмами, результат бактериологического посева будет отрицательным.

Положительный результат посева в совокупности с клиническими признаками воспалительных заболеваний, поражающих мочеполовую систему, и отсутствии других болезнетворных бактерий, в том числе и микоплазм, хламидий, гонококков, свидетельствует о том, что уреаплазменная инфекция стала причиной заболевания. Если при посеве выявили незначительное количество уреаплазм в материале, но симптомов заболеваний нет, то говорят о носительстве.

Диагностический титр уреаплазм в биоматериале составляет 104 бактерийных клеток в мл пробы (КОЕ). Обнаружение уреаплазм в количестве менее диагностического не требует терапии противомикробными лекарствами, и в таком случае постановка антибиотикограммы не проводится.

Недостатки метода

Принцип метода основан на том, что при росте в питательной среде бактерии расщепляют мочевину, изменяя рН среды. Кислотность среды проверяют с помощью индикатора, цвет которого изменяется с ее снижением. Но разные уреаплазмы имеют разную способность к расщеплению мочевины, что значительно осложняет определение количества бактерий по степени изменения цвета индикатора. Также способностью расщеплять мочевину обладают другие патогенные бактерии.

Подбор эффективного антибиотика с помощью бакпосева осложняется разной чувствительностью уреаплазм к влиянию препарата в условиях лаборатории (в пробирке) и в организме, что обусловлено с рядом факторов (кислотность среды, биодоступность, разным содержанием антибиотика в органах).

Полимеразная цепная реакция

• используется для быстрого выявления в пробе генетического материала уреаплазм (проведение этого экспресс-метода занимает около 4-6 часов);
• является одним из наиболее чувствительных и точных методов диагностики уреаплазм, позволяющий установить даже незначительное количество патогенов в биоматериале;
• применяется для видового определения возбудителя (уреаплазма уреалитикум или уреаплазма парвум).

Исследование назначают при клинических признаках инфекционных болезней мочеполовой системы и подозрении на уреаплазмоз, бесплодии, осложненной беременности.

Для анализа пациенты сдают влагалищные выделения, утреннюю мочу, ректальный и урогенитальный мазки, эякулят.

Норма исследования на уреаплазму – это отрицательные результаты. Присутствие симптомов инфекционных процессов, поражающих мочеполовую систему, и отрицательный результат ПЦР свидетельствует о том, что данные патогенные бактерии не являются возбудителями воспалительного процесса.

Положительные результаты ПЦР могут говорить о том, что возбудителями воспалительных , но для принятия окончательного решения о стратегии лечения рекомендуется проверить наличие в организме других патогенов, например, гонококков, хламидий, микоплазм, которые также могут служить причиной воспалений. При положительном результате следует проводить последующую диагностику, поскольку этот метод не позволяет установить количество и физиологическую активность уреаплазм.

Обнаружение генетического материала уреаплазма парвум и отсутствие клинических признаков воспалительных заболеваний органов выделительной или половой системы, как правило, расценивают как носительство.

Недостатки метода

Возможны ложноположительный или ложноотрицательный результаты. Первый случается вследствие загрязнения исследуемой пробы посторонней ДНК, а второй – когда пациент прошел курс антибиотикотерапии за месяц до сдачи анализа или вследствие взаимодействия реагентов, используемых для ПЦР, с компонентами биоматериала, например, с гепарином, гемоглобином.

Отсутствие генетического материала в пробе (например, в выделениях) может быть обусловлено локализацией воспалительного процесса в яичниках, предстательной железе и других внутренних отделах мочеполовой системы. Поэтому результаты постановки полимеразной цепной реакции не используются при выборе тактики лечения. Наиболее часто этот метод применяют с целью контроля эффективности терапии или для микробиологического скрининга.

Серологическое исследование

Серологическая диагностика основывается на определении антител, выработанных организмом пациента к антигенным структурам на поверхности клеток уреаплазм или самих антигенов патогенных бактерий. Серологическое исследование применяют для установления причин заболеваний инфекционного характера после родов, выкидыша, бесплодия.

Для проведения такого исследования разработаны разные методологические подходы. Высокой чувствительностью и специфичностью характеризуется иммуноферментный анализ, позволяющий выявить инфекцию и, учитывая количество антител к уреаплазмам, проследить за течением инфекционного процесса. Материалом для анализа служит венозная кровь.

Недостатки метода

Зачастую прогрессирование инфекции сопровождается синтезом иммуноглобулинов в достаточном количестве. Кроме того, антитела после недавно перенесенного заболевания сохраняются в крови, что значительно осложняет дифференциацию нового заболевания от уже вылеченного.

Вследствие этих же причин нет возможности проследить за эффективностью лечения. Считается, что с использованием иммуноферментного метода практически невозможно дифференцировать уреаплазма парвум от уреаплазма уреалитикум.

Микроскопическое исследование

Микроскопию полученного биоматериала (в большинстве случаев выделения) проводят с использованием прямой или непрямой реакции иммунофлюорисцесии. Эти методы относительно дешевые и простые в исполнении, но обладают низкой чувствительностью, вследствие чего их нельзя применять при малом количестве возбудителей в материале.

Заключение

Каждый из перечисленных методов имеет свои преимущества и недостатки, но все они используются врачами для дифференциальной диагностики урогенитальных заболеваний. Достоверные результаты позволяет получить комбинация из нескольких методов.

Кроме методов диагностики и дифференциации возбудителей, при урогенитальных заболеваниях назначают общий анализ крови и мочи, проводят сбор анамнеза и обследование половых органов. Стратегию лечения разрабатывает лечащий врач на основе полученных результатов.

Важную роль в терапии таких заболеваний играет правильный выбор антибиотика, а также функциональное состояние иммунной системы. Как правило, терапия уреаплазменной инфекции включает антибиотики, противогрибковые препараты, иммуномодулирующие средства, витамины. После курса терапии необходимо повторно сдать анализы, чтобы проверить эффективность лечения.

Планиурем беременность. Нужно ли лечить уреаплазму уреалитикум 1*10^6 (копии/мл) В мае 2014 г. обратилась к гинекологу с жалобами на белые выделения и на боли внизу живота. Анализы показали что обнаружены: ДНК уреаплазмы уреалитикум, ВПЧ 16,31,35,33,52,58,18,39,45,59, бак. Посев мазка на м/флору выделен Str гр. В., определена чувствительность. Назначено: ферровир, юнидокс солютаб, тержинан вагинально, эпиген спрей, риофлора иммуно. После лечения сдала анализы в сентябре, обнаружено: ДНК уреаплазмы урелитикум, ВПЧ 16,31,35,33,52,58,18,39,45,59, мазок на флору- лейкоциты в большом кол-ве, флора смешанная обильная. Мазок на онкоцитологию- воспалительный процесс, бак. Посев мазка на уреаплазму- возбудитель обнаружен 10^4 ст. Назначено: индинол, панавир спрей, вильпрофен, метромикон нео вагинально, бион-3. Сдала повторно анализы в конце января результаты показали: ДНК уреаплазма уреалитикум 1*10^6 (копии/мл) и впч 18,39,45,59. Прошла я 2 курса лечения, и уреаплазма с 4 ст. Возрасла в 6 степень. У мужа уреаплазмы не нашли, он лечился от хламидии. Возможно такое что у меня есть уреаплазма а у мужа нет?. НЕ Хочется травить себя опять антибиотиками, вешу 43 кг. Мы планируем беременность. Стоит ли мне снова лечиться? Если все оставить как есть, навредит ли это ребенку? Возможно ли что если я даже вылечусь, во время беременности снова уреаплазма проявит себя? Очень важен ваш совет. Спасибо!