Реакция вассермана - надежно, но не всегда точно. Исследование крови по вассерману Что значит реакция вассермана

Реакция Вассермана (RW) используется уже более 100 лет и доказала свою эффективность в ранней диагностике сифилиса. Эта методика исследования крови достаточно проста, но в то же время очень надежна, что позволяет широко применять ее по всему миру в усовершенствованном виде. Современные активно используемые экспресс-тесты существенно отличаются от классической реакции Вассермана, но в них закладывается основной принцип этой методики, что позволяет часто давать им прежнее название.

Принципиальный подход

По своей сути, реакция Вассермана - это лабораторный анализ кровяной сыворотки, направленный на определение иммунологической реакции организма на проникновение в него возбудителя сифилиса. При заражении сифилисом происходит характерный процесс. Бледная трепонема (Treponema pallidum), содержит антиген кардиолипин. Кровяная сыворотка за счет наличия реагинов вступает в, так называемую, реакцию связывания комплемента (РСК) с образованием специфического комплекса с этим антигеном, т.е. антитела к трепонеме вступают в соединение с трепонемным антигеном.

Принцип реакции Вассермана основан на выявлении указанной реакции. Если человек заражен сифилисом, то в его крови обязательно появляются антитела к бледной трепонеме, что является физиологическим ответом иммунной системы. Для искусственного провоцирования специфической реакции в кровь вводится препарат, содержащий трепонемный антиген (кардиолипин). Одновременно вводится гемолитическая система для проведения реакции гемолиза, а для сорбции комплексов используется комплемент.

В случае когда возбудитель сифилиса уже проник в человеческий организм, начинается РСК, связывающая антитела в крови с введенным антигеном с образованием специфического комплекса. На эту реакцию расходуется весь вводимый антиген и комплемент. Если антител нет в крови пациента, то кардиолипин вступает в реакцию гемолиза с гемолитической системой, которая полностью его нейтрализует. Проводимый лабораторный анализ выявляет комплексы антитело-антиген, которые обнаруживаются визуально. Концентрация комплексов показывает интенсивность их образования и условно оценивается по количеству знаков (плюс): от (+) до (++++). Исследования на RW можно проводить на кровяной сыворотке или спинномозговой жидкости.

Реакционный состав

Для обеспечения RW в кровь исследуемого человека вводится специальная смесь, которая содержит 3 основных ингредиента: антиген, комплемент и гемолитическую систему. Главную реакцию Вассермана обеспечивает антиген, представляющий собой искусственно приготовленный антиген возбудителя. Он может готовиться в 2 вариантах: обработанная ультразвуком культура бледной трепонемы или кардиолипин, получаемый из бычьего сердца. Чаще всего используется второй вариант, когда препарат приготавливается путем тщательной очистки спиртового липидного экстракта, получаемого из мышечных тканей бычьего сердца. Для повышения активности антигена добавляют фосфолипид, лецитин и холестерин. Необходимая доза антигена обеспечивается разведением его в растворе хлорида натрия.

Гемолитическая система соединяет в себе гемолитическую сыворотку (гемолизин) и эритроциты из крови барана. Сыворотку получают из крови кроликов и ослов, а затем ее иммунизируют эритроцитами барана. Эритроциты выделяются из крови барана в возрасте 1-4 года, а забирается она из яремной вены. Комплемент приготавливается из кровяной сыворотки, получаемой из сердца морских свинок. Для проведения RW указанные ингредиенты берутся в равном количестве - по 0,25 или 0,5 мл.

Как проводится анализ крови

Кровь у пациента на анализ берется натощак или через 7-8 часов после приема пищи. Нельзя брать пробы в следующих обстоятельствах: повышенная температура тела, после недавно перенесенной болезни инфекционного характера, во время месячных у женщин, за 12-15 дней до родов у беременных женщин, сразу после родов, в течение суток после приема алкоголя. Не следует брать анализ у новорожденных детей в первые 2 недели жизни.

Кровь для проведения исследований отбирается из локтевой вены в объеме порядка 9-10 мл с соблюдением всех антисептических правил. У младенцев кровь берется путем надреза пятки специальным скальпелем. На проведение реакции проба должна поступить в течение 2 суток после отбора крови и при условии хранения при температуре не выше 3-4ºС.

Из крови пациента приготавливается сыворотка в следующем порядке. Кровь выдерживается при температуре 37ºС в термостате в течение 18-28 минут, а образовавшийся кровяной сгусток отделяется и поступает на центрифугу, где обрабатывается на скорости порядка 1000 об/мин в течение 14-16 минут. После такой процедуры над сгустком появляется прозрачная кровяная сыворотка, которая и забирается для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, то проводится повторное центрифугирование для их отделения. Окончательно выделенная сыворотка проходит инактивацию при 55-57ºС в течение 28-35 минут. Таким образом удаляется натуральный комплемент и нормализуется состояние глобулинов. Полностью подготовленная кровь хранится в холодильнике не более 7 дней.

Определение реакции Вассермана кровяной сыворотки осуществляется в 3 пробирках: во все пробирки наливается сыворотка, разведенная раствором хлорида натрия в пропорции 1:5, а затем в первую пробирку вводится 0,25 мл трепонемного антигена, во вторую - 0,25 мл кардиолипина, а в третью (контрольную) - 0,25 мл раствора хлорида натрия. Затем во все пробы вводится такое же количество комплемента. Необходимо отметить, что смешивание компонентов заранее не производится.

Следующий этап - первичная инкубация в термостате при температуре 36-38ºС в течение 46-55 минут. После тепловой обработки вводится гемолитический состав (по 0,5 мл в каждую пробирку) с перемешиванием путем встряхивания. Далее осуществляется окончательная инкубация в аналогичных условиях до полного завершения операции гемолиза. Внимательно оценивается наличие или отсутствие гемолиза. Оценку результатов реакции проводят путем сравнения с контрольными образцами. Для этой цели используется 2 дополнительные пробирки: в одну помещается кровь, в которой достоверно установлен возбудитель сифилиса, а в другую - кровь абсолютно здорового человека.

Исследование спинномозговой жидкости

Антитела к бледной трепонемы могут располагаться в спинномозговой жидкости, поэтому иногда исследования на реакцию Вассермана проводятся на пробах этой жидкости. Пробы исследуются одновременно в 3 вариантах: неразведенная спинномозговая жидкость, разведенная в соотношении 1:2 с раствором хлорида натрия и разведенная с тем же раствором в пропорции 1:5. Реакцию проводят аналогично с исследованием кровяных проб, т.е. с трепонемным антигеном и кардиолипином. Комплемент вводится по специальным титрам. Сама методика проведения реакции и оценка исследования спинномозговой жидкости не отличается от исследования на кровяной сыворотке.

Как оцениваются результаты

Нормой или отрицательным результатом реакции Вассермана (отсутствие заражения сифилисом) считается протекание реакции гемолиза. В этом случае в крови отсутствуют антитела к сифилитическому возбудителю, а все введенные антигены нейтрализуются гемолитической системой.

Положительный результат, т.е. наличие заражения, оценивается путем сравнительного анализа с контрольными образцами. Степень тяжести болезни или ее стадия обозначается количеством знаков "плюс":

(+) или (1+): небольшая задержка гемолиза;
(++) или (2+): слабо положительная реакция или частичная задержка гемолиза;
(+++) или (3+): положительная реакция или значительная задержка гемолиза;
(++++) или (4+): резко положительная реакция или полное отсутствие гемолиза.

Кроме того, существует такое понятие, как сомнительная реакция, обозначающаяся в виде (+/-). Такая реакция требует перепроверки и уточнения. При проведении оценки реакции Вассермана следует учитывать такой факт: у 4-6% здоровых людей наблюдается ложно положительный результат, а у зараженных людей (до 25%) может наблюдаться ложноотрицательный результат в течение 14-18 суток после инфицирования бледной трепонемой. Ложноотрицательные результаты меняются по мере развития болезни: после 4-6 недель болезни до 26% результатов становятся положительными, а к 8-9 неделе почти все они дают положительную реакцию.

Отрицательный результат в скрытом периоде второй фазы сифилиса не всегда свидетельствует об отсутствии болезни. При рецидиве сифилиса реакция становится положительной. После проведения лечебного курса отрицательный результат указывает только на благоприятную тенденцию, но требует перепроверки. Другая проблема оценки эффективности лечения - появление синдрома, так называемого серорезистентного сифилиса, когда после излечения реакция Вассермана все равно дает отрицательный результат.

Реакция Вассермана в большинстве случаев достаточно четко выявляет заражение сифилисом, однако в ряде случаев отрицательная реакция не дает гарантии отсутствия инфекции, также как и положительный результат может появиться и при отсутствии сифилиса.

В частности, ложноположительная реакция может возникнуть в следующих случаях:

Ложный результат может проявиться даже при употреблении жирной пищи непосредственно перед исследованиями.

Результаты реакции Вассермана нельзя расценивать как истину в последней инстанции. Они, скорее, дают импульс для проведения дополнительных обследований. Для этих целей в настоящее время применяются различные трепонемные тесты. К современным методикам экспресс-диагностики сифилиса относятся усовершенствованные аналоги реакции Вассермана: тест RPR, который дополняется трепонемными тестами РПГА.

Реакция Вассермана сыграла огромную роль в развитии диагностирования сифилиса на ранних стадиях. Однако ее результаты не всегда однозначно оценивают наличие болезни, в связи с чем в настоящее время применяются более совершенные способы, принцип функционирования которых взят из классической реакции Вассермана. Исследования данного типа, в основном, продолжают использоваться при контроле лечебного процесса, но могут применяться и для выявления сифилиса.

Принципиальный подход

Реакционный состав

Как проводится анализ крови

Исследование спинномозговой жидкости

Как оцениваются результаты

(+) или (1+): небольшая задержка гемолиза;
(++) или (2+): слабо положительная реакция или частичная задержка гемолиза;
(+++) или (3+): положительная реакция или значительная задержка гемолиза;
(++++) или (4+): резко положительная реакция или полное отсутствие гемолиза.

Кроме того, существует такое понятие, как сомнительная реакция, обозначающаяся в виде (+/-). Такая реакция требует перепроверки и уточнения. При проведении оценки реакции Вассермана следует учитывать такой факт: у 4-6% здоровых людей наблюдается ложноположительный результат, а у зараженных людей (до 25%) может наблюдаться ложноотрицательный результат в течение 14-18 суток после инфицирования бледной трепонемой. Ложноотрицательные результаты меняются по мере развития болезни: после 4-6 недель болезни до 26% результатов становятся положительными, а к 8-9 неделе почти все они дают положительную реакцию.

Реакция Вассермана в большинстве случаев достаточно четко выявляет заражение сифилисом, однако в ряде случаев отрицательная реакция не дает гарантии отсутствия инфекции, также как и положительный результат может появиться и при отсутствии сифилиса.

В частности, ложноположительная реакция может возникнуть в следующих случаях:

Ложный результат может проявиться даже при употреблении жирной пищи непосредственно перед исследованиями.

Диагностическая реакция Вассермана давно заняла отдельное место в медицинской науке. Ее изобретателем стал немецкий врач Август фон Вассерман, творец, который разработал это широко известное исследование. Данная реакция Вассермана направлена на диагностику и излечение начальной стадии сифилиса, определить которую обычными исследовательскими процессами не так и просто. Большинство пациентов до сих пор не знают об существовании такого медицинского понятия. В данной статье мы раскроем, что же это такое реакция Вассермана, и в какой области медицины она применяется?!

Что такое Реакция Вассермана?

Началом существования реакции Вассермана принято считать 1906 год. Именно в этот период это исследование было применено впервые, и до сегодняшнего дня, постоянно усовершенствовалось. Данное понятие относится к области венерологии, именно эти специалисты используют его в своих медицинских исследованиях. Реакция Вассермана это перечень лабораторных процессов, которые быстро и качественно диагностируют сифилис, определяют возбудитель данного заболевания – бледную трепонему.

Рассмотрим главные факторы, которые вызвали положительную оценку исследования крови на сифилис:

Анализ крови на rw дает возможность полностью подтвердить у пациента наличие такого заболевания, как сифилис;
Конкретные показатели результатов не только подтверждают факт заболевания, но и эффективность его лечения;
Положительный анализ дает врачам возможность четко установить не только факт заражение, но и его точное время.

Практика таких заболеваний показывает, что чем раньше было диагностировано данное заболевание, тем больше шансов на положительные результаты во время лечения. Если кровь на RW показал положительную динамику, значит антитела уже активно вступили в реакцию, а это свидетельствует о наличии сифилиса. Данная болезнь может проявиться у пациентов, которые перенесли тяжелые вирусные заболевания или пневмонию. При этом нарушается нормальное функционирование организма, и риск возникновения сифилиса возрастает.

Процесс проведения анализа

Для того, что бы результаты проводимого исследования были точными, специалисты рекомендуют сдавать кровь на рв натощак. От последнего приема пищи должно пройти минимум 7 часов, в ином случае, про точность результатов не может идти речи. Существует ряд обстоятельств, когда кровь на анализ брать категорически запрещено, а именно:

Когда у пациента наблюдается значительное повышенние температуры тела;
Наличие инфекционного заболевания или его последствий;
Во время критических дней у женщин;
На окончательной стадии беременности, а именно, за две недели до родов и после них;
Если пациент за сутки до забора крови на анализ употреблял спиртные напитки, или другие психотропные и наркотические средства;
У младенцев в первые недели их жизни.

Во время проведения анализа медицинские работники должны придерживаться всех антисептических правил, которые регламентированы медицинским учреждением. Забор крови у взрослых пациентов берется из локтевой вены, в количестве 8-10 мл, не больше. У младенцев совершенно иная процедура. С помощью специального скальпеля на пятке ребенка делают надрез, с которого берут необходимое количество крови. Для детей необходимый объем крови гораздо меньше, чем у взрослых. Дальше отобрана кровь должна помещаться в специальный тубус, с температурой не выше 3-4?С, и в течении двух суток отправлена на лабораторное исследование.

Если анализы были доставлены позже указанного времени, это может повлиять на эффективность и достоверность результатов, и процедуру придется проводить заново.

Проведение лабораторного исследования анализов также имеет четкую структуру. Сначала из отобранной крови делаю специальную сыворотку. При температуре 37?С кровь помещают в термостат примерно на 20 минут. Образовавшийся комок крови обрабатывается на центрифуге до образования прозрачной кровянистой сыворотки, которая и необходима для проведения дальнейших исследований. Если лабораторная диагностика выявила в сыворотке эритроциты, ее повторно отправляют на центрифугу для их отделения. В течение недели готовую кровь нужно хранить в холодильнике.

Для проведения Реакции Вассермана используют три пробирки с уже обработанной сывороткой. Каждую из них частично заполняют кровью, и на 1:5 разводят дополнительными компонентами, нужными для исследования. В первую пробирку добавляют 0,25 мл трепонемного антигена, во второй сыворотку смешивают с 0,25 мл кардиолипина, третью заполняют 0,25 мл раствора хлорида натрия. После проведения данных процедур во все три пробирки добавляют комплемент, в таком же количестве.

Важно! Практика показывает, что заранее смешивать все эти компоненты нельзя, это нарушит дисбаланс и отрицательно скажется на общих результатах.

Следующая процедура – это процесс инкубации готовых пробирок с сывороткой. Их помещают в термостат для дальнейшей тепловой обработки примерно на час. После первой инкубации в каждую пробирку добавляют по 0,5 мл гемолитического состава, и после этого еще раз помещаю в термостат. Анализ на RW практически готов. Для установления окончательных результатов используют две дополнительные пробирки. Первую заполняют кровью с положительным результатом на сифилис, вторую – кровью здорового человека. Результат получает в процессе сравнивания готовых анализов с последними двумя образцами.

Оценка анализов реакции Вассермана

Стоит отметить, что лабораторные исследования могут, как подтвердить наличие болезни, так и показать отрицательные результаты. Степень тяжести болезни в медицине принято обозначать знаками «+». При наличии одного знака реакцию можно считать слабо положительной, но если исследования показали «++++» или «4+», реакция считается резко положительной.

В медицине встречается и такой вид реакции, как сомнительный, на практике обозначается знаком «+/-».

При таких результатах проверку анализов стоит повторить, что бы подтвердить или упростить наличие сифилиса. За все время проведения реакции Вассермана специалисты убедились, что инфицирование бледной трепонемой в первые 18 суток могут показывать не достоверные результаты. Например, у 6% совершенно здоровых людей, реакция может показать ложноположительный результат, так как у 20% зараженных пациентов ложноотрицательный. И только со временем можно определить точный диагноз. В течении 3-4 недель болезнь прогрессирует, и ложноотрицательная реакция быстро перерастает в положительную.

Лечение данного заболевания на сегодня дает довольно-таки положительные результаты. Но иногда встречаются и скрытые заболевания, анализы которых показали отсутствие болезни. И если в таких случаях у врачей возникают какие-либо сомнения, то они еще раз проводят исследование.

После первого комплекса лечебных процедур у пациента берут новый забор крови на реакцию. Его положительная динамика свидетельствует о правильном лечении и скором выздоравливании. Но есть случаи, когда процесс лечения все равно приводит к отрицательной реакции. Этот синдром принято называть серорезистентным сифилисом. Тогда специалисты ищут новые, более эффективные методы лечения, которые покажут в результате положительную и благоприятную динамику.

Практиковавшаяся в медицине более столетия, диагностическая реакция Вассермана – одно из широко известных исследований. Разработанная немецким врачом Августом фон Вассерманом для облегчения диагностики начальных и неактивных форм сифилиса, эта иммунологическая реакция сразу вошла в круг лечебной деятельности и доказала свою пользу.

Что вызвало такую однозначно позитивную оценку применению исследования пробы крови пациента для диагностики ?

Появившаяся у врачей возможность подтверждения диагноза сифилиса посредством простого анализа крови на RW (реакцию Вассермана).
Результаты проводимого лечения и его эффективность стало можно контролировать с помощью конкретного показателя.
По положительной реакции Вассермана доказательно удавалось установить не только сам факт заражения, но и ориентировочно – время момента заражения.

Анализ крови на реакцию Вассермана

Со временем выявилось много недостатков популярного исследования крови. Если отрицательная реакция Вассермана обычно была достаточно достоверной, то положительный результат часто мог быть вызван другими причинами. При этом число возможных оснований для ошибочного позитивного результата со временем неуклонно увеличивалось.

Положительная реакция отмечалась при некоторых заболеваниях (малярия, туберкулез, системная , лептоспироз, проказа, болезни крови). И даже после прививки или острой вирусной инфекции.

В СССР со второй половины пятидесятых годов прошлого века классическая реакция Вассермана всегда дублировалась проведением дополнительно еще двух обязательных исследований – реакцией Кана и цитохолевой реакцией.

В настоящее время классическая реакция Вассермана не используется. Но, по устоявшейся привычке, врачи часто называют так любую реакцию диагностического исследования крови на сифилис.

Необходимо это исследование для того, чтобы подтвердить наличие или отсутствие у человека такого заболевания, как сифилис.

Реакция по Вассерману, что это?

Анализ крови на реакцию Вассермана основан на способности трепонемы, которая является возбудителем сифилиса, вырабатывать антиген кардиолипин. В ответ на его появление в крови иммунная система человека производит антитела, которые связываются с этим антигеном и образуют прочный комплекс.

Если же антитела в крови не образовались, то кардиолипин связывается с эритроцитами и вызывает их разрушение – гемолиз.

Критерием оценки служат титры анализа крови на реакцию Вассермана . Упрощенно, титр – это способ выражения концентрации антител и антигенов, при которой происходит значимая или полная задержка гемолиза. Если сифилис есть, то титр начинает возрастать примерно на четвертой неделе после заражения и достигает своего максимума во вторичном периоде болезни.

А вот в третичном, наоборот, уменьшается.

Говорить о наличии болезни можно, если титры антител в анализе находятся в пределах от 1:2 до 1:800. При этом значение имеет максимальный показатель разведения, при котором еще сохраняется резко положительная реакция.

Зачем сдавать кровь на реакцию Вассермана?

Исследование может проводиться не только при подозрении на сифилис. В обязательном порядке сдают кровь на реакцию Вассермана при беременности . Причем трижды: когда становятся на учет, на сроке в тридцать недель и перед родами.

Также это исследование назначают:

При поступлении в больницу и перед операциями.
При устройстве на работу, например, в кафе, рестораны, детские учреждения или магазины.
Донорам, сдающим сперму или кровь.
При обнаружении других заболеваний, которые передаются половым путем, например, хламидиоза или трихомоноза.
При болях в суставах, появлении безболезненных язвочек, длительном, более одного месяца, повышении температуры и при увеличении регионарных лимфатических узлов.

Анализ крови на реакцию Вассермана, как сдавать?

Никаких особых приготовлений этот анализ от вас не потребует. Однако, чтобы максимально снизить риск ошибочных результатов лучше соблюдать несложные правила.

Если вам предстоит сдать кровь на реакцию Вассермана , то:

За три дня до исследования откажитесь от лекарств.
Если же это невозможно, обязательно скажите врачу, какие препараты принимаете.
За 12 часов откажитесь от кофе, крепкого чая и алкоголя.
Откажитесь от еды за 8 часов до анализа. Лучше кровь на реакцию Вассермана сдавать натощак , так как жирная, белковая пища способна исказить результаты.
Как минимум за один час до посещения лаборатории откажитесь от сигарет. Не забудьте сообщить врачу о том, есть ли у вас хронические заболевания, такие, например, как сахарный диабет.

Если вы планируете сдать анализ крови на реакцию Вассермана , то цена будет определяться тем, в каком регионе и учреждении вы решили это сделать. В государственных клиниках это возможно сделать бесплатно. В частных стоимость способна колебаться от 300 до 1000 рублей.

Какие могут быть результаты исследования?

В норме анализ крови должен давать отрицательный результат, который означает, что сифилиса нет.