Informações gerais sobre o estudo

O vírus da hepatite C (HCV) é um vírus RNA da família Flaviviridae que infecta as células do fígado e causa hepatite. É capaz de se multiplicar nas células sanguíneas (neutrófilos, monócitos e macrófagos, linfócitos B) e está associado ao desenvolvimento de crioglobulinemia, doença de Sjogren e doenças linfoproliferativas de células B. Dentre todos os agentes causadores das hepatites virais, o HCV apresenta o maior número de variações e, devido à sua alta atividade mutacional, é capaz de escapar dos mecanismos de proteção do sistema imunológico humano. Existem 6 genótipos e muitos subtipos do vírus, que têm diferentes implicações para o prognóstico da doença e a eficácia da terapia antiviral.

A principal via de transmissão da infecção é através do sangue (durante a transfusão de sangue e elementos plasmáticos, transplante de órgãos de doadores, através de seringas não estéreis, agulhas, instrumentos para tatuagem, piercing). A transmissão do vírus através do contato sexual e de mãe para filho durante o parto é possível, mas ocorre com menos frequência.

A hepatite viral aguda é geralmente assintomática e permanece indetectada na maioria dos casos. Em apenas 15% dos infectados, a doença é aguda, com náuseas, dores no corpo, falta de apetite e perda de peso, e raramente é acompanhada de icterícia. 60-85% das pessoas infectadas desenvolvem uma infecção crónica, que é 15 vezes superior à frequência de cronicidade com hepatite B. A hepatite C viral crónica é caracterizada por “ondulação” com aumento das enzimas hepáticas e sintomas ligeiros. Em 20-30% dos pacientes, a doença leva à cirrose hepática, aumentando o risco de desenvolver insuficiência hepática e carcinoma hepatocelular.

Imunoglobulinas específicas são produzidas para o núcleo do vírus (proteína central do nucleocapsídeo), o envelope do vírus (nucleoproteínas E1-E2) e fragmentos do genoma do vírus da hepatite C (proteínas não estruturais NS). Na maioria dos pacientes com HCV, os primeiros anticorpos aparecem 1-3 meses após a infecção, mas às vezes podem estar ausentes do sangue por mais de um ano. Em 5% dos casos, os anticorpos contra o vírus nunca são detectados. Neste caso, o HCV será indicado pela detecção de anticorpos totais contra antígenos do vírus da hepatite C.

Durante o período agudo da doença, anticorpos das classes IgM e IgG são formados contra o núcleo da proteína do nucleocapsídeo. Durante o curso latente da infecção e durante sua reativação, anticorpos IgG para as proteínas não estruturais NS e a proteína central do nucleocapsídeo estão presentes no sangue.

Após uma infecção, imunoglobulinas específicas circulam no sangue por 8 a 10 anos com diminuição gradual da concentração ou permanecem por toda a vida em títulos muito baixos. Eles não protegem contra infecções virais e não reduzem o risco de reinfecção e desenvolvimento da doença.

Para que serve a pesquisa?

• Para o diagnóstico de hepatite viral C.
• Para diagnóstico diferencial de hepatite.
• Para detectar hepatite viral C prévia.

Quando é agendado o estudo?

• Para sintomas de hepatite viral e aumento dos níveis de transaminases hepáticas.
• Se se sabe que você teve hepatite de etiologia não especificada.
• Ao examinar pessoas em risco de infecção por hepatite viral C.
• Durante os exames de triagem.

Descrição

Método de determinação Imunoensaio quimioluminescente

Material em estudo Soro sanguíneo

Visita domiciliar disponível

Indicador que caracteriza a presença de anticorpos (independentemente das classes M e G) contra o vírus da hepatite C.

Atenção. Em caso de reações positivas e questionáveis, o prazo para emissão de resultados pode ser estendido para 3 dias úteis.

Os anticorpos da classe M começam a ser produzidos 4 a 6 semanas após a infecção, sua concentração atinge rapidamente o máximo. Após 5 a 6 meses, o nível de IgM cai e sobe novamente durante a próxima reativação da infecção. Os anticorpos da classe G aparecem 11 a 12 semanas após a infecção, atingem seu pico de concentração em 5 a 6 meses e permanecem no sangue em um nível mais ou menos constante durante todo o período da doença e convalescença. Assim, o nível total de anticorpos (total) é determinado 4 a 5 semanas após a infecção e além.

Características da infecção. A hepatite C é uma doença viral caracterizada por lesões hepáticas e doenças autoimunes, muitas vezes com curso primário crônico e latente. Ocorre nas formas ictérica (5%) ou anictérica (95%). O vírus da hepatite C (HCV) é um flavivírus e é bastante estável no ambiente externo. As três proteínas estruturais do vírus possuem propriedades antigênicas semelhantes, causando a produção do núcleo anti-HCV. Atualmente, 6 genótipos do vírus foram identificados. O alto grau de variabilidade genética do HCV contribui para a “evasão” do vírus da resposta imune. Isto está associado às dificuldades na criação de uma vacina e no diagnóstico laboratorial (hepatite C soronegativa), bem como ao frequente curso crônico primário da doença. A hepatite C é transmitida através do sangue e fluidos biológicos por via parenteral, sexual e transplacentária. O grupo de alto risco inclui pessoas que praticam dependência de drogas intravenosas, sexo promíscuo, bem como profissionais da área médica, pacientes que necessitam de hemodiálise ou transfusões de sangue e presos. Penetrando no corpo, o HCV entra nos macrófagos do sangue e nos hepatócitos do fígado, onde ocorre sua replicação. O dano hepático ocorre principalmente devido à lise imunológica, e o vírus também tem efeito citopático direto. A semelhança do antígeno do vírus com os antígenos do sistema de histocompatibilidade humano determina a ocorrência de reações autoimunes (“sistêmicas”). No programa de manifestações sistêmicas da infecção pelo HCV, podem ocorrer tireoidite autoimune, síndrome de Sjögren, púrpura trombocitopênica idiopática, glomerulonefrite, artrite reumatóide, etc.. Em comparação com outras hepatites virais, a hepatite C tem um quadro clínico menos claro e mais frequentemente torna-se crônica. Em 20 a 50% dos casos, a hepatite C crônica leva ao desenvolvimento de cirrose hepática e em 1,25 a 2,50% - ao desenvolvimento de carcinoma hepatocelular. Complicações autoimunes ocorrem com alta frequência. O período de incubação é de 5 a 20 dias. No final do período de incubação, os níveis de transaminases hepáticas aumentam e o fígado e o baço podem aumentar de tamanho. O período agudo ocorre com fraqueza e perda de apetite. Em um terço dos casos ocorrem febre, artralgia e erupção cutânea polimórfica. Sintomas dispépticos e polineuropatia são possíveis. A colestase ocorre extremamente raramente (5% dos casos). Os parâmetros laboratoriais refletem a citólise. Se o nível de transaminases estiver elevado (mais de 5 normas) e houver sinais de insuficiência celular hepática, deve-se suspeitar de infecção mista: HCV + HBV.

Preparação

Não é necessária nenhuma preparação especial. Recomenda-se que a coleta de sangue não seja feita antes de 4 horas após a última refeição. Podem ser encontradas recomendações gerais para a preparação para a pesquisa. É aconselhável realizar o estudo no máximo 6 semanas a partir do momento da suspeita de infecção. Durante um exame anônimo, um pedido e uma amostra de biomaterial recebida do cliente, é atribuído um número que é conhecido apenas pelo paciente e pela equipe médica que fez o pedido. ! Os resultados de estudos realizados de forma anônima não podem ser submetidos a internação, exames profissionais e não estão sujeitos a registro no ORUIB.

Indicações de uso

Níveis aumentados de ALT e AST.

Preparação para cirurgia.

Manipulações parenterais.

Preparando-se para a gravidez.

Sinais clínicos de hepatite viral.

Relações sexuais desprotegidas, mudança frequente de parceiros sexuais.

Dependência de drogas intravenosas.

Colestase.

interpretação de resultados

A interpretação dos resultados da pesquisa contém informações para o médico assistente e não é um diagnóstico. As informações nesta seção não devem ser usadas para autodiagnóstico ou autotratamento. O médico faz um diagnóstico preciso usando tanto os resultados deste exame quanto as informações necessárias de outras fontes: histórico médico, resultados de outros exames, etc.

Unidades de medida no laboratório INVITRO: o teste de anticorpos contra HCV é qualitativo.

Se forem detectados anticorpos anti-HCV, o teste é repetido usando um método diferente. Se o resultado for repetidamente positivo, a resposta é HCV - “positivo”, HCV (confirmando) - “positivo”.

Na ausência de anticorpos anti-HCV, a resposta é “negativa”. Resultado positivo:

1. hepatite C ou convalescença após hepatite C. É impossível distinguir entre hepatite aguda e crônica, bem como hepatite e convalescença.

Resultado negativo:

1. hepatite C não foi detectada;
2. as primeiras 4 a 6 semanas do período de incubação da hepatite C;
3. hepatite C, variante soronegativa.

• informações sobre resultados positivos de testes sorológicos para marcadores de hepatite viral parenteral (testes nº 73, nº 79) são transmitidas pelo laboratório INVITRO LLC (Moscou) ao Departamento de Contabilidade e Registro de Doenças Infecciosas da Vigilância Sanitária e Epidemiológica do Estado Centro em Moscou. ORUIB TsGSEN em Moscou somente quando identificados em determinado contingente, por sua vez, leva informações à instituição médica que presta atendimento ambulatorial no local de cadastramento do paciente;
• informações sobre resultados positivos de testes sorológicos para marcadores de hepatite viral parenteral (testes nº 73, nº 79) realizados em laboratórios regionais da rede INVITRO (São Petersburgo, Novosibirsk, Chelyabinsk, Samara) são enviadas para ORUIBs locais.

Durante um exame anônimo, um pedido e uma amostra de biomaterial recebida do cliente, é atribuído um número que é conhecido apenas pelo paciente e pela equipe médica que fez o pedido. ! Os resultados de estudos realizados de forma anônima não podem ser submetidos a internação, exames profissionais e não estão sujeitos a registro no ORUIB.

O Anti-HCV é um teste para hepatite C prescrito por um médico no processo de diagnóstico de uma infecção viral. O teste é baseado nas características da resposta do sistema imunológico humano quando um patógeno entra nas células. Nesse caso, substâncias biologicamente ativas - imunoglobulinas (geralmente abreviadas como Ig na literatura médica) são liberadas no sangue.

Os anticorpos produzidos são específicos, ou seja, sua estrutura é claramente pré-determinada dependendo do tipo de patógeno. Esta é a base do princípio do imunoensaio enzimático sorológico, denominado teste ELISA anti-HCV.

A estrutura e o conteúdo das imunoglobulinas sintetizadas dependem diretamente das unidades estruturais do vírion da hepatite C. O HCV (vírus da hepatite C) é um patógeno de formato redondo, cujo diâmetro não excede 50 nm. No meio há uma fita de RNA, coberta por um capsídeo (proteína central). Externamente, é circundado por uma concha cuja base são os lipídios, e as inclusões das glicoproteínas E1 e E2 parecem saliências.

A estrutura do genoma do vírus pode ser representada como um diagrama:

A análise moderna do HCV baseia-se na identificação de vários marcadores de infecção. Estes são o RNA do vírus, o antígeno central e os anticorpos específicos. É o RNA do HCV (hepatite viral C) que é detectado no soro sanguíneo antes dos outros. O segundo indicador mais importante é o antígeno central. Pode ser detectado uma semana após o aparecimento do RNA em quantidades suficientes para identificação pelos sistemas de teste.

A sensibilidade do teste do antígeno do vírus da hepatite C depende do mecanismo de teste. Com a detecção quimioluminescente é significativamente maior (até 0,06 pg/ml) do que com a reação imunoenzimática clássica usando oxidação do cromogênio com peroxidase. Porém, quanto maior a sensibilidade da análise, mais caro será o sistema de teste.

O nível de RNA viral no sangue está intimamente relacionado à concentração do antígeno central. Assim, alguns métodos permitem determinar a carga viral aproximada levando em consideração o coeficiente de correlação.

Anticorpos específicos para o vírus da hepatite C são determinados usando imunoensaio enzimático de triagem e sistemas de teste de imunotransferência. Estes últimos são caracterizados por maior especificidade.

O tempo aproximado para o aparecimento do RNA do vírus, antígeno e vários tipos de imunoglobulinas é dado na tabela:

A maioria dos sistemas de teste utilizados atualmente foram desenvolvidos no início da década de 1990. Caso seja necessário diagnosticar o vírus, são utilizados antígenos obtidos de amostras de isolados da década de 1990 correspondentes ao genótipo 1a do HCV. Já existe informação sobre a ausência de anticorpos contra o antígeno central, um dos antígenos mais imunogênicos do HCV, em alguns pacientes. Isto está associado ao aparecimento de certas mutações. Portanto, para excluir resultados questionáveis, você deve entrar em contato com laboratórios que trabalham com sistemas de teste modernos (fabricados pela Abbott, Bayer, etc.).

Anti-HCV: o que é esse teste?

Existem vários tipos de testes diagnósticos para hepatite C, que são realizados por meio de um imunoensaio enzimático sorológico.

Cada um deles fornece ao especialista determinadas informações. Esse:

• suspeita da presença da doença;
• forma de infecção viral;
• período a partir do momento da infecção;
• a reação do sistema imunológico à penetração de um patógeno na corrente sanguínea;
• a condição do paciente após tomar medicamentos ou com base nos resultados da recuperação independente após a fase aguda da doença.

Descrição do teste de anticorpos totais

O estudo começa com o teste Anti-HCV Total, desenvolvido para determinar anticorpos totais (IgG + IgM). A realização de outros testes é aconselhável se o anti-HCV for positivo: o que isso significa só pode ser determinado por um médico. O fato é que alguns pacientes apresentam resultado falso positivo, o que requer exames complementares.

Teste de anticorpos para as principais proteínas estruturais do HCV

O exame de sangue mais indicativo é para core-Ag. As imunoglobulinas para esta subunidade estrutural aparecem mais cedo do que outras e servem como um marcador laboratorial específico de infecção. Mas, ao mesmo tempo, se a AT não for detectada, isso não exclui a infecção. Um resultado negativo pode ser devido a uma mutação no próprio VHC ou às características individuais do paciente.

A triagem adicional para hepatite C inclui um exame de sangue anti-HCV para determinar o espectro de diferentes tipos de imunoglobulinas. Assim, a detecção de anticorpos da classe IgM indica um curso agudo de infecção, enquanto o IgG anti-HCV fala a favor de uma forma crônica ou latente da doença viral. Mas os resultados devem ser interpretados por um especialista que explicará que tipo de análise é e dará recomendações para exames e tratamentos adicionais.

Precisão

A precisão do imunoensaio enzimático depende do fabricante dos sistemas de teste diagnóstico. O profissionalismo da equipe médica também desempenha um papel importante. A especificidade e confiabilidade desse estudo chegam a 90%. Portanto, um teste positivo para hepatite C realizado pelo método sorológico serve claramente como indicação para diagnóstico adicional.

Mas antes de doar sangue para HbsAg HCV ou outros ELISAs, é necessário perguntar em qual equipamento a análise será utilizada. Se você tiver alguma dúvida, é melhor consultar um médico. A qualidade da pesquisa realizada determina completamente as táticas para diagnósticos adicionais.

Método de teste para hepatite C

O imunoensaio enzimático para hepatite C é classificado como método de pesquisa sorológica.

Os sistemas de teste utilizados para realizar ELISA são divididos em vários grupos dependendo dos tipos de anticorpos utilizados:

• lisado, durante o estudo são utilizados anticorpos nativos obtidos da cultura;
• recombinante, utilizar estruturas proteicas sintetizadas por engenharia genética, semelhantes em estrutura ao antígeno em estudo;
• peptídeo, são utilizados peptídeos sintetizados artificialmente.

Como fase sólida, geralmente são utilizadas placas de 96 poços, menos frequentemente esferas de poliestireno. O ELISA é catalisado por uma série de enzimas específicas biologicamente ativas.

O imunoensaio enzimático é realizado em várias etapas:

1. A amostra de teste é reconhecida pelo anticorpo. O resultado é determinado pelo número de complexos imunes formados ou pelos sítios livres de ligação específica restantes.
2. Formação de um composto marcado com enzima.
3. Transformação de um rótulo enzimático em um sinal específico, que é registrado por qualquer método físico-químico (espectrofotometria, fluorimetria, luminescência, etc.).

Existem os seguintes tipos de imunoensaios enzimáticos realizados para diagnosticar o vírus da hepatite C:

• método "sanduíche";
• ELISA indireto;
• método ELISA competitivo;
• ELISA inibitório;
• ELISA direto.

O paciente deve primeiro obter encaminhamento de um médico. Você pode fazer o teste em um laboratório privado sem os documentos apropriados. Imediatamente antes do teste, a enfermeira registra os dados do paciente e rotula os tubos de acordo.

O sangue é retirado de uma veia. A pele é tratada primeiro com um guardanapo estéril com solução desinfetante. Após o procedimento, a ferida é selada com gesso descartável. O tempo da reação do imunoensaio enzimático varia de 1 a 5 dias. O resultado pode ser coletado diretamente no laboratório, ou recebido eletronicamente por e-mail ou por meio de código no site.

Indicações para ELISA

É necessário consultar um médico e posteriormente doar sangue para anticorpos totais contra hepatite C caso ocorram sinais específicos de infecção.

A patologia pode ser suspeitada com base nos seguintes sintomas:

• sensação de fadiga quase interminável;
• distúrbios do sono (geralmente à noite a pessoa sofre de insônia e durante o dia - de sonolência);
• diminuição da concentração, diminuição da acuidade mental;
• diminuição do apetite;
• sensação desagradável de plenitude, peso e desconforto no hipocôndrio direito;
• distúrbios digestivos acompanhados de flatulência, distúrbios fecais, azia, arrotos, gosto desagradável na boca;
• amarelecimento (frequentemente, leve e de passagem rápida) da pele, parte branca dos olhos.

Mas em mais da metade dos infectados, a infecção viral ocorre sem quadro clínico pronunciado, e os sintomas que surgem podem ser facilmente confundidos com infecção viral respiratória aguda ou excesso de trabalho banal. É por isso que a hepatite C é frequentemente descoberta involuntariamente durante a preparação para o exame clínico.

As indicações estritas para doação de sangue para análise são:

• sintomas característicos de disfunção hepática;
• mal-estar geral;
• desvios da norma na interpretação dos resultados dos exames hepáticos;
• contato com pessoa com diagnóstico confirmado de hepatite C (relação sexual, contato com sangue ou mucosas, etc.);
• presença de HIV;
• transfusão de sangue ou transplante de órgãos realizados antes de 1992;
• procedimentos regulares de hemodiálise;
• doenças que requerem procedimentos médicos invasivos frequentes;
• em crianças nascidas de mães infectadas pelo VHC;
• registro de prontuário médico de militares, trabalhadores da área de comércio, saúde, educação, cosmetologia, farmácia.

ELISA é obrigatório durante a gravidez. O estudo é realizado em 12 e 30 semanas.

Não se esqueça de um conceito como “janela sorológica”. Este termo refere-se ao período que decorre desde o momento da infecção até ao momento em que o vírus é detectado, ou mais precisamente, os anticorpos produzidos contra os seus antigénios.

ELISA repetido é prescrito quando:

• resultados incertos da primeira análise;
• em terapia antiviral (para controlar o título de anticorpos);
• Anti-HCV Total negativo, mas persistem sintomas de hepatite viral.

Segundo especialistas, quase todos os visitantes de um consultório odontológico ou de cosmetologia correm risco de infecção. Portanto, para efeito de prevenção, recomenda-se que o Anti HCV Total (determinação de anticorpos totais por ELISA) seja tomado anualmente.

Como preparar

A confiabilidade dos resultados da análise obtidos depende em grande parte do correto preparo do paciente. As recomendações de especialistas incluem:

• não coma 12 a 14 horas antes de doar sangue;
• pare de fumar 3-4 horas antes do teste;
• doe sangue pela manhã;
• depois de acordar, você não deve beber nada, exceto água sem gás;
• 3-4 dias antes do teste, exclua alimentos gordurosos, frituras preparadas com muito óleo, molhos “pesados” (maionese, tártaro, etc., principalmente os comprados em loja), fast food (incluindo salgadinhos e aperitivos), salsichas , carnes defumadas, secas, peixes secos e/ou carnes, em geral, o cardápio antes da análise deve ser elaborado conforme dieta nº 5;
• 7 a 10 dias antes do ELISA, as bebidas alcoólicas (independentemente da concentração) são estritamente contra-indicadas.

Em geral, antes de doar sangue, é necessário aderir aos princípios da alimentação racional e, se possível, abandonar os maus hábitos.

Ao entrar em contato com um médico com resultados de exames, você deve informar sobre todos os medicamentos em uso, possíveis violações das regras de preparação para o estudo e doenças concomitantes. Você também deve falar sobre sintomas perturbadores, mesmo que, à primeira vista, não estejam relacionados a danos no fígado.

Decodificando os resultados obtidos

A interpretação anti-HCV deve ser realizada por um especialista especializado (infeccioso ou hepatologista). Normalmente, não deve haver anticorpos contra a hepatite C no corpo humano.

No entanto, um resultado falso negativo é possível se:

• período da “janela sorológica”;
• imunodeficiência concomitante (com danos virais ao sistema imunológico, a produção de anticorpos é interrompida);
• lesões oncológicas do sistema hematopoiético.

Às vezes, um resultado falso positivo do HCV AgAt ELISA é observado quando:

• gravidez (devido à produção de compostos proteicos específicos semelhantes em estrutura às imunoglobulinas);
• patologias autoimunes (nessas doenças, a produção de anticorpos é imprevisível);
• distúrbios do sistema hematopoiético;
• recuperação da fase aguda da hepatite C (em algumas pessoas, o vírus é destruído pelo sistema imunológico sem terapia medicamentosa);
• terapia antiviral anterior (as imunoglobulinas podem durar até 3-5 anos ou mais);
• em uma criança com menos de 3 anos de idade ao nascer após gravidez de mãe infectada ou tratada;
• infecções graves concomitantes (independentemente de sua etiologia), caso em que resultados errôneos são possíveis devido à liberação maciça de anticorpos em resposta a danos teciduais virais ou bacterianos.

A interpretação dos resultados do imunoensaio enzimático pode ser apresentada em forma de tabela:

Se forem detectadas imunoglobulinas, seu título (concentração) deve ser indicado no formulário de resultados do teste. Desta forma, o médico pode avaliar a intensidade do processo patológico e avaliar a resposta imunológica. Mas informações precisas sobre o conteúdo quantitativo do vírus no corpo humano só podem ser obtidas pela detecção de RNA usando o método da reação em cadeia da polimerase.

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