Detentores da patente RU 2515051:

A invenção refere-se ao campo da biotecnologia e da medicina. Um sistema de teste imunoabsorvente ligado a enzima para determinar o momento provável da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo HIV-1 grupo O, em soro sanguíneo humano (plasma). O sistema de teste inclui um imunoabsorvente baseado em antígenos do vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1 e HIV-1 grupo O env), uma solução de diluição de amostra (SRS) e reagentes de detecção (conjugados, cromogênio/substrato). A invenção também se refere a um método para determinar o momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo HIV-1 grupo O, em soro sanguíneo humano (plasma), examinando o soro sanguíneo do paciente usando a enzima descrita sistema de teste imunoabsorvente ligado. A invenção torna possível determinar de forma rápida e fácil o momento provável da infecção pelo HIV. 2 n.p. arquivos, 4 mesas, 2 pr.

A INVENÇÃO refere-se ao campo da biotecnologia e da medicina. E pode ser usado para determinar o momento provável da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo o HIV-1 grupo O, no soro humano (plasma).

A propagação da infecção pelo VIH continua a ser um problema real no mundo moderno. Dado que o diagnóstico atempado e de alta qualidade é um meio real de reduzir a propagação da infecção pelo VIH, o desenvolvimento de um sistema de testes eficaz, capaz de determinar a duração provável da infecção, é uma tarefa importante da sociedade moderna.

Uma análise do estado da técnica mostrou a existência de uma série de métodos e testes propostos por diferentes autores para determinar os estágios da infecção pelo HIV utilizando vários métodos. Por exemplo, é conhecido um teste genético molecular baseado na determinação da carga viral do sangue periférico usando o método de reação em cadeia da polimerase (PCR) (Kravchenko A.V., Serebrovskaya L.V., Golokhvostova E.L. et al. Timazid em combinação com chivid e invirase em terapia complexa de pacientes com infecção por HIV. - Epidemiologia e doenças infecciosas. - 1998. - No. 5 - p. 51-52). Existe um método conhecido para avaliar os estágios da infecção pelo HIV (Clinical Immunology and Allergology, editado por G. Lawlor Jr. - M.: Praktika, 2000. - P. 585-587), que consiste em determinar o nível de β sérico 2 -microglobulina. É descrito um método para diagnosticar os estágios da infecção pelo HIV (V.V. Pokrovsky et al. “Diagnóstico clínico e tratamento da infecção pelo HIV.” - M.: GOU VUNMC RF, 2001. - P. 11), que consiste em determinar o número absoluto de linfócitos CD4+ no sangue periférico. Também existe um método conhecido para diagnosticar os estágios da infecção pelo HIV, baseado no fato de que ao examinar o soro sanguíneo de um paciente por meio de um ensaio imunoenzimático (ELISA), a densidade óptica (DO) da amostra original de soro sanguíneo é determinada , refletindo o nível de anticorpos específicos do HIV e a DO da amostra de soro original incubada por 10 minutos com 100 μl de solução de isotiocianato de sódio 3,5 M. Quando a OP diminui em 40% ou menos, diagnostica-se o estágio A - linfadenopatia generalizada; quando a OP diminui na faixa de 40-60% - estágio B - angiomatose bacilar, candidíase orofaríngea, etc., e quando a OP diminui em 60 % ou mais - estágio C - AIDS (RU 2251701).

Assim, a análise do estado da técnica mostrou que nenhuma das fontes existentes pode servir como o análogo mais próximo da invenção reivindicada, uma vez que todos estes documentos referem-se a métodos e testes que determinam o estágio da infecção pelo HIV, e nenhum dos fontes descritas contém decisões técnicas destinadas a determinar o provável intervalo de tempo de infecção. A invenção reivindicada refere-se a um sistema de teste que determina a duração provável da infecção pelo HIV. A análise do nível de tecnologia não revelou soluções semelhantes destinadas a resolver o problema.

A presente invenção reivindica um conjunto de reagentes “DS-ELISA-HIV-AT-SROC” para determinar o momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo HIV-1 grupo O, em soro sanguíneo humano ( plasma). O teste destina-se a testes adicionais de amostras HIV positivas com resultado positivo confirmado no imunoblot. É possível estudar amostras com resultado de teste de imunoblot indeterminado ou negativo, em que é confirmada a presença de RNA do HIV e/ou antígeno p24 do HIV-1.

A presente invenção também reivindica um método para utilização deste conjunto de reagentes “DS-ELISA-HIV-AT-SROC” para determinar o momento provável da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo HIV-1 grupo O, no soro (plasma) do sangue humano.

O resultado técnico da invenção reivindicada é a determinação do momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo o HIV-1 grupo O, a facilidade de realização do teste, que permite a utilização da invenção reivindicada para a vigilância epidemiológica da dinâmica de propagação da infecção pelo HIV, a dinâmica de identificação de soroconversores em uma determinada população (sexo, idade, grupos sociais da população), bem como durante a investigação epidemiológica de casos e focos de infecção pelo HIV.

A essência da solução técnica proposta é que a determinação do período provável de infecção pelo HIV-1 seja realizada por meio de um sistema de teste, que inclui um imunossorvente baseado em antígenos do vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1 env e grupo HIV-1 O), amostras de solução de diluição (SRS) e reagentes de detecção (conjugados, cromogênio/substrato). As amostras de teste são testadas nativamente e diluídas em uma solução de diluição de amostra. Com base nos resultados dos testes, as amostras são divididas em “iniciais” e “tardias”. Amostras “precoces” - o período provável de infecção é de até 9 meses a partir do momento da infecção, amostras “tardias” - o período provável de infecção é de 9 ou mais meses a partir do momento da infecção. Se uma amostra pertence a “precoce” ou “tardia” é avaliado pela queda percentual na densidade óptica (OD) da amostra diluída em relação à não diluída.

Estes exemplos servem para ilustrar modalidades específicas da invenção e não se destinam a limitar os direitos do requerente. O âmbito dos direitos do requerente abrange todas as variantes possíveis da invenção, incluindo aquelas não listadas nesta seção.

Como imunossorventes, são usados ​​​​antígenos recombinantes contendo regiões env imunodominantes de HIV-1 e HIV-1 grupo O. O conjugado-1 é uma mistura de antígenos recombinantes gp41 de HIV-1 e gp41 de HIV-1 grupo O conjugados com biotina. Na primeira etapa, as amostras teste, amostras controle e suas diluições de 1:101, bem como RRS, são incubadas com o conjugado-1. Anticorpos específicos presentes nas amostras positivas de teste e controle ligam-se aos antígenos sorvidos nos poços da microplaca e aos antígenos conjugados com biotina e formam complexos estáveis. O excesso de amostras e o conjugado-1 são removidos por lavagem. Na etapa seguinte, estreptavidina conjugada com peroxidase de rábano (conjugado-2) é adicionada aos poços. O conjugado-2 se liga ao complexo antígeno-anticorpo-antígeno presente no poço. O excesso de conjugado-2 é removido por lavagem e depois adiciona-se cromogénio/substrato aos poços. Nos poços com conjugado-2 ligado, desenvolve-se uma cor azul, que muda para amarelo quando é adicionada uma solução de paragem. Os resultados são registrados usando um espectrofotômetro.

Como imunoabsorvente, são usados ​​​​antígenos recombinantes contendo regiões env imunodominantes do HIV-1 e HIV-1 grupo O. Um conjugado é usado - uma mistura de antígenos recombinantes gp41 HIV-1 e gp41 HIV-1 grupo O, conjugados com peroxidase de rábano. Durante a análise, amostras, controles e suas diluições, bem como RRS são incubados com o conjugado em poços da placa revestidos com antígeno. O complexo estável resultante após remoção do excesso de amostra e conjugado é revelado pela adição de cromogênio/substrato. Neste caso, desenvolve-se uma cor azul, que muda para amarelo quando a solução stop é adicionada. Os resultados são registrados usando um espectrofotômetro.

Se as amostras estudadas pertencem a “precoces” ou “tardias” é avaliado pela % de queda na DO ao diluir a amostra, que é calculada usando a fórmula:

%   queda   O P = 100% − O P   reconhecimento da amostra − O P s r. R R S O P   AMOSTRA INTEIRA × 100% ,

onde OPsr. RRS - valor médio do OP RRS (calculado com base em diversos valores do OP RRS).

As amostras em estudo são consideradas “precoces”: se a queda da DO for >40%.

As amostras em estudo são consideradas “tardias”: se a queda da DO for ≤40%.

Um exemplo de cálculo da queda percentual na DO ao diluir uma amostra é dado na Tabela 1.

É conveniente usar o Excel para registrar e processar os resultados. O uso deste aplicativo permitirá que você execute cálculos automaticamente. O programa para processamento dos resultados dos testes está localizado no disco que acompanha o kit ou pode ser encontrado no site da empresa.

Ao desenvolver e avaliar o teste, foram utilizadas amostras de painéis de soroconversão (BBI, Inc., Zeptometrix, EUA) e amostras de soro sanguíneo (plasma) positivo para HIV com tempo provável de infecção estabelecido. A probabilidade de determinar corretamente a duração da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo HIV-1 grupo O, estabelecida por painéis de soroconversão, é de 100% (os dados são apresentados na Tabela 2), com base em amostras de soro de pessoas com um período de infecção condicionalmente estabelecido (n=129) é de 94% (Tabelas 3, 4; dados mostrados parcialmente).

O teste “DS-ELISA-HIV-AT-TERM” avaliou a possibilidade de estudar amostras de soro sanguíneo (plasma) contendo anticorpos para HIV-1 de vários subtipos, incluindo HIV-1 grupo O: painel de referência QCS 42-28-327 - 03Р (GISC) (subtipos A, B, C) (exceto amostra nº 24 contendo anticorpos para HIV-2), 1º painel de referência internacional anti-HIV (Código NIBSC: 02/210) (subtipos A, B, C, E) (exceto amostra nº 5, contendo anticorpos para HIV-2), amostras de soro sanguíneo (plasma) contendo anticorpos para HIV-1 grupo O (nº 1342, K00175, K00259; BioMex). Os resultados indicam a possibilidade de estudar amostras de soro sanguíneo (plasma) contendo anticorpos contra HIV-1 pertencentes a vários subtipos, incluindo HIV-1 grupo O, no teste “DS-ELISA-HIV-AT-SROC”.

A especificidade do kit de reagentes DS-ELISA-HIV-AT-SROC foi determinada através do estudo de amostras de soro sanguíneo de doadores (n=352), que demonstraram resultado negativo no ELISA. A especificidade foi de 100%. Além disso, foram testadas 255 amostras de soro sanguíneo (negativas em ELISA):

■ 167 amostras de soro sanguíneo de gestantes e pacientes com doenças infecciosas;

■ 128 amostras de soro sanguíneo de pacientes com diversas doenças não transmissíveis.

A especificidade foi de 100%.

Os dados obtidos mostram a alta eficiência do sistema de teste desenvolvido “DS-ELISA-HIV-AT-SROC” na determinação do momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo HIV-1 grupo O, em soro (plasma) sangue humano.

1. Sistema de teste imunoabsorvente ligado a enzima para determinar o momento provável da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo HIV-1 grupo O, em soro sanguíneo humano (plasma), caracterizado pelo fato de incluir um imunoabsorvente baseado em antígenos virais da imunodeficiência humana tipo 1 (env HIV-1 e HIV-1 grupo O), solução de diluição de amostra (SDS) e reagentes de detecção, que são conjugados, cromogênio/substrato.

2. Um método para determinar o momento provável da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), incluindo o HIV-1 grupo O, no soro sanguíneo humano (plasma), com base em diferentes conteúdos de anticorpos, dependendo do momento da infecção, incluindo a separação da amostra de teste em duas partes e diluição de uma delas; exame de ambas as partes (nativa e diluída) da amostra de soro sanguíneo do paciente usando o sistema de teste imunoenzimático descrito no parágrafo 1; determinação de densidade óptica (DO) de amostras nativas e diluídas e RRS; cálculo do valor médio do OP RRS; cálculo da queda percentual na DO de uma amostra diluída em relação a uma não diluída usando a fórmula
%   queda   O P = 100% − O P   reconhecimento da amostra − O P s r. R R S O P   AMOSTRA INTEIRA × 100% ,
neste caso, o período provável de infecção é considerado “precoce” se a queda da DO for >40%, e “tardio” se a queda da DO for ≤40%.

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A invenção refere-se ao campo da biotecnologia e da medicina. Um sistema de teste imunoabsorvente ligado a enzima para determinar o momento provável da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1, incluindo o HIV-1 grupo O, no soro sanguíneo humano. O sistema de teste inclui um imunoabsorvente baseado em antígenos do vírus da imunodeficiência humana tipo 1, uma solução para diluição de amostras e reagentes de detecção. A invenção também se refere a um método para determinar o momento provável de infecção com o vírus da imunodeficiência humana tipo 1, incluindo o HIV-1 grupo O, no soro sanguíneo humano, examinando o soro sanguíneo do paciente usando o sistema de teste imunoabsorvente ligado a enzima descrito. A invenção torna possível determinar de forma rápida e fácil o momento provável da infecção pelo HIV. 2 n.p. arquivos, 4 mesas, 2 pr.

Palavras-chave

anotação artigo científico sobre medicina fundamental, autora do trabalho científico - Yulia Evgenievna Zagryadskaya, Dmitry Aleksandrovich Neshumaev, Yulia Aleksandrovna Kokotyukha, Elena Maratovna Meirmanova, Igor Alekseevich Olkhovsky

A situação epidemiológica relativa à infecção pelo VIH na Federação Russa continua extremamente tensa, o que exige a procura de soluções novas, mais eficazes e económicas destinadas a combater a epidemia. A inclusão de estudos laboratoriais que utilizem um sistema de testes para determinar a duração da infecção pelo VIH na prática rotineira da vigilância epidemiológica permitirá determinar a frequência de casos precoces de infecção entre indivíduos seropositivos recentemente identificados. A análise deste critério ao nível da população ajudará a avaliar objectivamente a eficácia das medidas preventivas e anti-epidémicas realizadas num determinado território. Aumentar a objectividade na determinação do tempo decorrido desde a infecção pelo VIH-1 utilizando o sistema de teste DS-ELISA-HIV-AT-SROC proporciona a oportunidade de utilizar os resultados obtidos em investigações epidemiológicas para identificar de forma mais precisa e completa as pessoas de contacto. A determinação da duração provável da infecção também pode ser necessária na decisão sobre a prescrição da terapia antirretroviral, como um estudo adicional ao monitorar a resistência aos medicamentos contra o HIV. O objectivo deste trabalho foi determinar a eficácia do novo sistema de testes DS-ELISA-HIV-AT-SROC para estabelecer o momento provável da infecção pelo VIH-1. Foram examinadas amostras de soro sanguíneo (plasma) de indivíduos infectados pelo HIV com período de infecção epidemiologicamente estabelecido (n = 281) e amostras de painéis comerciais de soroconversão. Os resultados do estudo mostraram que a probabilidade de determinar correctamente a duração da infecção pelo VIH-1 para amostras de indivíduos com a data mais provável de infecção estabelecida foi de 95%, para amostras provenientes de painéis comerciais de seroconversão de 100%. Os dados obtidos demonstraram a elevada eficiência do sistema de teste DS-ELISA-HIV-AT-SROC na determinação do momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1, o que, aliado à rapidez e simplicidade do procedimento, permite-nos recomendar para uso na prática laboratorial.

tópicos relacionados trabalhos científicos sobre medicina fundamental, o autor do trabalho científico é Yulia Evgenievna Zagryadskaya, Dmitry Aleksandrovich Neshumaev, Yulia Aleksandrovna Kokotyukha, Elena Maratovna Meirmanova, Igor Alekseevich Olkhovsky

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Avaliação de um novo ensaio "DS-EIA-HIV-AB-TERM" para determinar o momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1)

A situação epidemiológica da infecção pelo VIH na Rússia continua a ser extremamente rigorosa, o que exige uma procura de soluções novas, mais eficientes e económicas destinadas a combater a epidemia. A inclusão de estudos laboratoriais com a utilização de um sistema de testes para a determinação da distância da infecção pelo VIH nas práticas de vigilância de rotina permitirá determinar a frequência de ocorrência de casos precoces de infecções entre pessoas seropositivas recentemente diagnosticadas. A análise deste critério ao nível da população ajudará a avaliar objectivamente a eficácia das actividades de prevenção e controlo realizadas numa determinada área. O aumento da objetividade na determinação do tempo decorrido desde o momento da infecção do HIV-1 com a utilização do sistema de testes DSEIA-HIV-Ab-TERM oferece a oportunidade de utilizar os resultados obtidos na investigação epidemiológica para fins de identificação mais precisa e completa das pessoas de contacto. A determinação do período provável de infecção também pode ser necessária na resolução da questão da prescrição da terapia antirretroviral como estudo complementar no monitoramento da resistência aos medicamentos do HIV. O objectivo deste trabalho foi determinar a eficácia do novo sistema de testes DS-EIAHIV-Ab-TERM para a determinação do momento provável da infecção pelo VIH-1. Foram estudadas amostras de soro (plasma) de sangue de pessoas infectadas pelo HIV com tempo de infecção epidemiologicamente estabelecido (n = 281) e amostras de painéis comerciais de soroconversão. Os resultados do estudo realizado mostraram que a probabilidade de detecção correta da distância da infecção pelo HIV-1 para amostras de indivíduos com o momento mais provável do fato estabelecido da infecção foi de 95%, para amostras de painéis comerciais de soroconversão de 100%. Os dados demonstraram a elevada eficácia do sistema de teste DS-“EIAHIV-Ab-TERM” na determinação do momento mais provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1, que em combinação com a rapidez e simplicidade do procedimento permite recomendar para uso na prática laboratorial.

Texto do trabalho científico sobre o tema “Avaliação do novo sistema de teste ds-ifa-vich-at-srok para determinar o momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1)”

UDC 616.98:578.828.6]-092:612.017.1.064]-078

Zagryadskaya Yu.E.1, Neshumaev D.A.2, Kokotyukha Yu.A.2, Meirmanova E.M.2, Olkhovsky I.A.3, Puzyrev V.F.1, Burkov AN.1, Ulanova T.I.1

avaliação do novo sistema de teste ds-ifa-vich-at-srok para determinar o momento provável da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1)

1OOO NPO Diagnostic Systems, 603093, Nizhny Novgorod; 2Centro Regional de Krasnoyarsk para Prevenção e Controle da AIDS, 660049, Krasnoyarsk; 3FGBU "Centro de Pesquisa Hematológica do Ministério da Saúde da Rússia" (filial de Krasnoyarsk), Krasnoyarsk

A situação epidemiológica relativa à infecção pelo VIH na Federação Russa continua extremamente tensa, o que exige a procura de soluções novas, mais eficazes e económicas destinadas a combater a epidemia. A inclusão de estudos laboratoriais que utilizem um sistema de testes para determinar a duração da infecção pelo VIH na prática rotineira da vigilância epidemiológica permitirá determinar a frequência de casos precoces de infecção entre indivíduos seropositivos recentemente identificados. A análise deste critério ao nível da população ajudará a avaliar objectivamente a eficácia das medidas preventivas e anti-epidémicas realizadas num determinado território. O aumento da objetividade na determinação do tempo decorrido desde a infecção pelo HIV-1 usando o sistema de teste DS-ELISA-HIV-AT-SROC oferece a oportunidade de usar os resultados obtidos em investigações epidemiológicas para identificar de forma mais precisa e completa as pessoas de contato. A determinação da duração provável da infecção também pode ser necessária na decisão sobre a prescrição da terapia antirretroviral, como um estudo adicional ao monitorar a resistência aos medicamentos contra o HIV.

O objectivo deste trabalho foi determinar a eficácia do novo sistema de testes DS-ELISA-HIV-AT-SROC para estabelecer o momento provável da infecção pelo VIH-1.

Foram estudadas amostras de soro sanguíneo (plasma) de indivíduos infectados pelo HIV com período de infecção epidemiologicamente estabelecido (n = 281) e amostras de painéis comerciais de soroconversão. Os resultados do estudo mostraram que a probabilidade de determinar corretamente a duração da infecção pelo HIV-1 para amostras de indivíduos com o período mais provável de infecção estabelecida foi de 95%, para amostras de painéis comerciais de soroconversão - 100%. Os dados obtidos demonstraram a elevada eficiência do sistema de teste DS-ELISA-HIV-AT-SROC na determinação do momento provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1, o que, aliado à rapidez e simplicidade do procedimento, permite-nos recomendar para uso na prática laboratorial.

Palavras-chave: infecção precoce pelo HIV; infecção prolongada pelo VIH; diferenciação da infecção precoce pelo HIV; duração da infecção pelo HIV; VIH-1.

Para citação: Epidemiologia e doenças infecciosas. 2015; 20 (3): 23-27. Zagryadskaya Yu.E.1, Neshumaev D. A2, Kokotyukha Yu.A.2, Meyrmanova E.M.2, Olkhovskiy I.A.3, Puzyrev V.F.1, Burkov A.N.1, Ulanova T.I."\ AVALIAÇÃO DE UM NOVO "DS-EIA- HIV- ENSAIO AB-TERM" PARA DETERMINAR O TEMPO PROVÁVEL DE INFECÇÃO PELO VÍRUS DA IMUNODEFICIÊNCIA HUMANA -1 (HIV-1)

JNPO "Sistemas de Diagnóstico", 22, Yablonevaya Str. , Nizhniy Novgorod, Federação Russa, 603093

2Centro Regional de Prevenção da AIDS de Krasnoyarsk, 45, Karla Marksa Str., Krasnoyarsk, Federação Russa, 660049

3Centro Científico Hematológico (filial de Krasnoyarsk), 50, Akademgorodok, Krasnoyarsk, Federação Russa, 660036

A situação epidemiológica da infecção pelo VIH na Rússia continua a ser extremamente rigorosa, o que exige uma procura de soluções novas, mais eficientes e económicas destinadas a combater a epidemia. A inclusão de estudos laboratoriais com utilização de sistema de testes para determinação da distância

da infecção pelo VIH nas práticas de vigilância de rotina permitirá determinar a frequência de ocorrência de casos precoces de infecções entre pessoas seropositivas recentemente diagnosticadas. A análise deste critério ao nível da população ajudará a avaliar objectivamente a eficácia das actividades de prevenção e controlo realizadas numa determinada área. O aumento da objetividade na determinação do tempo decorrido desde o momento da infecção do HIV-1 com a utilização do sistema de testes DS-EIA-HIV-Ab-TERM oferece a oportunidade de utilizar os resultados obtidos na investigação epidemiológica para o efeito identificação mais precisa e completa das pessoas de contacto. A determinação do período provável de infecção também pode ser necessária na resolução da questão da prescrição da terapia antirretroviral como estudo complementar no monitoramento da resistência aos medicamentos do HIV. O objetivo deste trabalho foi determinar a eficácia do novo sistema de testes DS-EIA-HIV-Ab-TERM para a determinação do momento provável da infecção pelo HIV-1. Foram estudadas amostras de soro (plasma) de sangue de pessoas infectadas pelo HIV com tempo de infecção epidemiologicamente estabelecido (n = 281) e amostras de painéis comerciais de soroconversão. Os resultados do estudo realizado mostraram que a probabilidade de detecção correta da distância da infecção pelo HIV-1 para amostras de indivíduos com momento mais provável do fato estabelecido da infecção foi de 95%, para amostras de painéis comerciais de soroconversão - 100%. Os dados demonstraram a elevada eficácia do sistema de testes DS-"EIA-HIV-Ab-TERM" na determinação do momento mais provável de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1, que em combinação com a rapidez e simplicidade do procedimento permite recomendá-lo para uso na prática laboratorial.

Palavras-chave: infecção precoce pelo HIV; infecção prolongada pelo VIH; diferenciação da infecção precoce pelo HIV; o afastamento da infecção pelo VIH; VIH-1.

Citação: Epidemiologiya i Infektsionnye Bolezni. 2015; 20(3): 23-27. (Em russo.)

Para correspondência: Yulia Evgenievna Zagryadskaya, e-mail: [e-mail protegido]

A propagação da infecção causada pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) continua a ser um problema premente no mundo moderno. O sistema de vigilância epidemiológica, incluindo diagnóstico laboratorial, tratamento e medidas preventivas com ampla cobertura da população, é o principal meio de combate à infecção pelo VIH.

O algoritmo padrão para diagnóstico de infecção pelo HIV, adotado na Federação Russa, e as tecnologias laboratoriais disponíveis não permitem determinar objetivamente o período provável de infecção pelo HIV. Contudo, a identificação de casos verdadeiros de infecção precoce pelo VIH pode ser uma medida útil para complementar parâmetros epidemiológicos básicos, como a incidência ou a prevalência. Este indicador permitir-nos-á avaliar a velocidade de desenvolvimento da epidemia com maior precisão e rapidez em comparação com os indicadores geralmente aceites. Os dados obtidos podem ser considerados como critério para determinar a eficácia das medidas preventivas e antiepidémicas realizadas num determinado território. Para avaliar a dinâmica do processo infeccioso, é necessário conhecer não tanto o número total de pacientes infectados (ou indicadores de prevalência da infecção e prevalência da população), mas sim o número de indivíduos recém-infectados ao longo de um determinado período. período de tempo. A partir do trabalho de J. Eaton e T. Hallett sabe-se que a dinâmica dos incidentes não se correlaciona com a prevalência da infecção pelo HIV na população.

Além disso, informações objectivas sobre a duração provável da infecção podem certamente fornecer uma ajuda significativa na investigação epidemiológica das rotas de infecção e na identificação atempada do número máximo de pessoas de contacto. Foi demonstrado que metade de todos os casos de infecção pelo VIH ocorrem em indivíduos numa fase inicial da infecção, o que apoia a estratégia de utilização precoce da terapia anti-retroviral.

Paralelamente, a monitorização genética molecular no sistema de vigilância epidemiológica, complementada pela investigação sobre a duração da infecção, pode permitir-nos passar do nível da análise filogenética de subtipos e estirpes resistentes do VIH para o nível dos estudos filodinâmicos.

Nos últimos anos, os serviços laboratoriais no estrangeiro têm conseguido avaliar a incidência de novos casos de infecção (incidência). Os testes foram desenvolvidos e continuam a ser melhorados para diferenciar a infecção precoce pelo VIH. Coleções de amostras biológicas foram estabelecidas para avaliar tais testes, e essas coleções estão em constante expansão.

Em conexão com o acima exposto, o desenvolvimento e uso de equipamentos de teste domésticos no trabalho dos centros de AIDS

sistemas que permitam a diferenciação da infecção precoce pelo VIH terão efeitos económicos e práticos positivos. A utilização do teste desenvolvido na prática clínica pode tornar-se uma fonte útil de informação e um critério objetivo para avaliar a eficácia da implementação de programas estaduais e regionais de saúde para a prevenção, diagnóstico e tratamento da infecção pelo HIV.

O objetivo do estudo foi avaliar a eficácia do sistema de teste desenvolvido DS-ELISA-HIV-AT-SROC para estabelecer o momento provável da infecção pelo HIV-1.

Materiais e métodos

O trabalho foi realizado na NPO Diagnostic Systems LLC (Nizhny Novgorod). Amostras de soro sanguíneo (plasma) de indivíduos infectados pelo HIV com períodos de infecção epidemiologicamente estabelecidos (n = 281; grupo M, subtipo A) foram fornecidas pelo Centro Regional de Krasnoyarsk para a Prevenção e Controle da AIDS (Krasnoyarsk). A provável duração da infecção foi determinada pelo exame de amostras de soro sanguíneo (plasma) de pacientes submetidos a exames repetidos com curto intervalo de tempo (2-4 semanas), de acordo com a dinâmica dos marcadores laboratoriais da infecção pelo HIV, levando em consideração a história epidemiológica. e em pacientes infectados pelo HIV submetidos a exame clínico, há mais de três anos.

Paralelamente, foram estudadas amostras de 33 painéis comerciais de soroconversão fabricados pela Zeptometrix Corp. e SeraCare Life Sciences (EUA) (grupo M, subtipo B). Além disso, a possibilidade de estudar amostras de soro sanguíneo (plasma) contendo anticorpos para HIV-1 de vários subtipos, incluindo HIV-1 grupo O, foi avaliada testando amostras dos seguintes painéis comerciais: "Painel de referência de soros de sangue humano contendo e não contendo anticorpos para HIV tipo 1 (subtipos A, B, C) e tipo 2" (Avicenna Medical Center, Rússia) (exceto amostra nº 24 contendo anticorpos para HIV-2); 1º painel internacional de referência anti-HIV (código NIBSC: 02/210) (subtipos A, B, C, E) (exceto amostra nº 5 contendo anticorpos para HIV-2); Painel de subtipo misto anti-HIV (MSP-HIV-001) (exceto para amostras nº 19, 20 contendo anticorpos para HIV-2) e amostras de soro sanguíneo (plasma) contendo anticorpos para HIV-1 grupo O (nº 1342, K00175 , K00259; BioMex).

O princípio ativo do sistema de teste desenvolvido é: antígenos recombinantes semelhantes às proteínas estruturais HIV-1 gp160 (env) e gp41 (env) do HIV-1 grupo O produzidos pela NPO Diagnostic Systems LLC, adsorvidos em tiras de um comprimido dobrável de poliestireno ; os conjugados são os antígenos recombinantes HIV-1 gp41 e HIV-1 grupo O, marcados com biotina, e estreptavidina, marcado com peroxidase de rábano. Durante o desenvolvimento do teste, foram selecionados antígenos do HIV-1 que apresentaram

que têm maior significado diagnóstico: gp160, que inclui a região imunodominante de gp41, e gp41 do grupo O do HIV-1. O esquema de análise no sistema de teste DS-ELISA-HIV-AT-SROC é um “sanduíche” de dois estágios versão de um ensaio imunoenzimático (ELISA) com introdução gradual de conjugados. Foi desenvolvido um sistema de avaliação visual da introdução de todos os componentes e amostras. O tempo de reação leva menos de duas horas. Os resultados são registrados usando um espectrofotômetro.

O intervalo de confiança foi avaliado para a determinação correta do período de infecção usando o sistema de teste com uma probabilidade de confiança de 95% usando o programa R. Herbert Confidence Interval Calculator.

Resultados e discussão

A estratégia implementada no sistema de teste baseia-se na alteração da composição quantitativa e qualitativa dos anticorpos na amostra, dependendo da duração da infecção. Ao estudar amostras de soro sanguíneo (plasma) usando ELISA, foi determinada a densidade óptica (DO) de amostras nativas e diluídas, refletindo o nível de anticorpos específicos do HIV. Com base na mudança na DO da amostra após a diluição em relação à DO da amostra nativa, foi estabelecida infecção precoce ou infecção por HIV a longo prazo.

Os estudos realizados mostraram a alta eficiência do sistema de teste desenvolvido DS-ELISA-HIV-AT-SROC. Tendo a sensibilidade dos testes de terceira geração para detecção de anticorpos contra o HIV-1, o DS-ELISA-HIV-AT-SROC determinou corretamente a duração da infecção pelo HIV-1 para todas as amostras de painéis comerciais de soroconversão (Tabelas 1, 2).

A probabilidade de determinar correctamente a duração da infecção pelo VIH-1 para amostras com períodos de infecção epidemiologicamente estabelecidos foi de 95% (ver Tabela 2).

É importante notar que a resposta imunitária ao VIH de um indivíduo seleccionado aleatoriamente numa população pode, em alguns casos, ser hiper ou hiper-

tabela 1

Resultados dos testes de painéis de soroconversão em DS-ELISA-HIV-AT-SROC

Soroconversão - Dias a partir do 1º Número de amostras positivas no painel / número total de amostras no painel Resultado do teste em

teste de painel de amostragem de sangue para detecção de anticorpos para HIV-1/2, CE0483 DS-ELISA-HIV-AT-SROC DS-ELISA-HIV-AT-SROC

VV1 RYAV 914 31 5/5 5/5 Infecção precoce por HIV-1

BB1 RYAV 916 35 2/6 2/6 O mesmo

BB1 RYAV 925 49 2/6 2/6"

BB1 RYAV 929 28 3/7 3/7"

BB1 RYAV 930 10 2/4 2/4"

BB1 RYAV 931 42 4/9 4/9"

BB1 RYAV 933 27 2/3 2/3"

BB1 RYAV 934 11 3/3 3/3"

BB1 RYAV 940 29 6/8 6/8"

BB1 RYAV 941 25 3/6 3/6"

BB1 RYAV 942 14 0/4 0/4"

BB1 RYAV 944 16 2/6 2/6"

BB1 RYAV 947 20 3/4 3/4"

BB1 RYAV 951 19 1/6 1/6"

BB1 RYAV 952 21 3/6 3/6"

BB1 RYAV 955 14 2/5 2/5"

BB1 RYAV 965 21 3/6 3/6"

BB1 RYAV 966 51 3/10 3/10"

BB1 RYAV 968 35 4/10 4/10"

BB1 RYAV 969 77 3/10 3/10"

ZMS NGU 6243 33 2/10 2/10"

ZMS NGU 6247 30 1/10 1/10"

ZMC NSU 9014 31 5/7 5/7"

ZMC NSU 9017 35 3/6 3/6"

ZMC NSU 9018 33 2/11 2/11"

ZMC NSU 9021 57 2/17 2/17"

ZMC NSU 9022 29 1/9 1/9"

ZMC VIH 9030 54 1/16 1/16"

ZMC HIV 9031 157 19/03 19/03"

ZMC HIV 9032 55 7/14 7/14"

ZMC VIH 9077 104 15/29 15/29"

ZMC NSU 9079 95 15/25 15/25"

ZMC HIV 12008 42 13/04 13/04"

O número total de amostras positivas...

reativo. A distribuição das características imunológicas da população geral em uma população sempre contém variantes que não se enquadram no intervalo considerado normal. Por esta razão, estabelecer o momento provável da infecção com base na dinâmica dos marcadores laboratoriais da infecção pelo HIV pode, em alguns casos, ser impreciso. Foi demonstrado que para amostras com o período mais provável de infecção estabelecida até 3 meses, a exatidão da determinação do período de infecção é totalmente consistente

mesa 2

Correção na determinação do período provável de infecção pelo HIV-1 usando DS-ELISA-HIV-AT-SROC

Número O número está correto Correção da determinação pelo teste DS-ELISA

Amostras Um grupo de amostras determinado sobre o momento provável da infecção

no grupo de amostras do grupo HIV-1 (com nível de confiança de 95%), %*

Com epidemiologia até 3 meses 81 81 100,00 (95,50-100,00)

estabelecido gicamente - 3-6 meses 47 42 89,36 (77,41-95,37)

ao longo do tempo

Infecção pelo HIV-1 6-9 meses 22 17 77,27 (56,56-89,88)

até 9 meses 150 140 93,33 (88,16-96,34)

9 meses ou mais (nível CD4+ desconhecido) 79 76 96,20 (89,42-98,70)

9 meses ou mais (nível CD4+ baixo 52 51 98,08 (89,88-99,66)

(< 200 кл/мл)

9 meses e mais 131 127 96,95 (92,41-98,81)

Resultado geral... 281 267 95,02 (91,81-97,01)

Soroconversão - Até 157 dias 117 117 100 (96,82-100,00)

painéis finais

Observação. * - é necessário levar em consideração o caráter probabilístico do período de infecção estabelecido durante os testes laboratoriais.

dados obtidos para amostras com um período de infecção pelo HIV precisamente estabelecido (ou seja, para amostras de painéis de soroconversão) e é de 100%. Ao examinar amostras do grupo “até 9 meses”, a concordância entre os resultados dos exames e os resultados das datas de infecção pré-estabelecidas foi de 93,33%, para o grupo “infecção acima de 9 meses” - 96,95%. Um dos principais motivos para a obtenção de resultados incorretos para o grupo “infecção antes dos 9 meses” são as características individuais da resposta imune (resposta rápida). Para o grupo de pessoas infectadas há mais de 9 meses, os motivos podem ser tanto as características da resposta imunológica (resposta lenta) quanto a sororeversão (devido ao tratamento ou imunodeficiência profunda nas fases mais avançadas da infecção pelo HIV).

Ao testar painéis comerciais “Painel de referência de soros de sangue humano contendo e não contendo anticorpos para HIV tipo 1 (subtipos A, B, C) e tipo 2”, Código NIBSC: 02/210, MSP-HIV-001 e amostras nº 1342 , K00175, K00259 fornecidos pela BioMex, foi confirmada a possibilidade de estudar amostras de plasma sanguíneo contendo anticorpos para HIV-1 de vários subtipos e HIV-1 grupo O em DS-ELISA-HIV-AT-SROC.

Conclusão

Os dados obtidos indicam que o sistema de teste de imunoensaio enzimático desenvolvido permite distinguir com elevada probabilidade o período inicial de seroconversão da infecção pelo VIH e o período posterior após a infecção. A disponibilidade de pesquisas sobre a duração da infecção abre a possibilidade de utilização da informação obtida não só a nível populacional, mas também a nível individual. A alta eficiência do sistema de teste DS-ELISA-HIV-AT-SROC, aliada à rapidez e simplicidade do procedimento, permite a re-

recomendá-lo para uso na prática epidemiológica e clínica.

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Recebido em 04/03/15

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Neshumaev Dmitry Aleksandrovich, Ph.D. mel. Ciências, Doutor em Diagnóstico Laboratorial Clínico, Laboratório de Pesquisa Bacteriológica e Genética Molecular, Centro Regional de AIDS; Kokotyukha Yulia Aleksandrovna, médica em diagnóstico laboratorial clínico do laboratório de pesquisa de imunoensaios enzimáticos do Centro Regional de AIDS; Meirmanova Elena Maratovna, doutora em diagnóstico laboratorial clínico, laboratório de imunoensaios enzimáticos, Centro Regional de AIDS; Olkhovsky Igor Alekseevich, Ph.D. mel. Sci., Diretor da filial de Krasnoyarsk da Instituição Orçamentária do Estado Federal “Centro de Pesquisa Hematológica do Ministério da Saúde da Rússia”; Puzyrev Vladimir Fedorovich, Ph.D. biol. ciências, começando departamento. produção de antígenos recombinantes e conjugados pela NPO Diagnostic Systems LLC; Burkov Anatoly Nikolaevich, Doutor em Medicina. Ciências, Prof., Diretor Geral da NPO Diagnostic Systems LLC; Ulanova Tatyana Ivanovna, Doutora em Biologia. Ciências, Diretor de Pesquisa, LLC "NPO "Diagnostic Systems"

AP RITE, T.I. ULANOVA
LLC "Associação de Pesquisa e Produção "Sistemas de Diagnóstico",

Nizhny Novgorod
SISTEMAS DE TESTE IMUNO ELISA “DS-ELISA-HBeAg” e “DS-ELISA-anti-HBe” PARA DIAGNÓSTICO ESPECÍFICO E PREVISÃO DE RESULTADOS DE HEPATITE B AGUDA E CRÔNICA
A hepatite B é uma doença infecciosa viral caracterizada por

dano inflamatório ao fígado. Cerca de 1% das mortes ocorrem em

período agudo da doença, em 4-10% dos casos há transformação em crônica

processo com a possível formação de cirrose hepática subsequente e primária

hepatocarcinomas.

Apesar da tendência de diminuição da incidência de hepatite B aguda, continua a formar-se um grupo epidemiologicamente perigoso de pacientes que são diagnosticados pela primeira vez com hepatite viral crónica, bem como um grupo de portadores do agente causador da doença. . Permanece um prognóstico desfavorável devido à alta incidência de hepatite B na população em idade reprodutiva, bem como entre os adolescentes.

Portanto, agora são especialmente relevantes as questões de tratamento, prevenção e diagnóstico da hepatite B. Atualmente, os métodos de ensaio imunoenzimático são amplamente utilizados para detectar marcadores desta infecção. Os marcadores sorológicos mais importantes do HBV incluem o antígeno-e (HBeAg) e os anticorpos contra o antígeno-e (anti-HBe). O HBeAg está associado à contaminação sanguínea elevada, indicando replicação ativa do vírus da hepatite B (HBV). Foi estabelecido que altos títulos de HBeAg correspondem a alta atividade de DNA polimerase e são sempre combinados com a detecção de partículas Dane completas. Quando o soro contendo HBeAg entra no sangue de uma pessoa saudável, o risco de infecção é muitas ordens de grandeza maior do que após a ocorrência da soroconversão.

Na hepatite B aguda, o HBeAg é detectado no sangue nos estágios iniciais do processo infeccioso, já nas primeiras manifestações clínicas da doença, ficando uma semana atrás do aparecimento do HBsAg. A hepatite B aguda (AHB) de curso cíclico é caracterizada pela circulação de HBeAg de curto prazo. Logo, com 2 a 3 semanas do período ictérico, surge o anti-HBe, o que permite prever um desfecho favorável da doença.

O anti-HBe circula no sangue por 2 a 5 anos, com menos frequência por vários meses.

O início da seroconversão HBeAg-antiHBe marca uma diminuição acentuada da actividade

processo infeccioso. A detecção de HBeAg no sangue de pacientes após 2 meses de doença indica cronicidade do processo patológico. Neste caso, o anti-HBe pode formar-se muitos anos após o aparecimento de anticorpos contra o HBcAg ou pode nem ser detectado.

O aparecimento de anti-HBe pode ter valor prognóstico desfavorável em

período agudo do HBV nas formas graves, que corresponde a uma mutação na zona pré-core com

formação da cepa “e-” do HBV.

Propósito Este trabalho foi o desenvolvimento de trabalhos altamente sensíveis e específicos

sistemas de testes de imunoensaio enzimático para detecção de HBeAg e anti-HBe e avaliação de suas principais características.

Materiais e métodos.

1. Sistema de teste imunoabsorvente enzimático “DS-ELISA-HBeAg”. Início válido do teste

são anticorpos policlonais de cabra para HBeAg recombinante, produzidos pela NPO Diagnostic Systems, Nizhny Novgorod, adsorvidos na fase sólida, e um conjugado, que são anticorpos policlonais de cabra para HBeAg recombinante, marcados com peroxidase de rábano, produzido pela NPO Diagnostic Systems, Nizhny Novgorod. O esquema de análise é um “sanduíche” de estágio único. O tempo total de reação é de 1,5 horas. A amostra de soro é analisada não diluída.

2. Sistema de teste imunoabsorvente enzimático “DS-ELISA-anti-HBe”. A base do teste é

HBeAg recombinante (AHBV 102), produzido pela NPO Diagnostic Systems,

Nizhny Novgorod, sorvido na fase sólida e conjugado anti-IgG com peroxidase de rábano, produzido pela Sorbent Service, Moscou. A reação ocorre em duas etapas. O soro teste é adicionado ao antígeno imobilizado em uma diluição de 1/10 e, após incubação e remoção dos componentes não ligados, imunocomplexos específicos são detectados usando anticorpos monoclonais de camundongo contra IgG humana marcada com peroxidase de rábano.

3. Para avaliar os sistemas de teste desenvolvidos, foram utilizadas 2.178 amostras de soro

sangue. Destes, 480 eram amostras de soro de doadores saudáveis. 1680 amostras representam

são amostras de soro sanguíneo contendo vários marcadores do vírus da hepatite B.

Dezoito amostras foram obtidas ao longo do tempo de pacientes com diagnóstico clínico de hepatite B viral aguda. Anteriormente, todas as amostras foram testadas quanto à presença de HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc utilizando sistemas de teste produzidos pela NPO Diagnostic Systems, Nizhny Novgorod: “ELISA-HBsAg/m”, “DS-ELISA-HBeAg”, “ DS-ELISA-anti-HBe", "ELISA-anti-HBc".

4. Uma avaliação comparativa dos sistemas de teste desenvolvidos foi realizada usando

medicamento comercial "Monolisa HBe", produzido pela BIO-RAD, França;

Resultados e discussão. A NPO "Diagnostic Systems" desenvolveu 2 novos kits de diagnóstico: "DS-ELISA-HBeAg" e "DS-ELISA-anti-HBe". O sistema de teste “DS-ELISA-HBeAg” foi projetado para detectar o antígeno eletrônico do vírus da hepatite B no soro humano (plasma) usando um ensaio imunoenzimático e pode ser usado para diagnósticos específicos, determinando a atividade do agente infeccioso processo, prevendo a gravidade e o resultado da hepatite B.

O sistema de teste “DS-ELISA-anti-HBe” foi projetado para detectar anticorpos IgG para o antígeno e do vírus da hepatite B no soro sanguíneo humano (plasma) e pode ser

usado na previsão do curso do processo infeccioso e no monitoramento da terapia para hepatite B.

Para estudar a especificidade dos novos testes, foi avaliada a distribuição

densidade óptica (DO) de amostras de soro sanguíneo contendo e não contendo

HBeAg ou anti-HBe. Foram utilizadas amostras de soro sanguíneo de doadores saudáveis ​​e amostras de soro sanguíneo selecionadas para vários marcadores do vírus da hepatite B.

estações de transfusão de sangue. Os resultados do estudo mostraram uma separação significativa entre as duas populações. Os valores de DO das amostras de soro que não continham HBeAg variaram de 0,011 a 0,111, e o pico principal das amostras de soro contendo HBeAg variou de 2,186 a 3,186 (Figura 1a).

Figura 1a. Distribuição de DO de amostras de soro contendo e não contendoHBeAgno sistema de teste "DS-IFA-HBeAg»
O pico correspondente ao grupo de soros com baixa DO (0,3-0,6) provavelmente consiste em amostras de soro coletadas nas fases iniciais do processo infeccioso.

Já durante o período de incubação, o HBsAg e o HBeAg são naturalmente registrados no sangue dos pacientes, o que confirma seu potencial perigo epidemiológico.

Faixa de densidade óptica de amostras de soro que não contêm anti-HBe

estava na faixa de 0,002 a 0,122, e o pico principal de DO das amostras de soro contendo anti-HBe estava na faixa de 2,431 a 3,231 (Figura 1b).

Arroz. 1b. Distribuição da DO das amostras de soro contendo e não contendo anti-HSer, no sistema de teste “DS-ELISA-anti-HBeAg»
As características de distribuição da DO de amostras positivas para anti-HBe foram estudadas

soros contendo ( n=78) e não contendo HBsAg ( n=56).


Arroz. 2a. HBe- amostras de soro positivas contendoAgHBsno sistema de teste “DS-ELISA-anti-HBe».

Figura 2b. Características de distribuição de OP anti-HBe- amostras de soro positivas que não contêm AgHBsno sistema de teste "DS-ELISA-anti-HBe».
As densidades ópticas de 87% das amostras de soro positivas para anti-HBe que não continham HBsAg variaram de 0,41 a 0,81 (Figura 2b). Além disso, apenas 14% das amostras de soro positivas para anti-HBe contendo HBsAg tiveram uma DO nesta faixa (Figura 2a). Sabe-se que na fase de convalescença tardia, com reatividade negativa ao HBsAg, ocorre diminuição gradativa dos títulos de anticorpos ao HBeAg (Figura 2b). Portanto, é possível que a concentração predominante de amostras positivas para anti-HBe correspondesse a uma DO inferior a 0,8.

Os dados obtidos indicam a confiabilidade da separação dos positivos e

amostras de soro sanguíneo negativas, independentemente do estágio da doença. A sensibilidade e especificidade dos sistemas de teste “DS-ELISA-HBeAg” e “DS-ELISA-antiHBe” foram estudadas em comparação com o teste “Monolisa HBe” (BIORAD, França) (Tabela 1).

tabela 1
Características comparativas de sensibilidade e especificidade

sistemas de teste DS-ELISA-HBeAg e DS-ELISA-antiHB

Os dados apresentados na Tabela 1 mostram 100% de concordância entre os resultados.

Sabe-se que a indicação combinada de HBeAg e anti-HBe, especialmente a sua avaliação quantitativa, tem significado prognóstico adicional. Um rápido aumento no título de anti-HBe caracteriza uma resposta imune humoral ativa e praticamente elimina a ameaça de cronicidade. Analisamos alterações no conteúdo de HBeAg/anti-HBe em amostras de soro sanguíneo de pacientes com diagnóstico clínico de “hepatite viral aguda B” (Tabela 2).

mesa 2
Dinâmica da soroconversão HBeAg/anti-HBe em pacientes com VHB

* desde a admissão ao hospital
Todas as amostras de soro foram testadas quanto à presença de marcadores sorológicos

OGV: HBsAg, anti-HBc, anti-HBc IgM. O período de observação variou de 13 a 38 dias. Nos pacientes nº 1, nº 2 e nº 6, o anti-HBe foi detectado no contexto de uma diminuição no título de HBeAg. Nos pacientes nº 3 e nº 4, o anti-HBe apareceu após o desaparecimento do HBeAg do soro sanguíneo nos dias 21 e 8, respectivamente. A análise da detecção de HBeAg no soro sanguíneo do paciente nº 5 na admissão ao hospital apresentou resultado negativo. Paralelamente, a conversão para anti-HBe foi registrada já no primeiro dia do exame.

Todos os indivíduos mostraram tendência a aumentar o título de anticorpos para HBeAg em

soro sanguíneo, o que permite prever uma dinâmica favorável do quadro clínico

manifestações de síndrome respiratória aguda e recuperação rápida.

O estudo dos novos sistemas de teste mostrou sua alta confiabilidade diagnóstica. Os resultados da comparação do DS-ELISA-HBeAg e DS-ELISA-antiHBe mostraram 100% de concordância com o teste Monolisa HBe.

Ao estudar amostras de soro de pacientes com hepatite B em dinâmica, testes

confirmou alta sensibilidade e especificidade.

O curto tempo de incubação das amostras de teste e do conjugado (1 hora) permite determinar as táticas corretas para a realização das medidas terapêuticas no menor tempo possível. Os sistemas de teste criados são fáceis de usar e econômicos (são necessários 50 μl de soro para determinar o HBeAg e 10 μl de soro para determinar o anti-HBe). As características de alta qualidade dos testes permitem que sejam utilizados com sucesso na previsão do curso do processo infeccioso e no monitoramento da terapia da hepatite B.
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Publicado: J. “Diagnóstico laboratorial clínico” - 2005.-Nº 6-P.-34-37